【文章內(nèi)容簡介】 增強 Caspase3活性； 細(xì)胞色素 C ( CytC ) 與 Apaf（凋亡蛋白酶激活因 子）相互作用 ─→激活 Caspases9 ─→激活 Caspases 3， 6。 Apoptosis and Disease 41 2. 活性氧及胞內(nèi) Ca2+改變： 線粒體損傷 ─→ 氧化應(yīng)激 ─→ 胞內(nèi) 活性氧 ↑及 [Ca2+]i↑─→ ① 損傷 DNA由野生型 p53基因介導(dǎo)凋亡； ② 損傷膜結(jié)構(gòu) ─→脂質(zhì)過氧化反應(yīng)； ③ ATP↓使鈣泵失靈促進 [Ca2+]i↑─→激活核酸內(nèi)切酶或蛋白激酶 C (PKC) 等途徑，介導(dǎo)凋亡。 Apoptosis and Disease Apoptosis and Disease 44 三、凋亡相關(guān)基因 凋亡相關(guān)基因 指可誘導(dǎo)或阻止細(xì)胞凋亡的基因。 抑制凋亡基因： Bcl2（屬于 Bcl2家族）； 促進凋亡基因： Bax， Bid， P53 ； 對凋亡雙向調(diào)控基因： Cmyc， Bclx。 Apoptosis and Disease 45 （一） B細(xì)胞淋巴瘤 /白血病 2家族 （ B cell lymphoma/leukemia2 ， Bcl2家族 ） 含 1個或多個 BH（ homologous domain）結(jié)構(gòu)域： 1. Bcl2亞家族： Bcl Bclxl、 Bclw等（ 抑制 ）； 2. Bax亞家族： Bax、 Bak、 Bok等（ 促進凋亡 ）； 3. BH3亞家族： Bad、 Bid 、 Bik、 Hrk等（ 促進 ）。 存在： 造血細(xì)胞、上皮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、癌細(xì)胞等。 定位： 細(xì)胞膜、線粒體膜和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜。 Apoptosis and Disease 46 Bcl2抑制凋亡的作用機制： （ 1）調(diào)節(jié) PTP活性 ─ →降低線粒體膜通透性，阻止 CytC釋放，可與 Apaf1直接結(jié)合而阻止Caspase9的激活； （ 2）與凋亡促進蛋白 Bax形成異二聚體，抑制Bax的促凋亡作用； （ 3）減少內(nèi)質(zhì)網(wǎng) Ca2+釋放，限制核內(nèi) [Ca2+] 持續(xù) ↑； （ 4）抑制 Caspase的活化。 Apoptosis and Disease 47 （二） 野生型 P53基因（ “分子警察” ） 野生型 P53基因： 表達產(chǎn)物 P53蛋白是 DNA結(jié)合蛋白， G1期負(fù)責(zé) 監(jiān)測 DNA損傷并啟動修復(fù)機制，維持細(xì)胞基因 的完整性。若不能修復(fù)，則促進細(xì)胞凋亡而減 少帶有缺損或突變基因的繼續(xù)存活，被譽為 “ 基因警衛(wèi) ”。 突變型 p53基因： 編碼的 p53蛋白對細(xì)胞凋亡有 抑制作用 。 Apoptosis and Disease 48 DNA嚴(yán)重受損后 ， P53大量表達 ， 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡 Bax、 Fas、 Apaf DR …… 表 人類腫瘤 p53基因突變熱點和頻率 腫瘤型 突變頻率 （ %） 突變熱點 腫瘤型 突變頻率 （ %） 突變熱點 肺癌 56 157， 248， 273 前列腺癌 30 不確定 結(jié)腸癌 50 175， 245， 248， 273 肝細(xì)胞癌 45 249 食道癌 45 不確定 膠質(zhì)癌 25 17 248 卵巢癌 44 273 乳腺癌 22 17 24 273 胰腺癌 44 273 子宮內(nèi)膜癌 22 248 皮膚癌 44 24 278 甲狀腺癌 13 24 273 胃癌 41 不確定 白血病 12 17 248 頭頸鱗癌 37 248 宮頸癌 7 273 膀胱癌 34 280 軟組織肉瘤 31 不確定 Apoptosis and Disease 50 （三） Cmyc和 BclX 雙向調(diào)控凋亡，取決于刺激種類和生長環(huán)境； Cmyc基因表達，若無足夠的生長因子刺激 ─ → 細(xì)胞凋亡； BclX基因可翻譯出 2種蛋白 BclXL（抑制凋亡）； 而 BclXs（促凋亡）。 四、細(xì)胞凋亡的執(zhí)行 ? 特點： cysteinecontaining aspartatespecific protease（含 半胱氨酸 的 天門冬氨酸特異水解酶） apoptosis 凋亡過程與調(diào)控 ?和凋亡有關(guān)的兩個酶 ?作用：切割染色質(zhì) DNA ?DNase ?特點： Ca2+/Mg2+增強活性， Zn2+抑制其活性 ?Caspases ?作用：滅活凋亡抑制物 ?水解蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，形成凋亡小體 ?水解凋亡相關(guān)活性蛋白 Caspases家族簡介 1993年 Yuan從哺乳類細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)第 1個 Ced3同源分子，叫白細(xì)胞介素 1β轉(zhuǎn)換酶 （ Interleukin1 β Converting Enzyme，ICE） ， ProICE含 404個氨基酸，分子量45KD。在一定形式下可自身催化產(chǎn)生20KD和 10KD二個片段，聚合形成（ p20）2(p10)2雜四聚體，為活化的 ICE。 到 1998年底為止共發(fā)現(xiàn)有 14個 Ced3同源分子，分別定名為 Caspase114。 ? 使抑制凋亡因子失活，如 CAD/ICAD ? 破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，如Lamina ? 將調(diào)節(jié)區(qū)與催化區(qū)分離，使蛋白失活，如Gelsolin Caspase 如何殺死細(xì)胞？ 五、凋亡細(xì)胞的清除 —— 吞噬細(xì)胞對凋亡細(xì)胞的識別與吞噬 ?吞噬細(xì)胞凝集素（ lectin） ?血小板反應(yīng)蛋白 ?磷脂酰絲氨酸受體 apoptosis 細(xì)胞凋亡與疾病的關(guān)系 —— 該“死”的細(xì)胞不死，