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基因重組-生物合成概念-全文預(yù)覽

  

【正文】 ,這個(gè)片斷和pMB8整合在一起就形成了pMB9質(zhì)粒()。當(dāng)把這種重組DNA分子轉(zhuǎn)到宿主細(xì)胞后,該基因原來賦予的表型也就消失了。經(jīng)驗(yàn)表明,為了避免在DNA的純化過程中發(fā)生鏈的斷裂,克隆載體的分子大小最好不要超過10Kb?,F(xiàn)在已知pBR322DNA分子共有24種核酸內(nèi)切限制酶的單一識(shí)別位點(diǎn)?! ?973年,科學(xué)家將質(zhì)粒作為基因的載體使用,為基因工程的誕生奠定了基礎(chǔ)。這時(shí),含有DNA插入片段的pBR322將使宿主細(xì)菌抗氨芐青霉素,但對(duì)四環(huán)素敏感。常用的人工質(zhì)粒運(yùn)載體有pBR32pSC101。分子量較小的質(zhì)粒屬松弛型。按照復(fù)制性質(zhì),可以把質(zhì)粒分為兩類:一類是嚴(yán)緊型質(zhì)粒,當(dāng)細(xì)胞染色體復(fù)制一次時(shí),質(zhì)粒也復(fù)制一次,每個(gè)細(xì)胞內(nèi)只有1~2個(gè)質(zhì)粒;另一類是松弛型質(zhì)粒,當(dāng)染色體復(fù)制停止后仍然能繼續(xù)復(fù)制,每一個(gè)細(xì)胞內(nèi)一般有20個(gè)左右質(zhì)粒。質(zhì)粒在宿主細(xì)胞體內(nèi)外都可復(fù)制!  目前,已發(fā)現(xiàn)有質(zhì)粒的細(xì)菌有幾百種,已知的絕大多數(shù)的細(xì)菌質(zhì)粒都是閉合環(huán)狀DNA分子(簡(jiǎn)稱cccDNA)。在基因工程中質(zhì)粒常被用做基因的載體(Vector)。質(zhì)?! ?  質(zhì)粒(Plasmid)  質(zhì)粒是細(xì)菌染色體外的遺傳物質(zhì),為環(huán)形閉合的雙股DNA,存在于細(xì)胞質(zhì)中,質(zhì)粒編碼非細(xì)菌生命所必須的某些生物學(xué)性狀,如性菌毛、細(xì)菌素、毒素和耐藥性等。能量供給最典型的是由ATP供給,也有通過GTP(例如:蛋白質(zhì)合成,)UTP(糖合成),CTP(磷脂的合成)供給的。(1)合成生長(zhǎng)增值所必需的物質(zhì)。真核生物,重組發(fā)生在減數(shù)分裂期同源染色體的非姊妹染色單體間,細(xì)菌可發(fā)生在轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中,通常稱這類重組為同源重組(homologous rebination),即只要兩條DNA序列相同或接近,重組可在此序列的任何一點(diǎn)發(fā)生。 [編輯本段]基因重組的類型  基因重組是指一個(gè)基因的DNA序列是由兩個(gè)或兩個(gè)以上的親本DNA組合起來的。這種重組不需要RecA蛋白的參與。大腸桿菌的同源重組需要RecA蛋白,類似的蛋白質(zhì)也存在于其他細(xì)菌中。真核生物在減數(shù)分裂時(shí),通過非同源染色體的自由組合形成各種不同的配子,雌雄配子結(jié)合產(chǎn)生基因型各不相同的后代,這種重組過程雖然也導(dǎo)致基因型的變化,但是由于它不涉及DNA分子內(nèi)的斷裂c復(fù)合,因此,不包括在狹義的基因重組的范圍之內(nèi)。1977年美國(guó)科學(xué)家首次用重組的人長(zhǎng)激素釋放抑制因子基因生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素釋放抑制因子獲得成功。細(xì)菌和放線菌均有接合現(xiàn)象。受體細(xì)胞直接吸收來自供體細(xì)胞的DNA片段,并使它整合到自己的基因組中,從而獲得供體細(xì)胞部分遺傳性狀的現(xiàn)象,稱為轉(zhuǎn)化。  有目的的將一個(gè)個(gè)體細(xì)胞內(nèi)的遺傳基因轉(zhuǎn)移到另一個(gè)不同性狀的個(gè)體細(xì)胞內(nèi)DNA分子,使之發(fā)生遺傳變異的過程。  指整段DNA在細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞間,甚至在不同物種之間
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