【文章內容簡介】 增強 Caspase3活性； 細胞色素 C ( CytC ) 與 Apaf（凋亡蛋白酶激活因 子）相互作用 ─→激活 Caspases9 ─→激活 Caspases 3， 6。 Apoptosis and Disease 41 2. 活性氧及胞內 Ca2+改變： 線粒體損傷 ─→ 氧化應激 ─→ 胞內 活性氧 ↑及 [Ca2+]i↑─→ ① 損傷 DNA由野生型 p53基因介導凋亡； ② 損傷膜結構 ─→脂質過氧化反應； ③ ATP↓使鈣泵失靈促進 [Ca2+]i↑─→激活核酸內切酶或蛋白激酶 C (PKC) 等途徑，介導凋亡。 Apoptosis and Disease Apoptosis and Disease 44 三、凋亡相關基因 凋亡相關基因 指可誘導或阻止細胞凋亡的基因。 抑制凋亡基因： Bcl2（屬于 Bcl2家族）； 促進凋亡基因： Bax， Bid， P53 ； 對凋亡雙向調控基因： Cmyc， Bclx。 Apoptosis and Disease 45 （一） B細胞淋巴瘤 /白血病 2家族 （ B cell lymphoma/leukemia2 ， Bcl2家族 ） 含 1個或多個 BH（ homologous domain）結構域： 1. Bcl2亞家族： Bcl Bclxl、 Bclw等（ 抑制 ）； 2. Bax亞家族： Bax、 Bak、 Bok等（ 促進凋亡 ）； 3. BH3亞家族： Bad、 Bid 、 Bik、 Hrk等（ 促進 ）。 存在： 造血細胞、上皮細胞、淋巴細胞、癌細胞等。 定位： 細胞膜、線粒體膜和內質網膜。 Apoptosis and Disease 46 Bcl2抑制凋亡的作用機制： （ 1）調節(jié) PTP活性 ─ →降低線粒體膜通透性，阻止 CytC釋放，可與 Apaf1直接結合而阻止Caspase9的激活； （ 2）與凋亡促進蛋白 Bax形成異二聚體，抑制Bax的促凋亡作用； （ 3）減少內質網 Ca2+釋放，限制核內 [Ca2+] 持續(xù) ↑； （ 4）抑制 Caspase的活化。 Apoptosis and Disease 47 （二） 野生型 P53基因（ “分子警察” ） 野生型 P53基因： 表達產物 P53蛋白是 DNA結合蛋白， G1期負責 監(jiān)測 DNA損傷并啟動修復機制，維持細胞基因 的完整性。若不能修復，則促進細胞凋亡而減 少帶有缺損或突變基因的繼續(xù)存活，被譽為 “ 基因警衛(wèi) ”。 突變型 p53基因： 編碼的 p53蛋白對細胞凋亡有 抑制作用 。 Apoptosis and Disease 48 DNA嚴重受損后 ， P53大量表達 ， 誘導細胞凋亡 Bax、 Fas、 Apaf DR …… 表 人類腫瘤 p53基因突變熱點和頻率 腫瘤型 突變頻率 （ %） 突變熱點 腫瘤型 突變頻率 （ %） 突變熱點 肺癌 56 157， 248， 273 前列腺癌 30 不確定 結腸癌 50 175， 245， 248， 273 肝細胞癌 45 249 食道癌 45 不確定 膠質癌 25 17 248 卵巢癌 44 273 乳腺癌 22 17 24 273 胰腺癌 44 273 子宮內膜癌 22 248 皮膚癌 44 24 278 甲狀腺癌 13 24 273 胃癌 41 不確定 白血病 12 17 248 頭頸鱗癌 37 248 宮頸癌 7 273 膀胱癌 34 280 軟組織肉瘤 31 不確定 Apoptosis and Disease 50 （三） Cmyc和 BclX 雙向調控凋亡，取決于刺激種類和生長環(huán)境； Cmyc基因表達，若無足夠的生長因子刺激 ─ → 細胞凋亡； BclX基因可翻譯出 2種蛋白 BclXL（抑制凋亡）； 而 BclXs（促凋亡）。 四、細胞凋亡的執(zhí)行 ? 特點： cysteinecontaining aspartatespecific protease（含 半胱氨酸 的 天門冬氨酸特異水解酶） apoptosis 凋亡過程與調控 ?和凋亡有關的兩個酶 ?作用：切割染色質 DNA ?DNase ?特點： Ca2+/Mg2+增強活性， Zn2+抑制其活性 ?Caspases ?作用：滅活凋亡抑制物 ?水解蛋白質結構，形成凋亡小體 ?水解凋亡相關活性蛋白 Caspases家族簡介 1993年 Yuan從哺乳類細胞中發(fā)現第 1個 Ced3同源分子，叫白細胞介素 1β轉換酶 （ Interleukin1 β Converting Enzyme，ICE） ， ProICE含 404個氨基酸，分子量45KD。在一定形式下可自身催化產生20KD和 10KD二個片段，聚合形成（ p20）2(p10)2雜四聚體，為活化的 ICE。 到 1998年底為止共發(fā)現有 14個 Ced3同源分子，分別定名為 Caspase114。 ? 使抑制凋亡因子失活，如 CAD/ICAD ? 破壞細胞結構，如Lamina ? 將調節(jié)區(qū)與催化區(qū)分離，使蛋白失活，如Gelsolin Caspase 如何殺死細胞？ 五、凋亡細胞的清除 —— 吞噬細胞對凋亡細胞的識別與吞噬 ?吞噬細胞凝集素（ lectin） ?血小板反應蛋白 ?磷脂酰絲氨酸受體 apoptosis 細胞凋亡與疾病的關系 —— 該“死”的細胞不死，