【正文】 ? 分離和提純各種蛋白質(zhì) (酶） ? 用 PEG/ (NH4) 2SO4 雙水相體系 ,經(jīng)一次萃取從 α 淀粉酶發(fā)酵液中分離提取 α 淀粉酶和蛋白酶 , 萃取最適宜條件為 PEG1000 ( 15 %) (NH4) 2SO4 (20 %) ,pH = 8 ,α 淀粉酶收率為 90 % ,分配系數(shù)為 19. 6 ,蛋白酶的分離系數(shù)高達15. 1。 ? ? （ 2） pH 值的影響 ? 改變兩相的電位差 ? 如體系 pH 值與蛋白質(zhì)的等電點相差越大，則蛋白質(zhì)在兩相中分配越不均勻。 ? （ 3）溫度 ? （ 4）鹽析 ? （ 5）帶溶劑 ? 帶溶劑是指這樣一種物質(zhì)，能和被萃取物質(zhì)形成復(fù)合物而易溶于溶媒中，形成的復(fù)合物在一定條件下又容易分解 ? 例如：鏈霉素在中性下能與二異辛基磷酸酯結(jié)合，從而在水相萃取到三氯乙烷中，然后在酸性下再萃取到水相 ? 二、雙水相萃取 ? 發(fā)展歷史 ? 始于 20 世紀(jì) 60年代 ,從 1956 年瑞典倫德大學(xué) Albertsson 發(fā)現(xiàn)雙水相體系 ? 1979 年德國 GBF 的 Kula 等人將雙水相萃取分離技術(shù)應(yīng)用于生物產(chǎn)品分離 ? 國內(nèi)自 20世紀(jì) 80 年代起也開展了雙水相萃取技術(shù)研究。 ? (3) 雙水相分配技術(shù)易于連續(xù)化操作。 超臨界流體萃取原理 超臨界萃取是利用 SCF作為萃取劑，從液體和固體中萃取出特定成分，以達到某種分離的目的。所以，在臨界點附近，溫度和壓力的微小變化往往會導(dǎo)致溶質(zhì)的溶解度發(fā)生幾個數(shù)量級的變化。 ? (5) 大量雜質(zhì)能夠與所有固體物質(zhì)一起去掉 ,與其它常用固液分離方法相比 ,雙水相分配技術(shù)可省去 1～ 2 個分離步驟 ,使整個分離過程更經(jīng)濟。一般認(rèn)為只要兩聚合物水溶液的憎水程度有差異，混合時就可發(fā)生相分離，且憎水程度相差越大，相分離的傾向也就大。 ? 雙水相相平衡關(guān)系 ? 影響物質(zhì)分配平衡的因素 ? （ 1）聚合物及其分子量的影響 ? 不同聚合物的水相系統(tǒng)顯示出不同的疏水性，水溶液中聚合物的疏水性按下列次序遞增 : ? 葡萄糖硫酸鹽 甲基葡萄糖 葡萄糖 羥丙基葡聚糖 甲基纖維素 聚乙烯醇 聚乙二醇 聚丙三醇 同一聚合物的疏水性隨分子量增加而增加， 其大小的選擇依賴于萃取過程的目的和方向，在 PEG/DEX系統(tǒng)中，蛋白質(zhì)的分配系數(shù)隨著 DEX相對分子量的增加而增加。 PEG的循環(huán) 。