【正文】 c. 根據(jù)循證醫(yī)學(xué)的觀點(diǎn)，不斷進(jìn)行實(shí)驗(yàn)方法學(xué)的研究與改進(jìn)，臨床價(jià)值探討，經(jīng)濟(jì)學(xué)評(píng)估，優(yōu)選出最直接、最有效、最準(zhǔn)確、最經(jīng)濟(jì)的實(shí)驗(yàn)或?qū)嶒?yàn)組合，用于臨床。 報(bào)告的規(guī)范化 ① 24小時(shí)可發(fā)出初始報(bào)告 。 C空氣孵育 ） 苛養(yǎng)菌 5％CO2孵育 判度結(jié)果和解釋結(jié)果 ESBL確認(rèn)試驗(yàn) ESBL的質(zhì)控頻率 ? 篩選試驗(yàn)和表型確證試驗(yàn)均可每日進(jìn)行或每周進(jìn)行，所選擇菌株為肺克 700603或大腸埃希菌 25922。 紙片藥敏試驗(yàn)的室內(nèi)質(zhì)控 ? 基礎(chǔ)質(zhì)控：連續(xù)做 30天，如失控超過(guò) 3次還需繼續(xù)，如失控低于 3次可改為每周 1次 ? 糾控：每周質(zhì)控中發(fā)生失控應(yīng)糾控，方法：連續(xù) 5天，每天 1次，每次重復(fù) 5個(gè)紙片，如找到明確失控原因，可立即改為每周 1次，否者繼續(xù) ? 4℃ 冰箱保存一周的用量 ? 藥物敏感試驗(yàn)是臨床微生物檢驗(yàn)的重要步驟之一，其結(jié)果正確與否涉及治療效果的好壞。 ③ pH是細(xì)菌生長(zhǎng)的重要條件之一，合格培養(yǎng)基的 pH應(yīng)在規(guī)定值上下 。 ? 要挑取含膿 、 黏液 、 血等病理改變或水樣糞便送檢 。 應(yīng)在用抗菌素治療前 , 最好在患者發(fā)冷發(fā)熱前半小時(shí)采血為宜 。 ③運(yùn)動(dòng)：強(qiáng)烈的肌肉運(yùn)動(dòng)明顯影響體內(nèi)代謝，丙酮酸、乳酸可升高，對(duì)紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血紅蛋白的測(cè)定明顯影響，可造成假性升高。 ② 培養(yǎng)分離病原菌，根據(jù)病原菌種類進(jìn)行鑒定和耐藥表型檢測(cè)，并根據(jù)質(zhì)控要求，病原菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn) (重復(fù) 2次 )。 二、臨床微生物的質(zhì)量控制 臨床微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制的有關(guān)概念 為了保證質(zhì)量控制 ， 首先應(yīng)了解以下有關(guān)概念： 1. 細(xì)菌檢驗(yàn)的質(zhì)量： 結(jié)果真實(shí)顯示標(biāo)本中存在的病原菌及其生化特征和抗藥性 2. 細(xì)菌檢驗(yàn)的質(zhì)量控制： 制定細(xì)菌檢驗(yàn)的質(zhì)量水平 ， 并采取監(jiān)測(cè)手段 ， 這一過(guò)程稱為細(xì)菌檢驗(yàn)的質(zhì)量控制 。 3. 質(zhì)量保證： 為達(dá)到應(yīng)有的質(zhì)量水平而采取的措施 。 4. 填寫(xiě)報(bào)表或網(wǎng)上回報(bào) ① 填寫(xiě)報(bào)表時(shí)應(yīng)按要求逐項(xiàng)填寫(xiě)，字跡清晰整潔。住院患者可在起床前抽血，匆忙起床到門診的患者應(yīng)至少休息 15 min后采血。 ? 急性感染患者： 從兩臂分別采 2份血樣（兩套）。 直腸拭子采樣量要足夠 ， 拭子上肉眼應(yīng)可見(jiàn)糞便 。 ? 無(wú)菌試驗(yàn)： 新制備或新買的培養(yǎng)基在使用前要隨機(jī)抽取一定數(shù)量的樣品作無(wú)菌試驗(yàn)。 儀器的質(zhì)量控制 ? 按儀器說(shuō)明規(guī)定用標(biāo)準(zhǔn)菌株定期對(duì)不同批號(hào)的試劑進(jìn)行質(zhì)控 ? 對(duì)冰箱、二氧化碳孵箱、普通孵箱、水浴箱等基本設(shè)備的每日溫度、氣體濃度的監(jiān)控記錄；顯微鏡、細(xì)菌鑒定儀等儀器的使用、保養(yǎng)、維修記錄。 ? 應(yīng)該注意的是：肺克 700603ESBL基因在質(zhì)粒上，應(yīng)將其凍存于 60℃ 或以下。 ② 72小時(shí)應(yīng)報(bào)告藥敏試驗(yàn)結(jié)果； ③ 根據(jù)檢測(cè)范圍報(bào)告檢測(cè)結(jié)果，如未檢測(cè)出沙門菌、志賀菌。 d. 不斷加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室與臨床的信息交流與學(xué)術(shù)探討，直接參與臨床診斷治療，促進(jìn)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展。