【正文】 每瓶在培養(yǎng)前和培養(yǎng)中間階段都要來回翻轉(zhuǎn)，這樣確保容器的內(nèi)表面和膠塞內(nèi)表面跟培養(yǎng)基完全接觸， 模擬灌裝生產(chǎn)的全部樣品在 適宜的溫度下培養(yǎng) 14天，先在較低溫度（ 23～ 28℃ ）下培養(yǎng) 7天，然后在較高溫度（ 30～ 35℃ ）下培養(yǎng) 7天。 驗(yàn)證過程中驗(yàn)證方案有無修改 ,如修改是否經(jīng)批準(zhǔn)。 8. 驗(yàn)證過程的分析評價(jià)及總結(jié)方法 根據(jù)凍干粉針培養(yǎng)基模擬灌裝設(shè)計(jì)方案及技術(shù)參數(shù)、根據(jù)提供的技術(shù)資料及驗(yàn)證情況對模擬灌裝過程進(jìn)行分析評價(jià)。并記錄。每次應(yīng)選擇不同位置取樣，其重點(diǎn)為操作者可能接觸的各種表面。然后在陽性對照相同條件下培養(yǎng)至少 7 天后目視檢查。 ，應(yīng)符合規(guī)定。 、試驗(yàn)記錄，并對試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析后，填寫驗(yàn)證報(bào)告，報(bào)驗(yàn)證小組 批準(zhǔn)。 范 圍 ： 凍干粉針生產(chǎn)線無菌工藝的驗(yàn)證。 、儀表、量具等的校正。 ， 310℃ ，≥ 10分鐘干熱滅菌。浸沒時(shí)間不應(yīng)少于 4 小時(shí)。 ： 監(jiān)測項(xiàng)目 取樣方法 取樣頻率 取樣要求 操作人員無菌性檢查 棉簽擦拭法 模擬試驗(yàn)開始前，試驗(yàn)進(jìn)行一半時(shí)間，試驗(yàn)結(jié)束后，分別對操作人員進(jìn)行取樣監(jiān)測 取樣時(shí)，被取樣的操作人員應(yīng)離開灌裝機(jī)，在灌裝室的一角將雙臂平伸，靜止不動(dòng)，取樣人員按棉簽擦拭取樣法在最短時(shí)間內(nèi)取樣。 ，模擬實(shí)際生產(chǎn)的條件下，將 胰酪胨大豆胨肉湯培養(yǎng)基 灌裝到 7ml抗生素瓶中，裝量 ，蓋塞，然后放到傳送帶上，自動(dòng)傳送至軋蓋間。 原因調(diào)查結(jié)束后，應(yīng)根據(jù)調(diào)查所確定的或可能發(fā)生的原因制定糾正或改進(jìn)方案并予以實(shí)施。 有無需要改進(jìn)的模擬分裝實(shí)驗(yàn)條件及操作步驟。透明、澄清、無混濁的培養(yǎng)基判為無微生物生長；培養(yǎng)基混濁或有懸浮的菌絲或菌落，則需 做進(jìn)一步的微生物生長檢查，以確定培養(yǎng)基是否真正染菌。 ③ 、空氣微生 物數(shù)量監(jiān)測沉降平皿法取樣點(diǎn)：取樣點(diǎn)見附件《凍干粉針劑培養(yǎng)基無菌灌裝模擬 試驗(yàn)空氣微生物監(jiān)測沉降菌平皿取樣點(diǎn)分布圖》。其取樣方法、取樣點(diǎn)、取樣頻率見取樣計(jì)劃。取每管裝量為 15ml的胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基 5支，分別接種白色念珠菌、黑曲霉菌各 2支，每支接種菌量為 1ml（菌量小于 100cfu），另一支不接種，作為空白對照， 23— 28℃培養(yǎng) 5天。 參加模擬試驗(yàn)的操作人員數(shù)及人員構(gòu)成應(yīng)嚴(yán)格控制，非規(guī)定的驗(yàn)證小組成員嚴(yán)禁在模擬試驗(yàn)過程中進(jìn)入模擬試驗(yàn)現(xiàn)場，模擬試驗(yàn)現(xiàn)場人員數(shù)不得超過 5人 ，人員的進(jìn)入及退出應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)操作程序，減少不必要的人員進(jìn)入及 進(jìn) 退出次數(shù)。 ，以保證本驗(yàn)證方案規(guī)定項(xiàng)目的順利實(shí)施。 3. 驗(yàn)證分工 。 使用的主要設(shè)備 序號 設(shè) 備 名 稱 型 號 數(shù)量 生 產(chǎn) 廠 家 1 濃 配 罐 V＝ 1 長春可之爾生物技術(shù)有限公司 2 稀 配 罐 V＝ 1 長春可之爾生物技術(shù)有限公司 3 緩 沖 罐 V＝ 01m3 1 長春可之爾生物技術(shù)有限公司 4 濕法超聲波膠塞清洗機(jī) KJCS4 1 溫州亞光制藥機(jī)械有限公司 5 多功能鋁蓋清洗機(jī) DQXL2 1 溫州亞光制藥機(jī)械有限公司 6 立式超聲波洗瓶機(jī) QCL80 1 長沙楚天科技有限公司 7 殺菌干燥機(jī) SZA620/43 1 長沙楚天科技有限公司 8 灌裝加塞機(jī) DGS12A 1 長沙楚天科技有限公司 9 軋蓋機(jī) ZG300C 1 長沙楚天科技有限公司 10 凍干機(jī) Lyo8 1 上海車家龍科技有限公司 11 機(jī)動(dòng)門脈動(dòng)真空滅菌器 1 山東新華醫(yī)療器械股份 公司 物料準(zhǔn)備 （依據(jù) 模 擬灌裝的批量核定下述材料數(shù)量 ） 生產(chǎn)批量的確定 ： 使用的物料信息 品 名 批 號 數(shù) 量 生 產(chǎn) 商 抗生素瓶 （ ml） 丁基膠塞 鋁塑復(fù)合蓋 胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基 驗(yàn)證所需文件 《配劑稱量崗位操作規(guī)程》、《配劑崗位稀配操作規(guī)程》、《灌封崗位操作規(guī)程》、《潔凈區(qū)沉降菌 第 5 頁 共 11 頁 文件名稱 凍干粉針劑車間培養(yǎng)基模擬灌裝驗(yàn)證方案 文件編號 JBZYZ004A 落測定操作規(guī) 程》、《進(jìn)入潔凈區(qū)的物料清潔操作規(guī)程》、《培養(yǎng)基配制操作規(guī)程》、《凍干粉針劑車間 監(jiān)控管理規(guī)程》 GMP、無菌操作 、無菌更衣程序技術(shù)等相關(guān)知識的培訓(xùn)并經(jīng)考核合格。 ：取每管裝量 15ml胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基，分別接種金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草