土壤中分解尿素的細菌的分離和計數(shù)課件(1)(編輯修改稿)
2025-06-20 04:57 本頁面
【文章內容簡介】 統(tǒng)計的菌落數(shù)分別為 2 21 256，該同學以這三個平板上菌落數(shù)的平均值 163作為統(tǒng)計結果。 你認為這兩位同學的作法正確嗎？如果有問題，錯在哪？ 甲：沒有 重復實驗 （至少涂布 3個平板） 乙： A組結果誤差過大，不應用于計算平均值 15 （三）設置對照 設置對照的目的： 排除實驗組中非測試因素對實驗結果的影響，提高實驗結果的可信度。 對照實驗 是指除了 被測試 的條件外，其他條件都 相同 的實驗。滿足該條件的稱為 對照 組，未滿足該條件的稱為 實驗 組。 16 ㈢ .設置對照： ： 空白對照：不給對照組任何處理因素。 條件對照：給對照組施以部分實驗因素，但不是所要研究的 處理因素。 自身對照：對照組和實驗組都在同一研究對象上進行。 相互對照：不單設對照組，而是幾個實驗組相互對照。 課本 23頁例子中 A同學的結果與其他同學不同，可能的解釋有兩種，怎么辦？ 一是由于土樣不同 ； 二是由于培養(yǎng)基污染（混入其他 N源）或操作失誤 。 17 小結：通過這個事例可以看出，實驗結果要有說服力，對照的設置是必不可少的。 方案一： 由其他同學用與 A同學相同土樣進行實驗 方案二： 將 A同學配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進行培養(yǎng)，作為空白對照，以證明培養(yǎng)基是否受到污染。 結果預測： 如果結果與 A同學一致，則證明 A無誤；如果結果不同，則證明 A同學存在操作失誤或培養(yǎng)基的配制有問題。 18 二 .實驗的具體操作 ㈠ .土壤取樣 從肥沃、濕潤的土壤中取樣。先鏟去表層土 3厘米左右，再取樣，將樣品裝入事先準備好的信封中。 ◆取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的的信封在使用前都要滅菌。 19 [二 ]制備培養(yǎng)基 由于初次實驗，對于稀釋的范圍沒有把握，因此選擇了一個較為寬泛的范圍： 稀釋倍數(shù)為 103～ 107。 準備 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 和 以 尿素 為唯一氮源的 選擇培養(yǎng)基。 每個稀釋度下需要 3個選擇培養(yǎng)基， 1個牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。還需要 8個滅菌試管和 1個滅菌移液管 。 將稀釋相同倍數(shù)的菌液，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應明顯 多于 選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，因此，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基可以作為對照，用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了 選擇 作用。 20 ◆應在火焰旁稱取土壤 10g。 ◆在稀釋土壤溶液的過程中，每一步都要在火焰旁進行 ◆ 分離不同的微生物采用不同的稀釋度 原因：不同微生物在土壤中含量不同 目的：保證獲得菌落數(shù)在 30～ 300之間、適于計數(shù)的平板 （ 三 ） 樣品的稀釋 21 測定土壤中細菌的數(shù)量，一般選用 104 105 106 測定放線菌的數(shù)量，一般選用 103 104 105
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