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球蛋白的分離純化與鑒定(編輯修改稿)

2025-06-18 07:59 本頁面
 

【文章內容簡介】 二、實驗原理 血清 ?球蛋白的分離、純化及鑒定 :分離球蛋白與清蛋白。 :去除球蛋白中的無機鹽 ( 脫鹽 ) 。 :將 ?球蛋白與 ?、 ?球蛋白分離。 :鑒定 ?球蛋白及純度。 Company Logo 三、操作步驟 血清 ?球蛋白的分離、純化及鑒定 :分離球蛋白與清蛋白 取血清 ml,緩慢滴入飽和 (NH4)2SO4溶液 ml, 邊加邊搖,混勻后于室溫中放置 10分鐘,然后 10000rpm 離心 10分鐘,并小心 傾去上清液 。 沉淀加蒸餾水 ml, 使之溶解,即為 粗提的球蛋白溶液 。 Company Logo 三、操作步驟 血清 ?球蛋白的分離、純化及鑒定 :去除球蛋白中的無機鹽 (脫鹽) ( 1)裝柱: ( a) 固定層析柱 ,保持垂直。 ( b) 排氣, 并檢查是否通暢。柱內留下約 5ml乙酸銨。 ( c) 灌膠 : 用滴管沿管壁 自頂部加入攪拌均勻的 SephadexG25懸液,打 開底部出口,凝膠隨柱內溶液慢慢流下而均勻沉降,不斷加入 SephadexG25,至凝膠層積集至約 15cm高度即可, 床面上保持有少 許溶液 。關閉出口。 ? 避免氣泡、紋路,凝膠面始終低于液面。 ? 如凝膠表面不平時,可用玻棒輕輕攪動,讓凝膠自然沉 降,使表層平整。 Company Logo 三、操作步驟 血清 ?球蛋白的分離、純化及鑒定 ( 2)上樣與洗脫: 凝膠面始終低于液面
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