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基因重組-生物合成概念(留存版)

2025-09-18 15:14上一頁面

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【正文】 只限于該小范圍內(nèi),只涉及特定位點的同源區(qū),把這類重組稱作位點專一性重組(sitespecific rebination),此外還有一種重組方式,完全不依賴于序列間的同源性,使一段DNA序列插入另一段中,在形成重組分子時依賴于DNA復制完成重組,稱此類重組為異常重組(illegitimate rebination),也稱復制性重組(replicative rebination)。許多細菌除了擬核中的DNA外,還有大量很小的環(huán)狀DNA分子,這就是質(zhì)粒(plasmid)(補充:部分質(zhì)粒為RNA)。pBR322含有抗四環(huán)素基因(Tcr)和抗氨芐青霉素基因(Apr),并含有5種內(nèi)切酶的單一切點。pBR322質(zhì)粒這種小分子量的特點,不僅易于自身DNA的純化,而且可容納較大的外源DNA片段;(2)具有兩種抗菌素抗性基因可供作轉(zhuǎn)化子的選擇記號,能指示載體或重組DNA分子是否進入宿主細胞以及外源DNA分子是否插入載體分子形成了重組子。這樣就構成了由EcoRI核酸限制性內(nèi)切酶切割的水稻葉綠體DNA基因組庫?! BR322質(zhì)粒作為一種常用的基因克隆載體,在實際應用中有著非常重要的地位,其中一個突出的例子就是應用pBR322 作為克隆載體對水稻的葉綠體光誘導基因psbA 進行結(jié)構分析。其中7種限制酶(從12:00位置按順時針方向)即EcoRV、NheI、BamHI、SphI、SalI、XmaIII和NruI的識別位點位于四環(huán)素抗性基因內(nèi)部,另   外有2 種限制酶即ClaI和HindIII的識別位點是存在于這個基因的啟動區(qū)內(nèi),在這9個限制位點上插入外源DNA都會導致tetr的失活。質(zhì)粒的復制有時和它們的宿主細胞有關,某些質(zhì)粒在大腸桿菌內(nèi)的復制屬嚴緊型,而在變形桿菌內(nèi)則屬松弛型。質(zhì)粒具有可自主復制、傳給子代、也可丟失及在細菌之間轉(zhuǎn)移等特性,與細菌的遺傳變異有關?;蛑亟M是遺傳的基本現(xiàn)象,病毒、原核生物和真核生物都存在基因重組現(xiàn)象。此后,運用基因重組技術生產(chǎn)醫(yī)藥上重要的藥物以及在農(nóng)牧業(yè)育種等領域中取得了很多成果,預計下世紀在生產(chǎn)治療心血管病、鎮(zhèn)痛和清除血栓等藥物方面基因重組技術將發(fā)揮更大的作用。在進化、繁殖、病毒感染、基因表達以致癌基因激活等過程中,基因重組都起重要作用。即基因重組  由于基因的獨立分配或連鎖基因之間的交換而在后代中出現(xiàn)親代所沒有的基因組合。同源重組的發(fā)生依賴于大范圍的DNA同源序列的聯(lián)會,在重組過程中,兩條染色體或DNA分子相互交換對等的部分。生物合成  生物合成 biosynthesis 生物體內(nèi)進行的同化反應的總稱。質(zhì)粒上常有抗生素的抗性基因,例如,四環(huán)素抗性基因或卡那霉素抗性基因等。如果將DNA片段插入EcoRI切點,不會影響兩個抗生素基因的表達。標記基因往往可以賦予宿主
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