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正文內(nèi)容

藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范指導(dǎo)原則(編輯修改稿)

2025-02-04 02:40 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 菌種的處理和保藏的程序應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)化,使盡可能減少菌種污染和生長(zhǎng)特性的改變。按統(tǒng)一操作程序制備菌株是微生物試驗(yàn)結(jié)果一致性的重要保證。 試驗(yàn)菌種應(yīng)是從國(guó)家菌種中心獲得的標(biāo)準(zhǔn)菌種,經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室復(fù)活并在適宜的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)后保存 . 菌種保藏機(jī)構(gòu) 中國(guó)菌種保藏管理委員會(huì)( CCCCM) 成立于 1979年。下設(shè) 7個(gè)菌種保藏管理中心及有關(guān)專 業(yè)實(shí)驗(yàn)室,共 12個(gè)單位實(shí)行統(tǒng)一領(lǐng)導(dǎo),按專業(yè)分工管理。 普通微生物菌種保藏管理中心( CCGMC) 中國(guó)科學(xué)院微生物研究所 中國(guó)科學(xué)院武漢病毒研究所 農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心( ACCC) 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所 醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理中心( CMCC) 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院皮膚病研究所 中國(guó)藥品生物制品檢定所 中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒研究所 工業(yè)微生物菌種保藏管理中心( CICC) 中國(guó)食品發(fā)酵工業(yè)科學(xué)研究所 抗生素菌種保藏管理中心( CACC) 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)用生物技術(shù)研究所 四川抗生素研究所 華北制藥廠抗生素研究所 獸醫(yī)微生物菌種保藏管理中心( CVCC) 農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)藥品監(jiān)察所 林業(yè)微生物菌種保藏管理中心( CFCC) 中國(guó)林業(yè)科學(xué)院 專利微生物菌種保藏管理中心( ACCC) 武漢大學(xué) 國(guó)外的菌種保藏機(jī)構(gòu) 世界菌種保藏聯(lián)合會(huì)( WFCC) 美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)菌種收藏所( ATCC) 美國(guó)農(nóng)業(yè)部北部地區(qū)研究實(shí)驗(yàn)室( NRRL) 英國(guó) 國(guó)立標(biāo)準(zhǔn)菌種收藏所( NCTC) 英國(guó) 國(guó)際真菌研究所( CMI) 荷蘭真菌中心保藏所( CBS) 日本微生物菌種保藏聯(lián)合會(huì)( JFCC) 標(biāo)準(zhǔn)菌株的復(fù)活或培養(yǎng)物的制備應(yīng)按供應(yīng)商提供的說明或按驗(yàn)證的方法進(jìn)行。 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株 — 從國(guó)內(nèi)、外菌種收藏機(jī)構(gòu)獲得的標(biāo)準(zhǔn)菌株經(jīng)復(fù)活并在適宜的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)后 ,既為標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株。 菌種的保存 低溫、干燥、缺氧、缺乏營(yíng)養(yǎng)等環(huán)境條件都可以抑制微生物的代謝和生長(zhǎng)繁殖,因此低溫、干燥和真空是菌種保藏的重要手段。 不同的微生物,應(yīng)根據(jù)其生物特征來選擇最適宜的保藏方法。 菌種 培養(yǎng)基 保存溫度 傳接時(shí)間 細(xì)菌 一般為營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)基,或根據(jù)菌種規(guī)定選用培養(yǎng)基 4~ 6℃ 芽孢菌 3~ 6個(gè)月,其他細(xì)菌 1個(gè)月 酵母菌 霉菌瓊脂或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂斜面培養(yǎng)基 4~ 6℃ 一般 3~ 6個(gè)月 真菌 PDA瓊脂或改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基 4~ 6℃ 一般 3~ 6個(gè)月 瓊脂斜面低溫保藏法 菌種 保存液( 2mL) 保存溫度 保存時(shí)間 金黃色葡萄球菌 營(yíng)養(yǎng)肉湯 1%蛋白胨甘油 水 10%~ 40%甘油 30~ 80℃ 半年以上 枯草芽孢桿菌 大腸埃希菌 膽鹽乳糖增菌液 乙型副傷寒沙門菌 銅綠假單孢桿菌 生孢梭菌 皰肉培養(yǎng)基 白色念珠菌 改良馬丁培養(yǎng)基 黑曲霉 液體冷凍保藏法 菌種的傳代和使用 工作菌種的傳代次數(shù)應(yīng)嚴(yán)格控制,不得超過 5代,(從菌種保藏中心獲得的標(biāo)準(zhǔn)菌株為第 0代)防止過度的傳代造成菌種變異。 1代是指將活的培養(yǎng)物接種到新鮮培養(yǎng)基中,任何亞培養(yǎng)的形式均被認(rèn)為是轉(zhuǎn)種或傳代一次。必要時(shí),實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)工作菌株的特性和純度進(jìn)行確認(rèn)。 凍干菌種( 0代) ↓ 適宜的增菌液約 5mL溶解蘇醒( 1代) ↓ 增菌液培養(yǎng)復(fù)壯( 2代) ↓
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