[經(jīng)濟(jì)學(xué)]第二節(jié)其他重要工具酶(編輯修改稿)
2024-11-12 22:29 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 酸酶 (Alkaline phosphase, calf intestinal, CAP)。 ? 從蝦提取的蝦堿性磷酸酶 （ Shrimp Alkaline Phosphatase， SAP ） 堿性磷酸酶 堿性磷酸酶 T4 多聚核苷酸激酶 （ T4 polynucleotide kinase， PNK） ? DNA 或 RNA 539。 末端的磷酸化，以便進(jìn)行連接反應(yīng)。 ? DNA 或 RNA 的末端標(biāo)記，用作探針和進(jìn)行 DNA 測序。 雙鏈 DNA片段的磷酸化 ? 在微量離心管中配置溶液如下： 37℃ 反應(yīng) 3min,70℃ 反應(yīng) 5~10分鐘使酶失活。進(jìn)一步用酒精沉淀的方法精制 DNA。 T4 polynucleotide kinase 2 181。l ATP(10mM) 5 181。l 10 reaction buffer 5 181。l 雙鏈 DNA片段 10 pmol 超純水 補(bǔ)足 50 181。l DNA 酶 I （ DNase） ? DNA 酶 I（ DNase I）是隨機(jī)水解雙鏈或單鏈 DNA的一種內(nèi)切酶，使 DNA 分子降解成帶有 5‘磷酸末端的單核苷酸和寡核苷酸的混合物。 ? 進(jìn)行重組 DNA 研究時，必須注意防止 DNA 酶的污染，否則制備的 DNA 樣品將會降解。 ? 因此使用的器皿或試劑要高溫處理，樣品中需加 EDTA，或放置冰上以破壞或抑制酶活性。 ? 用 途 – 1）與 DNA Polymerase I 一起用于切口平移（ Nick translation）。 – 2）在 Mn2+存在的條件下，為鳥槍法測序（ Shot gun sequencing）制作 DNA文庫。 – 3）用于足跡法（ Foot printing）分析 DNA蛋白質(zhì)相互作用。 – 4) DNase I 可以作用于單鏈 DNA、雙鏈 DNA、染色質(zhì)和 RNA:DNA雜交鏈。 RNA酶 A（ Ribonuclease A） ? Ribonuclease A是一種內(nèi)切核糖核酸酶，可在 C和 U殘基位置特異性降解單鏈 RNA。該酶可以切割核苷上 5’核糖與鄰近嘧啶核苷 3’核糖上磷酸基團(tuán)之間的磷酸二脂鍵。產(chǎn)生的 2’， 3’環(huán)磷酸可以水解成相應(yīng)的 3’核苷磷酸鹽。 ? 產(chǎn)品用途： –質(zhì)粒和基因組 DNA制備時用于去除 RNA； –重組蛋白質(zhì)制備過程中，除去溶液中的RNA。 質(zhì)粒提取后用 R
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1