20xx年醫(yī)學(xué)專(zhuān)題—人教版教學(xué)課程選修一22土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離及計(jì)數(shù)課程(編輯修改稿)
2024-11-04 17:28 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 證明A同學(xué)存在操作失誤或培養(yǎng)基的配制有問(wèn)題。,第十四頁(yè)，共三十二頁(yè)。,二.實(shí)驗(yàn)的具體操作 ㈠.土壤取樣 從肥沃、濕潤(rùn)的土壤中取樣。先鏟去表層土3cm左右，再取樣，將樣品裝入事先準(zhǔn)備好的信封中。 ◆取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的的信封在使用前都要滅菌。 ㈡.制備培養(yǎng)基： 制備以尿素(ni224。o s249。)為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基。,第十五頁(yè)，共三十二頁(yè)。,◆應(yīng)在火焰旁稱(chēng)取土壤(tǔrǎng)10g。 ◆在稀釋土壤溶液的過(guò)程中，每一步都要在火焰旁進(jìn)行,◆分離不同的微生物采用不同的稀釋度 原因：不同微生物在土壤中含量不同 目的：保證獲得(hu242。d233。)菌落數(shù)在30～300之間、適于計(jì)數(shù)的平板,[三]樣品(y224。ngpǐn)的稀釋,第十六頁(yè)，共三十二頁(yè)。,為什么分離(fēnl237。)不同的微生物要采用不同的稀釋度？測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，選用的稀釋范圍相同嗎？,原因：土壤中各類(lèi)微生物的數(shù)量（單位：株/kg）是不同的。例如在干旱土壤中的上層樣本中：好氧及兼性厭氧細(xì)菌數(shù)約為2 185萬(wàn)，放線(xiàn)菌數(shù)約為477萬(wàn)，霉菌數(shù)約為23.1萬(wàn)。 結(jié)論：為獲得不同類(lèi)型的微生物，就需要按不同的稀釋度進(jìn)行分離，同時(shí)還應(yīng)當(dāng)有針對(duì)性地提供(t237。gōng)選擇培養(yǎng)的條件。,第十七頁(yè)，共三十二頁(yè)。,㈣.取樣(qǔy224。ng)涂布,◆實(shí)驗(yàn)時(shí)要對(duì)培養(yǎng)皿作好標(biāo)記。注明培養(yǎng)基類(lèi)型(l232。ix237。ng)、培養(yǎng)時(shí)間、稀釋度、培養(yǎng)物等。,◆如果得到了2個(gè)或2個(gè)以上菌落數(shù)目在30——300的平板，則說(shuō)明稀釋操作比較成功，并能夠進(jìn)行菌落的計(jì)數(shù)，如果同一稀釋倍數(shù)的三個(gè)重復(fù)的菌落數(shù)相差較大，表明試驗(yàn)不精確，需要(xūy224。o)重新實(shí)驗(yàn)。,第十八頁(yè)，共三十二頁(yè)。,㈤.微生物的培養(yǎng)(p233。iyǎng)與觀(guān)察,在菌落計(jì)數(shù)時(shí)，每隔24h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目。 選取菌落數(shù)目穩(wěn)定(wěnd236。ng)時(shí)的記錄作為結(jié)果，以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目。,培養(yǎng)不同微生物往往需要(xūy224。o)不同培養(yǎng)溫度。 細(xì)菌：30～37℃培養(yǎng)1～2d 放線(xiàn)菌：25～28℃培養(yǎng)5～7d 霉菌：25～28℃的溫度下培養(yǎng)3～4d。,第十九頁(yè)，共三十二頁(yè)。,微生物的培養(yǎng)(p233。iyǎng)與觀(guān)察,第二十頁(yè)，共三十二頁(yè)。,三.結(jié)果分析與評(píng)價(jià) 1.通過(guò)對(duì)照實(shí)驗(yàn)，若培養(yǎng)物有雜菌污染，菌落數(shù)偏高；若培養(yǎng)物混入其他氮源，則菌落形態(tài)多樣，菌落數(shù)偏高，難以選擇出分解尿素的微生物。 2.提示：選擇每個(gè)平板上長(zhǎng)有30—300個(gè)菌落的稀釋(xīsh236。)倍計(jì)算每克樣品的菌數(shù)最合適。同一稀釋(xīsh236。)倍數(shù)的三個(gè)重復(fù)的菌落
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