【文章內(nèi)容簡介】 N0 處理的 1. 5 和 1. 8 倍． 磷處理組中微藻的密度變化與氮處理相似，培養(yǎng)期間， P0 處理中兩種微藻的密度基本無變化．培養(yǎng)至第 3 d， P32 處理中東海原甲藻和中肋骨條藻的密度分別是 P0 處理中的 3. 8 倍和 8 倍 。 P32 和 P8 處理中兩種藻的密度沒有顯著差異 ( P ＞ 0. 05) ． 9 圖 1 不同氮磷濃度下添加 PBDEs 時東海原甲藻優(yōu)勢種群中微藻的生長 10 3. 2 培養(yǎng)過程中的氮磷濃度變化 添加 PBDEs 的培養(yǎng)環(huán)境中，隨著培養(yǎng)時間的延長，營養(yǎng)鹽呈降低趨勢 (圖3) ． 當(dāng)培養(yǎng)至第 3 d， N0 處理中的硝酸鹽未檢出， N128 和 N512 中分別為 33. 0 和 467. 5 μmolL－ 1。 磷處理組中， P0 處理中的磷酸鹽為 0. 04 μmolL－ 1， P8 和 P32 分別降低到 0. 5 和 15. 8 μmolL－ 1． Justic 等 ［ 22］ 提出，微藻生長的溶解無機氮閾值為 1 μmolL－ 1，磷酸鹽閾值為 0. 1 μmolL－ 1，如果氮磷濃度低于該閾值，將限制圖 2 不同氮磷濃度下不添加 PBDEs 是東海原甲藻優(yōu)勢種群中微藻的生長 11 微藻的生長． 按照此標(biāo)準(zhǔn)，本研究中的 N0 和 P0 處理中微藻分別受到氮和磷的限制，而其他處理組中微藻的生長未受到氮磷營養(yǎng)鹽的限制． 3. 3 不同氮磷濃度下東海原甲藻優(yōu)勢種群的生化組分含量 隨著氮濃度的升高，單位細(xì)胞蛋白質(zhì)含量和單位體積藻液蛋白質(zhì)含量均呈現(xiàn)增加趨勢， N128 和 N512 處理中的蛋白質(zhì)含量顯著高于 N0 處理 ( P ＜ 0. 05)（圖4) ． 磷處理組顯示出相似的變化趨勢， P32 處理中的蛋白質(zhì)含量顯著高于 P0 和 P8 處理 ( P ＜ 0. 05) ，見圖 5． 相同濃度下，添加 BDE2 47 和不添加 PBDEs 相比，蛋白質(zhì)含量均未出現(xiàn)顯著差異 ( P ＞ 0. 05) ，見圖 5． 相關(guān)性分析表明，氮、磷與東海原甲藻優(yōu)勢種群的單位細(xì)胞和單位體積藻液蛋白質(zhì)含量均呈正相關(guān) ( r ＞ 0. 8， P ＜ 0. 05) ． 12 圖 3 PBDEs 時東海原甲藻優(yōu)勢種群培養(yǎng)過程中氮磷的濃度 13 圖 4 不同氮濃度下東海原甲藻優(yōu)勢種群中的蛋白質(zhì)含量 14 隨著氮濃度的升高，單位細(xì)胞碳水化合物含量成降低趨勢，其中 N0 處理顯著高于 N128 和 N512 處理 ( P ＜ 0. 05) ，而單位體積藻液中的碳水化合物含量沒有顯著差異 ( 圖 6) ． 磷處理組中， P0 中的單位細(xì)胞碳水化合物含量顯著高于 P8 和 P32 處理 ( P ＜ 0. 05) ，但單位體積藻液中的碳水化合物含量隨磷濃度的升高而呈上升趨勢 ( 圖 7) ． 相關(guān)性分析表明，氮濃度與單位細(xì)胞碳水化合物呈負(fù)相關(guān) ( r =－ 0. 圖 5 不同磷濃度下東海原甲藻優(yōu)勢種群中的蛋白質(zhì)含量 15 956， P ＜ 0. 