x5實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量監(jiān)測(cè)(編輯修改稿)
2025-06-16 03:10 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 果時(shí) ， 如果僅看到一只動(dòng)物單個(gè)基因標(biāo)記出現(xiàn)雜合型 ， 應(yīng)考慮有否發(fā)生遺傳突變 。 為了證實(shí)此點(diǎn) ， 往往需要根據(jù)動(dòng)物編號(hào)查詢(xún)?cè)撝粍?dòng)物同窩兄妹或雙親的基因標(biāo)記表型 。 如遺傳突變發(fā)生在親代 ， 則同窩兄妹均應(yīng)為雜合型或分離產(chǎn)生不同的表型 。 2021/6/15 30 如果在同窩兄妹或雙親中該基因標(biāo)記的表型與遺傳概貌圖一致 ， 應(yīng)考慮被測(cè)個(gè)體發(fā)生了遺傳突變 。 在檢查時(shí)如同時(shí)發(fā)現(xiàn)其他基因標(biāo)記的表型與遺傳概貌圖不符 ， 無(wú)論是雜合型還是純合型均應(yīng)考慮發(fā)生了遺傳污染 ， 應(yīng)立即淘汰換種 。 遺傳突變?nèi)鐭o(wú)特殊保留價(jià)值 ， 在剔除突變的個(gè)體后 ， 整個(gè)品系可以繼續(xù)保存；如有保存價(jià)值 ， 可將突變個(gè)體單獨(dú)培育成同源突變近交系 。 2021/6/15 31 第二節(jié) 微生物學(xué)與寄生蟲(chóng)學(xué)監(jiān)測(cè) 如何控制微生物和寄生蟲(chóng) ， 是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化的主要內(nèi)容之一 。 一般而言 ， 科研中使用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 ， 其微生物和寄生蟲(chóng)的控制級(jí)別越高 ， 其結(jié)果就越精確 、 越可靠 。 2021/6/15 32 一、監(jiān)測(cè)意義 1． 對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行微生物 、 病毒與寄生蟲(chóng)的監(jiān)控 ， 對(duì)保證實(shí)驗(yàn)研究的順利進(jìn)行和工作人員的身體健康具有十分重要的意義 。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被集中飼養(yǎng) ， 極易導(dǎo)致疾病的爆發(fā)與流行 。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物疾病的爆發(fā) ， 除造成動(dòng)物死亡外 ， 還會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行 ， 引起生物制品的污染 ， 對(duì)人類(lèi)健康產(chǎn)生危害 。 2021/6/15 33 2． 對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)設(shè)施的監(jiān)測(cè) ， 為確保這些設(shè)施能否控制微生物污染提供依據(jù) 。 3． 對(duì)引進(jìn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行檢疫 ， 避免病原體入侵原有的動(dòng)物群 。 4． 如動(dòng)物群發(fā)生疾病 ， 為了確證病原 ， 對(duì)患病動(dòng)物進(jìn)行病原學(xué)診斷 ， 積累對(duì)疾病的認(rèn)識(shí) ， 收集菌株和毒株 ， 進(jìn)一步研究病原 ，為診斷試劑和疫苗的制備提供菌株和毒株 。 2021/6/15 34 二、監(jiān)測(cè)方法 （一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物病毒學(xué)檢測(cè)方法 1．血清學(xué)檢測(cè) 適用于各級(jí)各類(lèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的經(jīng)常性檢測(cè)和疫情普查。常用方法有：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA)、免疫熒光試驗(yàn) (IFA)、免疫酶染色試驗(yàn) (IEA)、血凝試驗(yàn) (HA)、血凝抑制試驗(yàn) (HI)、病毒中和試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)。 2021/6/15 35 2． 病原學(xué)檢測(cè) 適用于動(dòng)物群中有疾病流行 ， 需要檢出病毒或確認(rèn)病毒存在的情況 。 檢測(cè)方法有：病毒分離與鑒定 ， 病毒顆粒 、 抗原或核酸的檢出 ， 潛在病毒的激活 ， 抗體產(chǎn)生試驗(yàn)等 。 例如：采用 HA或 HI方法檢查患病動(dòng)物排泄物或組織懸液中的血凝素抗原；采用聚丙烯酰胺凝膠電泳 (PAGE)檢查病毒基因組；采用核酸分子雜交技術(shù)或聚合酶鏈反應(yīng) (PCR)檢出組織或排泄物中的病毒核酸 。 