【正文】 由粒徑分布圖看出，殼聚糖 納米粒子 粒徑與油水相比成反比，與表面活性劑用量成正比，與殼聚糖濃度與成正比，與交聯(lián)劑濃度成正比，與油相體系的粘度成反比。戊二醛結(jié)構(gòu)中存在著兩個(gè)活潑的醛基，有很高的反應(yīng)活性，易與殼聚糖分子中的自由氨基反應(yīng)，形成交聯(lián)的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。 殼聚糖負(fù)載硒代胱氨酸納米粒子的制備及其 體外抗腫瘤活性 的研究 23 表 26 殼聚糖濃度對(duì)納米粒子粒徑的影響 Table 26Effect of CS concentration on nanoparticles39。 表 25 Span80 用量對(duì) 納米粒子 的影響 Table 25Effect of Span80 dosage on nanoparticles39。 sizes No. O/W(V/V) Paraffin(ml) Size() PdI A1 10:1 5 A2 20:1 10 A3 30:1 15 A4 40:1 20 A5 50:1 25 10:1 20:1 30:1 40:1 50:10306090120150180 Size(m)O / W 圖 油水比對(duì) 納米粒子的 影響 殼聚糖負(fù)載硒代胱氨酸納米粒子的制備及其 體外抗腫瘤活性 的研究 18 Fig. Comparison of different ratio of paraffin to CS on nanoparticles39。 油相：量取液體石蠟 25 mL，加入占其體積 3%( g)的 Span80,攪拌均勻后備用。取 500 μL CS 溶液緩慢滴加到含有表面活性劑 span80 的的液體石蠟中，經(jīng)超聲處理后形成穩(wěn)定的 W/O 型微乳液，然后滴加一定量的戊二醛作為交聯(lián)劑進(jìn)行化學(xué)交聯(lián)，超聲分散后在室溫下攪拌 3 h，離心，然后 用無水乙醇和石油醚洗滌并離心，最后用蒸餾水清洗，得到乳白色溶液 （ CSNPs）。 殼聚糖負(fù)載硒代胱氨酸納米粒子的制備及其 體外抗腫瘤活性 的研究 12 第二章 空白殼聚糖納米粒子的制備 實(shí)驗(yàn)部分 材料與試劑 表 21 實(shí)驗(yàn)試劑 Table 21 Reagents used in experiment 試劑名稱 規(guī)格 產(chǎn)地 液體石蠟 AR 天津市化學(xué)試劑公司 Span80 CP 天津市化學(xué)試劑公司 殼聚糖 90 % MW=60000 上海伯奧生物科技有限公司 戊二醛 (25%) AR 天津市百世化工有限公司 甲苯 AR 天津市百世化工有限公司 無水乙醇 AR 天津市百世化工有限公司 石油醚 AR 天津市百世化工有限公司 冰醋酸 AR 天津市百世化工有限公司 實(shí)驗(yàn)用水均為二次蒸餾水，藥品稱量均使用德國 Sartorius 公司的電子分析天平，誤差為 177。 (5)提高疏水性藥物對(duì)細(xì)胞膜的通透性，增 強(qiáng)細(xì)胞吸收 殼聚糖 納米粒子 溶脹引起的擴(kuò)散釋藥過程可以增加藥物在吸收部位的濃度梯度，對(duì)藥物的吸收具有協(xié)同促進(jìn)作用。目前最常用的方法是將殼聚糖醋酸溶液加入含表面活性劑的液體石蠟中，形成 W/O 型乳劑，升溫再減壓干燥除去溶劑，分離得到殼聚糖 納米粒子 。 納米粒子 的粒徑取決于噴嘴的直徑，噴嘴流率，霧化壓力，入口溫度和交聯(lián)程度等因素 [32]。曹等 [30]通過研究表明，殼聚糖無細(xì)胞毒性，不溶血，不致敏，生物相容性良好，可以滿足醫(yī)藥衛(wèi)生及化妝品原料的基本要求。 殼聚糖負(fù)載硒代胱氨酸納米粒子的制備及其 體外抗腫瘤活性 的研究 4 圖 納米藥物載體的類型 目前，用于納米藥物載體研究的生物可降解聚合物主要有合成聚合物和天然高分子聚合物。 因此，希望借助納米藥物載體來提高細(xì)胞吸收，減少它進(jìn)入腫瘤細(xì)胞的時(shí)間。硒在生物體內(nèi)主要以有機(jī)硒化合物的形式存在，一類是含硒 氨基酸，另一類是含硒蛋白質(zhì)。 in vitro anticancer activity 暨南大學(xué)本科生畢業(yè)論文 III 目 錄 摘 要 .......................................................................................................................................... I Abstract ..................................................................................................................................... II 第一章 緒論 ..................................................................................................................................... 1 硒抗癌藥物的研究進(jìn)展 ......................................................................................................... 1 硒代胱氨酸的研究現(xiàn)狀 ......................................................................................................... 2 硒代胱氨酸的性質(zhì) ...................................................................................................... 2 硒代胱氨酸的抗癌作用 ............................................................................................... 2 納米藥物載體在腫瘤治療中的應(yīng)用 ....................................................................................... 3 納米技術(shù)的研究進(jìn)展 .................................................................................................. 3 納米藥物載體的研究進(jìn)展 ........................................................................................... 3 殼聚糖 納米粒子 在納米藥物載體領(lǐng)域的制備和應(yīng)用 ............................................................... 4 殼聚糖的結(jié)構(gòu)與性質(zhì) .................................................................................................. 4 殼聚糖 納米粒子 的制備 ............................................................................................... 5 殼聚糖 納米粒子 的應(yīng)用 ............................................................................................... 9 課題的研究意義與創(chuàng)新點(diǎn) ................................................................................................... 11 課題的研究意義 ....................................................................................................... 11 創(chuàng)新點(diǎn) ..................................................................................................................... 11 第二章 空白殼聚糖納米粒子的制備 ................................................................................................ 12 實(shí)驗(yàn)部分 ............................................................................................................................ 12 材料與試劑 .............................................................................................................. 12 實(shí)驗(yàn)儀器 .................................................................................................................. 12 實(shí)驗(yàn)方法 ......................................................................................................................... 13 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論 ................................................................................................................. 15 油相體系對(duì)殼聚糖 納米粒子 的影響 ........................................................................... 15 油水比對(duì)殼聚糖 納米粒子 的影響 ............................................................................... 16 表面活性劑用量對(duì)殼聚糖 納米粒子 的影響 ................................................................. 19 殼聚糖濃度對(duì)殼聚糖 納米粒子 的影響 ........................................................................ 22 暨南大學(xué)本科生畢業(yè)論文 IV 交聯(lián)劑用量對(duì)殼聚糖 納米粒子 的影響 ........................................................................ 25 本章小結(jié) ............................................................................................................................ 28 第三章 殼聚糖納米粒子負(fù)載硒代胱氨酸的制備 .............................................................................. 29 實(shí)驗(yàn)部分 ............................................................................................................................ 29 實(shí)驗(yàn)材料 .................................................................................................................. 29 實(shí)驗(yàn)儀器 .................................................................................................................. 29 實(shí)驗(yàn)方法 .................................................................................................................. 30 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論 ....