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第五章酶動力學引論(留存版)

2024-12-10 12:16上一頁面

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【正文】 M T X氨甲喋呤( MTX)是 FH2還原酶的競爭性抑制劑,抑制人體 內 FH4的合成,以致抑制腫瘤的生長。 CH CCl2敵百蟲 敵敵畏 R OPOOXR39。第五章 酶動力學引論 ? 底物濃度 ? 酶濃度 ? pH ? 溫度 ? 激活劑 ? 抑制劑 主要內容 —— 研究各因素對酶催化反應速度的影響 酶催化應速度與底物濃度的關系 p203 酶催化反應進程曲線 0510150 50 100 150 200 250 300水解時間(min)DH(%)537酸性蛋白酶,50℃,pH3,E/S=4%(酶與底物的濃度之比)AS1398中性蛋白酶50℃,pH7,E/S=2%胰蛋白酶37℃,pH8,E/S=4%胰酶37℃,pH8,E/S=4%Alcalase60℃,pH8,E/S=12AU(安森單位)/Kg木瓜蛋白酶,60℃,pH5,E/S=10%Protamex50℃,E/S=24AU/Kg一底物或其他底物濃度不變時適用 反應出現(xiàn)平衡的原因 05101520250 100 200 300水解時間( min )水解度DH%E+S ES E+P1+P2 Note p2 米氏方程 V=Vmax[S]/(Km+[S]) V = Kcat[E]t[S] /(Km + [S]) Kcat: 催化常數(shù)(酶的轉化數(shù)) 每秒種每個酶分子轉換底物的微摩爾數(shù) Kcat/Km: 專一性常數(shù) Km, Kcat, and kcat /Km 米氏方程的意義 ? 米氏常數(shù)為反應速度是最大反應速度一半時的底物濃度, Km單位為摩爾濃度( mol/L) ? Km對于特定的反應條件而言是一個特征常數(shù)。有機磷殺蟲劑 +(CH 3 ) 3 N+CH 2 CH 2 O COCH 3(CH 3 ) 3 N+CH 2 CH 2 OH +CH 3 COOHH 2 O膽堿乙?;? 膽堿酯酶 膽堿 乙酰膽堿 乙酰膽堿為生物體內傳遞神經沖動的重要物質。而人體可直接吸收葉酸。 Enzyme pH Optimum Lipase (pancreas) Lipase (stomach) Lipase (castor oil) Pepsin Trypsin Urease Invertase Maltase Amylase (pancreas) Amylase (malt) Catalase 同一種酶作用于不同底物時的最適 pH存在差異 蛋白 最適 pH 酪蛋白 6~8 明膠 5 絲素 5 Papain(木瓜蛋白酶 ) 蛋白 最適 pH 大豆蛋白、酪蛋白 7~9 肉糜 絲素 ? Alcalase 絲素濃度 S=8%, E/S=12AU/Kg,T 55℃ 0246810121416180 100 200 300水解時間( m i n )DH(%)pH8pH9 Alcalase在不同 pH值下水解絲素的進程曲線 最適 pH的確定 ? 低溫保藏 ? 高溫處理:滅酶 溫度對酶催化反應速度的影響 ? 影響酶的穩(wěn)定性 ? 影響酶反應的速度 Note p28 溫度對酶穩(wěn)定性的影響 ? 酶分子的大小 和 結構 ? pH ? 離子強度 ? 酶和體系中蛋白質的濃度 ? 保溫時間 ? 活化劑和抑制劑 溫度對酶穩(wěn)定性的測定 ? 先將酶液(不含底物)在不同的溫度下保溫,而其他條件保持相同 ? 在不同的時間間隔,依次取出一定量的酶液置于冰浴中保存,或直接加入到含有底物的反應混
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