01) ，磷濃度與單位體積碳水化合物呈正相關(guān)關(guān)系 ( r =0. 837， P ＜ 0. 05) ． 相同氮、磷濃度下，添加和不添加 PBDEs 的碳水化合物含量沒有顯著差異( P ＞ 0. 05) ，見圖 7． 圖 6 不同氮濃度下東海原甲藻優(yōu)勢種群中的碳水化合物含量 16 在同一氮、磷濃度下，添加和不添加 PBDEs 的總脂含量沒有出現(xiàn)顯著差異 ( P ＞ 0. 05) ，見圖 9．隨著氮濃度的升高，東海原甲藻優(yōu)勢種群中的單位細(xì)胞總脂含量呈降低趨勢 ( 圖 8) ，其中 N0 處理中的 單 位 細(xì) 胞 總 脂 含 量 為 0. 10 ～ 0. 11mg( 106cells)－ 1，是 N128 和 N512 處理的 1. 3 ～ 1. 4 倍． 與氮相似， P0 處理中的單位細(xì)胞總脂含量為 0. 26 ～ 0. 30 mg( 106cells)－ 1，顯著高于 P8 和 P32 處理( 0. 53 ～ 0. 69 mg ( 106 cells)－ 1) ，見圖 9．單位體積藻液的總脂含量呈相反變化圖 7 不同磷濃度下東海原甲藻優(yōu)勢種群中的碳水化合物含量 17 趨勢，隨著氮磷濃度的升高，單位體積藻液的總脂含量略呈上升趨勢，其中 N0 和 P0 處理中的單位體積藻液的總脂含量分別為 0. 008 mgmL－ 1和 0. 007 mgmL－ 1，顯著低于高氮、磷組 ( P ＜ 0. 05) ． 分別表明，氮濃度與單位細(xì)胞總脂呈負(fù)相關(guān) ( r = － 0. 956， P ＜ 0. 01) ，同時氮、磷濃度與單位體積總脂呈正相關(guān) ( 氮 : r =0. 956， P ＜ 0. 05。 磷 : r = 0. 837， P ＜ 0. 05) ． 圖 8 不同氮濃度下東海原甲藻優(yōu)勢種群中的總脂含量 18 3. 4 不同氮磷濃度下微藻種群對 BDE28 和 BDE47 的吸附 隨著氮濃度的升高，單位細(xì)胞吸附量呈顯著降低趨勢 ( 圖 10) ， N0 處理中單位細(xì)胞對 BDE28 和 BDE47 的吸附量分別為 2. 2 ng( 106cells)－ 1和 2. 9ng( 106cells)－ 1，是 N128 和 N512 處理的 1. 3 ～ 1. 9 倍． 氮濃度下 BDE28 的單位體積藻液吸附量范圖 9 不同磷濃度下東海原甲藻優(yōu)勢種群中的總脂含量 19 圍為 0. 160 ～ 0. 170 ngmL－ 1， BDE47 的吸附量為 0. 174 ～ 0. 184 ngmL－ 1，氮濃度下 BDE28 的吸附百分?jǐn)?shù)范圍為 80. 2% ～ 85. 2%， BDE47 的吸附量為 86. 8% ～ % ，不同氮濃度間的單位體積藻液吸附量和吸附百分?jǐn)?shù)均沒有顯著差異 ( P ＞ 0. 05) ． 圖 10 不同氮濃度下東海原甲藻優(yōu)勢種群對 BED28 和 BED47 的吸附 20 圖 11 不同磷濃度下東海原甲藻優(yōu)勢種群對 BDE28 和 ZBDE47 的吸附 21 磷濃 度 下， P0 處 理 的 單 位 細(xì) 胞 BDE28 和 BDE47 的 吸 附 量 分 別 為 7. 6 和 8. 4ng( 106cells)－ 1，是 P8 和 P32 處理的 5. 