其工作目的是一切為了患者，服務(wù)于患者；一切為了臨床，服務(wù)于臨床；急其所急，想其所想，檢驗(yàn)報(bào)告及時(shí)、準(zhǔn)確。 實(shí)行三級(jí)報(bào)告制度： ① 第一級(jí)：培養(yǎng)液直接涂片結(jié)果； ② 第二級(jí)：初步藥敏結(jié)果和平皿菌落涂片結(jié)果； ③ 第三級(jí)：正式細(xì)菌鑒定和藥敏報(bào)告 。 抗菌藥物敏感性試驗(yàn) 常用方法 ? 擴(kuò)散試驗(yàn) diffusion test：紙片擴(kuò)散法 (抑菌圈直徑 ) ? 稀釋試驗(yàn) dilution test：肉湯稀釋法、瓊脂稀釋法、最小抑菌濃度 minimum inhibitory concentration， MIC ? E試驗(yàn) Etest ? 自動(dòng)化儀器檢測(cè) 紙片擴(kuò)散法操作步驟 制備接種物（ ） MH瓊脂平板上（ 15分鐘內(nèi)接種，涂抹均勻 ） 在接種好的瓊脂平板上貼加紙片 孵育（ 15分鐘內(nèi)反轉(zhuǎn)平板， 35176。 不要使用過(guò)期的血清 。斜面的長(zhǎng)度 ≤ 試管長(zhǎng)度的 2/3。 ? 標(biāo)本采集后立即送檢 ， 不能立即送檢者 ， 可暫存 4℃ 冰箱 ， 但保存不超過(guò) 8h 糞便標(biāo)本的培養(yǎng) ? 應(yīng)在發(fā)病早期并且盡量在用抗生素治療前采集 ， 稀便不少于 1ml， 固體便不少于 1克 ，無(wú)便患者可用直腸拭子采集標(biāo)本 。 及時(shí) 、 準(zhǔn)確地從患者血液中分離出病原菌 ， 才能正確實(shí)施有效地抗菌治療 ，從而有助于提高治愈率和降低醫(yī)療費(fèi)用 。如血脂檢測(cè)至少兩周內(nèi)保持一般飲食，患者應(yīng)在采血前 24 h禁食高脂肪飲食， 12 h禁食空腹采血，且前 1 d晚禁止大量飲酒。 3. 質(zhì)評(píng)樣品的測(cè)定 ① 質(zhì)控菌株用小牛血清或肉湯溶解，按標(biāo)本種類接種各種選擇培養(yǎng)基，放適當(dāng)環(huán)境培養(yǎng)。 其質(zhì)量控制環(huán)節(jié)多、涉及的知識(shí)面廣、復(fù)雜性高、需要超強(qiáng)的責(zé)任心。 4. 質(zhì)量評(píng)價(jià)： 用一個(gè)客觀的公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)來(lái)評(píng)定一個(gè)實(shí)驗(yàn)室或?qū)嶒?yàn)室中某項(xiàng)試驗(yàn)是否達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)的過(guò)程 。 ② 填寫(xiě)完后再次核對(duì)，以防筆誤、樣本號(hào)順序錯(cuò)誤等。 ④藥物：藥物對(duì)血液成分的影響是一個(gè)十分復(fù)雜的問(wèn)題。 ? 感染性心內(nèi)膜炎患者： 24h內(nèi)采血 3次 , 每次間隔不少于 30分鐘。 ? 注意事項(xiàng)： ⑴ 雖然糞便標(biāo)本本身含很多細(xì)菌但也要用無(wú)菌容器 。 購(gòu)買的培養(yǎng)基要有質(zhì)量保證如合格證明等文件；若無(wú)質(zhì)量保證需檢測(cè)相應(yīng)的性能。以保障實(shí)驗(yàn)室各種設(shè)備、儀器的正常運(yùn)轉(zhuǎn)。 奇異變形桿菌 ESBL 監(jiān)測(cè)試驗(yàn) 不適用 不適用 Ceftriaxone 1 ?27 Cefotaxime NA NA Aztreonam 1 ?22 Ceftazidime 1* ?22* Cefpodoxime 稀釋法 (181。 ④ 錯(cuò)誤報(bào)告 : 未見(jiàn)到致病菌 ：可在 24小時(shí)報(bào)告初始結(jié)果，包括菌落計(jì)數(shù)和可能細(xì)菌種類，如氧化酶陰性的革蘭陰性桿菌；金黃色葡萄球菌等。 e. 本室所進(jìn)行的試驗(yàn)方法、量值可溯源，不準(zhǔn)確度限制在國(guó)內(nèi)有關(guān)部分標(biāo)準(zhǔn)。 b. 臨床微生物實(shí)驗(yàn)室室的工作是面向全院臨床醫(yī)生與患者。 常規(guī)報(bào)告 24h,危重報(bào)告 1h－ 2ｈ 。 ， 如 ?D葡聚糖的檢測(cè) 。 為保證血清凝集反應(yīng)結(jié)果準(zhǔn)確 ， 應(yīng)每 3個(gè)月對(duì)血清進(jìn)行一次質(zhì)控 。 ② 厚度 ： 一般厚度在 3mm，但 MH平板厚度 ≥ 4mm。 ? 清潔中段尿 、 導(dǎo)尿?qū)Ч苣?、 經(jīng)恥骨上皮膚穿刺采集膀胱內(nèi)尿液 ， 送檢標(biāo)本以晨起第一次尿液為佳 ?