論文寫作ppt課件(編輯修改稿)
2025-06-07 00:08 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 論文字?jǐn)?shù) 200字左右 , 學(xué)位論文字?jǐn)?shù) 8001000字左右。 ? 前言 只起引導(dǎo)作用，不要涉及本研究中的數(shù)據(jù)或結(jié)論，少與提要和正文重復(fù)； ? 前言 回顧歷史擇其主要者，切忌過長過繁、詳述歷史或作冗長的文獻(xiàn)綜述 ； ? 前言 評價論文的價值要恰如其分 ,實事求是 ,慎用 “ 首創(chuàng) ” 、 “ 首次發(fā)現(xiàn) ” 、“ 達(dá)到國際水平 ” 等提法 。 ? 學(xué)術(shù)論文一般不著列 “ 前言 、 “ 引言 字樣標(biāo)題 。 空腸彎曲菌（ Campylobacter jeuni， CJ）是一類微需氧型嗜熱革蘭陰性桿菌， 20世紀(jì) 80年代起被認(rèn)識到是引起人類腹瀉的主要病原菌之一 [1]。世界衛(wèi)生組織已將該菌引起的腹瀉列為最常見的食源性傳染病之一。在我國由 CJ引起的腹瀉與沙門菌引起的腹瀉同樣普遍，并已超過了志賀菌引起的腹瀉；據(jù)報道，我國從腹瀉嬰幼兒的糞便中分離 CJ的分離率達(dá) 13%左右 [2]。因此 CJ感染后若能快速準(zhǔn)確的檢測對于預(yù)防和控制 CJ病的暴發(fā)流行，早期治療感染病人以及防止嚴(yán)重并發(fā)癥的發(fā)生均有重要意義。 ? 由于 CJ營養(yǎng)要求高，培養(yǎng)條件特殊 [3]，傳統(tǒng)的檢測方法費時費力 [4]?；驒z測方法雖然有其快速準(zhǔn)確的優(yōu)點，但是不易做定量檢測，而且實驗條件要求高不易推廣應(yīng)用 [5]。血清學(xué)方法以其簡便、快速、特異性強的特點在 CJ檢測的研究中受到廣泛的關(guān)注。 Pei Z等 [6]研究發(fā)現(xiàn) CJ的甘氨酸提取物中蛋白質(zhì) PEB1(28kd)分子，具有保守性，無血清型改變，能夠作為共同抗原檢測不同血清學(xué)來源的 CJ，在本室 [7~9]前期對 CJ一系列研究的基礎(chǔ)上制備 PEB1蛋白單克隆抗體，為建立血清學(xué)方法檢測 CJ感染創(chuàng)造條件。 ? 方 法 方法或材料、對象與方法 , ? 是實驗研究、臨床試驗和現(xiàn)場調(diào)查的手段 ,是科技論文的基礎(chǔ) ,是判斷論文的科學(xué)性、先進(jìn)性的主要依據(jù) 。 ? 方 法 寫作時按研究設(shè)計的先后順序依次說明 ,應(yīng)寫得具體真實 ,以便讀者評價研究結(jié)果的 可信程度 , ? 照此 重復(fù) 實驗得到 相同的結(jié) 果 ,對論文質(zhì)量起保證作用 . ? 介紹繁簡程度應(yīng)視其研究工作的性質(zhì)、特點、要求而論。 ? 應(yīng)提供的材料 ? ①病例來源及選擇標(biāo)準(zhǔn) ,診斷及分型標(biāo)準(zhǔn) ? ②一般資料 ? ③ 治療方法 ? 需寫明的情況 : ? ① 實驗條件 。 ? ② 實驗方法 。 ? ③ 季節(jié)溫度、濕度及其它條件等 。 ? 方法如屬前人所用過 , ? 公知公認(rèn)的 ,只寫明其方法名稱 。 ? 引用他人的方法應(yīng)注明文獻(xiàn)出處； ? 對已發(fā)表但尚未為人們所熟悉的方法，要提供參考文獻(xiàn)。 ? 材料和方法一定要 詳細(xì) 敘述。 ? 、藥品的批號、效期、生產(chǎn)廠家 ,儀器的規(guī)格、型號 , ? 研究對象 ,抽樣方法 ,分組依據(jù) ,實驗觀察 ,測試 ,調(diào)查以及統(tǒng)計分析方法等都應(yīng)一一交待清楚。 ? “ 材料與方法 ” ，調(diào)查研究用 “ 對象與方法 ” 。 臨床試驗用 “ 病例與方法 ” 等。 ? ,應(yīng)介紹具體的統(tǒng)計方法 ,包括統(tǒng)計學(xué)評價強度。 ? 材料與方法交待不清或不交待 ,他人難以驗證 ,使論文可信性差 。 ? 陳舊過時的方法重復(fù)介紹或羅列無關(guān)的材料 ,給人以低水平重復(fù)的印象。 ? 1 材料與方法 ? 材料 基因工程菌 BL21(DE3)為本教研室制備，空腸彎曲菌標(biāo)準(zhǔn)株（編號： ATCC 700819）購于美國典型培養(yǎng)物保藏中心，痢疾桿菌、傷寒桿菌、變形桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌、葡萄球菌為遵義醫(yī)學(xué)院微生物教研室提供。 SP2/0Ag14為遵義醫(yī)學(xué)院中心實驗室提供， SPF級BALB/C小鼠購自中山大學(xué)實驗動物中心。鎳瓊脂糖凝膠層析柱為北京卓冠科技有限公司產(chǎn)品，BCA蛋白定量試劑盒為上海閃晶生物公司產(chǎn)品，CFA、 IFA為美國 ANTIGENIX公司產(chǎn)品，標(biāo)儀購自美國 BioTEK公司。 ? 蛋白質(zhì) Marker購自上海生命科學(xué)院， DMEM為美國INVITROGEN公司產(chǎn)品， HAT、 HT為德國 sigma公司產(chǎn)品， HRP標(biāo)記的羊抗鼠多克隆抗體為北京索萊寶生物公司產(chǎn)品， PEG為美國 MERK公司產(chǎn)品，胎牛血清為天津灝洋生物公司產(chǎn)品，小鼠單抗分型試劑盒為荷蘭 HBT公司產(chǎn)品，垂直蛋白電泳裝置為北京六一儀器廠制造， CO2培養(yǎng)箱購自美國SHEL公司。 ? 方法 ? CJ PEB1蛋白的表達(dá)、純化、定量及SDSPAGE分析 誘導(dǎo)培養(yǎng)工程菌 BL21(DE3) 表達(dá) CJ PEB1重組蛋白，通過鎳瓊脂糖凝膠層析柱純化，然后經(jīng)透析、濃縮后運用 BCA法進(jìn)行蛋白定量并通過 SDSPAGE分析純化后的蛋白。濃縮后的蛋白溶液分裝保存于 80℃ 冰箱備用。 ? 檢測 CJ PEB1蛋白單克隆抗體的酶標(biāo)板的包被 用 PEB1蛋白溶液稀釋成 5μg/ml ，加入 96孔酶標(biāo)板，每孔 100μl ，置 37℃ 孵箱 1h，然后 4℃ 放置 12h后棄去孔內(nèi)液體， PBST洗滌三次，每次 3min，然后每孔加入封閉液 200μl ，置 37℃ 孵箱 2h，然后棄去孔內(nèi)液體， PBST洗滌三次，每次 3min，冷風(fēng)吹干，錫箔紙包裝好置 4℃ 冰箱保存?zhèn)溆谩? ? 以純化的 PEB1蛋白聯(lián)合佐劑免疫 BALB／ C小鼠，待 ELISA法檢測小鼠血清效價滿意后，取小鼠脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞 SP2/0 在 50％ PEG 4000作用下融合，運用間接 ELISA法篩選陽性克隆，經(jīng)有限稀釋法 3次連續(xù)克隆化后，選擇生長良好、抗體分泌穩(wěn)定且抗體水平高的雜交瘤細(xì)胞建株，擴大培養(yǎng)后液氮保存。 ? 單克隆抗體的制備及效價檢測 調(diào)整雜交瘤細(xì)胞密度至 106／ ml，每只小鼠腹腔接種 ，誘生腹水，以 SP2/0細(xì)胞誘生的腹水作為陰性對照。 7~10天后，收集腹水，把收集的腹水在 4℃ 下4000r/min離心 5min，收集上清液，通過雙向瓊脂擴散試驗和間接 ELISA法檢測腹水中的抗體效價。 ? 雜交瘤細(xì)胞分泌的單克隆抗體的亞類鑒定 取雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清，用小鼠單抗 IgG分型試劑盒檢測單抗的亞類。 ? 通過間接 ELISA法和雙向瓊脂擴散試驗檢測腹水中抗體的效價。
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