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正文內(nèi)容

基因重組-生物合成概念(留存版)

  

【正文】 只限于該小范圍內(nèi),只涉及特定位點(diǎn)的同源區(qū),把這類重組稱作位點(diǎn)專一性重組(sitespecific rebination),此外還有一種重組方式,完全不依賴于序列間的同源性,使一段DNA序列插入另一段中,在形成重組分子時(shí)依賴于DNA復(fù)制完成重組,稱此類重組為異常重組(illegitimate rebination),也稱復(fù)制性重組(replicative rebination)。許多細(xì)菌除了擬核中的DNA外,還有大量很小的環(huán)狀DNA分子,這就是質(zhì)粒(plasmid)(補(bǔ)充:部分質(zhì)粒為RNA)。pBR322含有抗四環(huán)素基因(Tcr)和抗氨芐青霉素基因(Apr),并含有5種內(nèi)切酶的單一切點(diǎn)。pBR322質(zhì)粒這種小分子量的特點(diǎn),不僅易于自身DNA的純化,而且可容納較大的外源DNA片段;(2)具有兩種抗菌素抗性基因可供作轉(zhuǎn)化子的選擇記號(hào),能指示載體或重組DNA分子是否進(jìn)入宿主細(xì)胞以及外源DNA分子是否插入載體分子形成了重組子。這樣就構(gòu)成了由EcoRI核酸限制性內(nèi)切酶切割的水稻葉綠體DNA基因組庫(kù)?! BR322質(zhì)粒作為一種常用的基因克隆載體,在實(shí)際應(yīng)用中有著非常重要的地位,其中一個(gè)突出的例子就是應(yīng)用pBR322 作為克隆載體對(duì)水稻的葉綠體光誘導(dǎo)基因psbA 進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析。其中7種限制酶(從12:00位置按順時(shí)針?lè)较颍┘碋coRV、NheI、BamHI、SphI、SalI、XmaIII和NruI的識(shí)別位點(diǎn)位于四環(huán)素抗性基因內(nèi)部,另   外有2 種限制酶即ClaI和HindIII的識(shí)別位點(diǎn)是存在于這個(gè)基因的啟動(dòng)區(qū)內(nèi),在這9個(gè)限制位點(diǎn)上插入外源DNA都會(huì)導(dǎo)致tetr的失活。質(zhì)粒的復(fù)制有時(shí)和它們的宿主細(xì)胞有關(guān),某些質(zhì)粒在大腸桿菌內(nèi)的復(fù)制屬嚴(yán)緊型,而在變形桿菌內(nèi)則屬松弛型。質(zhì)粒具有可自主復(fù)制、傳給子代、也可丟失及在細(xì)菌之間轉(zhuǎn)移等特性,與細(xì)菌的遺傳變異有關(guān)。基因重組是遺傳的基本現(xiàn)象,病毒、原核生物和真核生物都存在基因重組現(xiàn)象。此后,運(yùn)用基因重組技術(shù)生產(chǎn)醫(yī)藥上重要的藥物以及在農(nóng)牧業(yè)育種等領(lǐng)域中取得了很多成果,預(yù)計(jì)下世紀(jì)在生產(chǎn)治療心血管病、鎮(zhèn)痛和清除血栓等藥物方面基因重組技術(shù)將發(fā)揮更大的作用。在進(jìn)化、繁殖、病毒感染、基因表達(dá)以致癌基因激活等過(guò)程中,基因重組都起重要作用。即基因重組  由于基因的獨(dú)立分配或連鎖基因之間的交換而在后代中出現(xiàn)親代所沒(méi)有的基因組合。同源重組的發(fā)生依賴于大范圍的DNA同源序列的聯(lián)會(huì),在重組過(guò)程中,兩條染色體或DNA分子相互交換對(duì)等的部分。生物合成  生物合成 biosynthesis 生物體內(nèi)進(jìn)行的同化反應(yīng)的總稱。質(zhì)粒上常有抗生素的抗性基因,例如,四環(huán)素抗性基因或卡那霉素抗性基因等。如果將DNA片段插入EcoRI切點(diǎn),不會(huì)影響兩個(gè)抗生素基因的表達(dá)。標(biāo)記基因往往可以賦予宿主
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