【文章內(nèi)容簡介】
氨基酸 (如酪氨酸 , 色氨酸等 )殘基上的苯環(huán)經(jīng)硝酸作用可生成黃色的硝基化合物 ,在堿性條件下生成物可轉(zhuǎn)變?yōu)樯畛壬牡南貂苌?, 反應(yīng)為: O H + H N O3 H O N O 2+ H2 OH O N O 2 + N a O H O NO HO H 多數(shù)蛋白質(zhì)分子含有帶苯環(huán)的氨基酸,所以都會發(fā)生黃色反應(yīng)。苯丙氨酸不易硝化,需加少量濃硫酸后才能夠發(fā)生黃色反應(yīng)。 (四 )考馬斯亮藍(lán)反應(yīng) 考馬斯亮藍(lán) G250具有紅色和藍(lán)色兩種色調(diào)。在酸性溶液中,其以游離態(tài)存在呈棕紅色:當(dāng)它與蛋白質(zhì)通過疏水作用結(jié)合后變成藍(lán)色。 它染色靈敏度高。反應(yīng)速度快,約在 2分鐘左右時(shí)間達(dá)到平衡,在室溫一小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。 在 mg蛋白質(zhì)范圍內(nèi),蛋