從菠菜中提取葉綠素實(shí)驗(yàn)報(bào)告三篇(編輯修改稿)
2025-03-31 22:04 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 柱(2010 cm)、UV240 紫外分光光度計(jì) 試劑：石油醚、乙醇(95%)、菠菜葉、丙酮(化學(xué)純)、乙酸乙酯(化學(xué)純)、無(wú) 水硫酸鈉、硅膠G、中性氧化鋁(150目～160目) 提取與分離 浸泡法提取色素 在研缽中放入20 g新鮮的菠菜葉，加入20 mL3：2(體積比)石油醚—乙醇混合液，適當(dāng)研磨(不要研成糊狀，否則會(huì)給分離造成困難)，用傾析法將提取液轉(zhuǎn) 移到分液漏斗中，每次用10ml水洗滌兩次,以除去萃取液中的乙醇。洗滌時(shí)要輕輕旋蕩，以防乳化。棄去水乙醇層，石油醚層用無(wú)水硫酸鈉干燥，干燥后濾入小圓底燒瓶，在水浴上蒸發(fā)濃縮至大約l m L。 薄層層析 取四塊顯微載玻片，％羧甲基纖維素鈉調(diào)制后制板，在室溫下晾干后在110176。C活化1h。選取效果最好的一塊進(jìn)行點(diǎn)樣。 展開劑：（1）石油醚—丙酮=8:2（體積比） ?。?）石油醚—乙酸乙酯=6:4（體積比） 取活化后的層析板，點(diǎn)樣，放入預(yù)先選定展開劑的廣口瓶。瓶的內(nèi)壁貼一張高5cm，繞周長(zhǎng)4／5的濾紙，下部浸入展開劑中，蓋上瓶蓋。待展開劑上升至規(guī)定高度時(shí)，取出層析板，晾干，做出標(biāo)記。 分別用兩種展開劑展開，比較不同展開劑的展開效果。觀察斑點(diǎn)在板上的位置并排列出胡蘿卜素、葉綠素和葉黃素的Rf值的大小。注意更換展開劑時(shí)，需干燥層析瓶，不允許前一種展開劑帶入后一系統(tǒng)。 柱層析 取少量脫脂棉在小燒杯中用石油醚浸潤(rùn)后，擠壓除去氣泡，放在層析柱底部。在層析柱中加15cm石油醚。加入中性氧化鋁8克，打開柱下活塞，保持石油醚高度不變，氧化鋁在柱子中堆積。裝完后，打開下端活塞，放出溶劑，直到氧化鋁表面剩下1—2mm高為止（不能使氧化鋁表面露出液面）。 將濃縮液用滴管加到柱頂部，打開下端活塞，讓液面下降到柱面以下1mm,關(guān)閉活塞，加數(shù)滴石油醚，打開
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