2021/6/15 36 （ 二 ） 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物細(xì)菌學(xué)檢測(cè)方法 最常用的方法是病原菌的分離與培養(yǎng)或進(jìn)行動(dòng)物接種 。 部分病原菌 ， 如：鼠傷寒沙門(mén)菌 、 鼠棒狀桿菌 、 布氏桿菌 、 沙門(mén)菌 、 氣管敗血波氏桿菌等 ， 可采取血清學(xué)方法 ， 但仍需結(jié)合分離培養(yǎng)結(jié)果最后做出診斷 。 對(duì)于泰澤菌 ， 由于不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng) ， 因此宜采用組織壓片 、鏡檢的方法進(jìn)行檢查 ， 并結(jié)合病理檢查結(jié)果最后做出診斷 。 2021/6/15 37 （ 三 ） 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物真菌學(xué)檢測(cè)方法 目前主要采用沙氏培養(yǎng)基分離培養(yǎng) 。 皮膚真菌一般在 25℃ 培養(yǎng) ， 深部真菌在 37℃ 培養(yǎng) 。不同的真菌具有一定的菌落特點(diǎn) ， 鏡下染色檢查可進(jìn)行種屬鑒定 ， 有時(shí) ， 還需借助于生物化學(xué)反應(yīng)結(jié)果和免疫學(xué)方法進(jìn)行最后診斷 。 2021/6/15 38 （ 四 ） 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物寄生蟲(chóng)學(xué)檢測(cè)方法 1． 體外寄生蟲(chóng) 肉眼觀察法 、 透明膠紙粘取法 、 拔毛取樣法 、皮屑刮取法 、 黑背景檢查法 、 解剖鏡下通體檢查法等 ， 主要檢查蚤 、 虱 、 螨等節(jié)肢動(dòng)物 。 2021/6/15 39 2． 體內(nèi)寄生蟲(chóng) 主要檢查蠕蟲(chóng)和原蟲(chóng) ， 可用直接涂片法 (糞便 、 血液 、 臟器 、 腸內(nèi)容物 )、 飽和鹽水漂浮法或沉淀法 、透明膠紙肛門(mén)周?chē)橙》?、 組織或器官剖面壓印法 、 病變組織切片或壓片法 、 尿液的離心法 (如查鼠膀胱線(xiàn)蟲(chóng) )等 。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物 、 寄生蟲(chóng)檢測(cè)具體操作方法詳見(jiàn) 《 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)和寄生蟲(chóng)學(xué)的檢測(cè)方法 （ 嚙齒類(lèi)和兔類(lèi) ） 》 （ GB/200 1） 。 2021/6/15 40 三、監(jiān)測(cè)要求 1． 選定監(jiān)測(cè)項(xiàng)目 任何一種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物都有許多致病性微生物 、 寄生蟲(chóng) ， 結(jié)合具體情況選擇合適的檢測(cè)項(xiàng)目 ， 既達(dá)到保證動(dòng)物質(zhì)量的目的 ， 又可節(jié)省人力物力 。我國(guó)經(jīng)過(guò)十多年來(lái)對(duì)各地實(shí)驗(yàn)動(dòng)物感染病原微生物 、 寄生蟲(chóng)情況的調(diào)查 ， 結(jié)合其他國(guó)家的規(guī)定和經(jīng)驗(yàn) ， 制定了我國(guó)嚙齒類(lèi)和兔類(lèi)微生物學(xué) 、寄生蟲(chóng)學(xué)等級(jí)標(biāo)準(zhǔn) ， 貓 、 犬 、 猴等中型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 ， 衛(wèi)生部醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理委員會(huì)亦有初步規(guī)定 。 2021/6/15 41 2． 采樣數(shù)量和頻度 檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性 ， 要采取合適的動(dòng)物數(shù)量 。采樣動(dòng)物數(shù)可根據(jù)動(dòng)物群體的污染程度而有所不同 。 按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定 ， 動(dòng)物數(shù)量超過(guò) 100只的生產(chǎn)繁殖單元取樣如下：普通級(jí)動(dòng)物不能少于 10只；清潔級(jí)動(dòng)物檢測(cè) 5～ 10只；飼養(yǎng)于小隔離罩內(nèi)的無(wú)菌動(dòng)物和無(wú)特定病原體動(dòng)物隨機(jī)抽檢 2只；飼養(yǎng)于生產(chǎn)繁殖單元的抽檢 5～ 10只 。 2021/6/15 42 除了采樣的數(shù)量 ， 還必須考慮到檢測(cè)的間隔時(shí)間 。 一
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