4 ～ 6 倍 ( 圖 11) ，顯著高于 P8 和 P32 處理 ( P ＜ 0. 01) ． 但單位體積藻液吸附量和吸附百分?jǐn)?shù)在不同磷濃度間未出現(xiàn)顯著差異 ( P ＞ 0. 05) ，不同磷濃度下單位體積藻液 BDE28 吸附量為 0. 167 ～ 0. 186 ngmL－ 1，單位體 積 藻 液 BDE47 吸 附 量 為 0. 170 ～ 0. 194ngmL－ 1。 BDE28 的 吸 附 百 分 數(shù) 為 80. 2% ～ 85. 2% ，略低于 BDE28 的吸附百分?jǐn)?shù) ( 83. 7% ～ 93. 2% ) ． 相關(guān)性研究表明，氮濃度與單位細(xì)胞 BDE28 和 BDE47 的吸附量呈負(fù)相關(guān) ( r = － 0. 956， P ＜ 0. 01) ，而單位細(xì)胞 BDE28 和 BDE47 的吸附量與單位細(xì)胞總脂呈正相關(guān)關(guān)系 ( r =0. 886， P ＜ 0. 05) 。 磷濃度與單位體積吸附量和吸附百分?jǐn)?shù)呈正相關(guān) ( r =0. 837， P ＜ 0. 05) 。 同時單位體積吸附量、吸附百分?jǐn)?shù)與單位體積總脂呈正相關(guān) ( r = 1. 000， P ＜ 0. 01) ． 因此，氮、磷濃度導(dǎo)致東海原甲藻優(yōu)勢種群細(xì)胞的生化組 分發(fā)生變化，進一步引起對 BDE28 和 BDE47 吸附的變化． 4 討論 4. 1 PBDEs 對東海原甲藻優(yōu)勢種群生長的影響 對小球藻和新月菱形藻在吸附多氯聯(lián)苯時的 研究發(fā)現(xiàn)，添加多氯聯(lián)苯后，兩種微藻均未出現(xiàn)異常死亡現(xiàn)象，生長狀況與不添加多氯聯(lián)苯的對照組基本一致 ［ 23］ ，這與本研究結(jié)果一致． 同一營養(yǎng)鹽水平下，添加和不添加 PBDEs 的東海原甲藻優(yōu)勢種群中微藻的生長和生化組成含量沒有顯著差異 ( 圖 2，圖 4 ～ 9) ，這可能是由于，本研究中 PBDEs 的添加是在微藻培養(yǎng)兩天后，微藻進入了指數(shù)生長期，細(xì)胞生長旺盛，對 PBDEs 的毒性有一定的耐受力 。 其次，本研究中東海原甲藻優(yōu)勢種群的生長不是一直處于 PBDEs 污染環(huán)境，且暴露時間僅為 24 h，時間較短 。 第三，研究發(fā)現(xiàn)，16 μgL－ 1的 PBDEs 對中肋骨條藻的生長具有較明顯的抑制作用，其無觀察效應(yīng)濃度為 6. 6 μgL－ 1，而本研究 PBDEs 的濃度僅為 0. 2 μgL－ 1，大大低于 PBDEs 對海洋微藻的毒性效應(yīng)濃度 ［ 24］ ． 22 此外，低劑量的有機物對微藻生長可能具有刺激作用 ［ 25］ ，本研究也發(fā)現(xiàn)，添加 PBDEs 的微藻密度略高于未添加 ( 圖 2) ，但沒有出現(xiàn)顯著差異，因此，PBDEs 對微藻的生長和生化組分沒有出現(xiàn)明顯影響． 4. 2 東海原甲藻優(yōu)勢種群對 PBDEs 的吸附與生化組分的關(guān)系 研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)環(huán)境中的氮磷等營養(yǎng)鹽匱乏時