【正文】 :31:2810:31Jan2321Jan23 1越是無能的人，越喜歡挑剔別人的錯(cuò)兒。 :31:2810:31:28January 21, 2023 1他鄉(xiāng)生白發(fā)，舊國見青山。如需長時(shí)間儲(chǔ)存，存儲(chǔ)溫度應(yīng)為 70℃ 。 ? 因此，血液及無菌體液中檢出 1， 3β D葡聚糖在很大程度上可以視為 IFI 的標(biāo)志，如念珠菌、曲霉、鐮刀霉、酵母和絲孢酵母感染等。因此，檢測(cè)效應(yīng) T淋巴細(xì)胞可用于結(jié)核病或結(jié)核潛伏感染者的診斷。 26 Wenen LIU 27 Wenen LIU 細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè) 原理：儀器檢測(cè)試管內(nèi)反應(yīng)物的光密度 OD值，取當(dāng) OD上升到 ，該點(diǎn)在反應(yīng)曲線上的位置為濁度開始快速變化的時(shí)期，該取值能夠快速、穩(wěn)定的獲得反應(yīng)時(shí)間，從而判斷內(nèi)毒素的含量 動(dòng)態(tài)濁度法 28 Wenen LIU 儀器和試劑 ? BET24A細(xì)菌內(nèi)毒素分析儀 ? MB80微生物快速動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)系統(tǒng) 29 Wenen LIU 標(biāo)本要求 患者早上尚未進(jìn)行藥物靜脈治療時(shí) : ? MB80： “ 無熱源真空采血管 ”, 靜脈抗凝血 ，采血量 24ml ， 30min內(nèi)送檢 ? BET24A：抽取 1mL靜脈抗凝血，配 1mL1號(hào)處理液 ? 其它體液如腦脊液 ﹑ 胸腹水與血標(biāo)本要求相同。 ? 在非感染或病毒性感染疾病時(shí)保持非常低的血清水平，在細(xì)菌性感染時(shí)含量升高，并與感染程度和預(yù)后呈正相關(guān)。它可侵犯全身各器官，但以肺結(jié)核為最多見。 其中最為常用的是 16SrRNA基因 。打開后標(biāo)本需在 48小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)。 陽性預(yù)測(cè)值可達(dá) 100%。 , January 21, 2023 很多事情努力了未必有結(jié)果，但是不努力卻什么改變也沒有。 2023年 1月 上午 10時(shí) 31分 :31January 21, 2023 1業(yè)余生活要有意義，不要越軌。 2023年 1月 上午 10時(shí) 31分 :31January 21, 2023 1少年十五二十時(shí)，步行奪得胡馬騎。 多種方法聯(lián)合可提高感染性疾病 病原學(xué)診斷！ 79 Wenen LIU 謝 謝 80 Wenen LIU 靜夜四無鄰，荒居舊業(yè)貧。 ? 原理：是一種微孔板雙抗體夾心法，采用小鼠單克隆抗體 EBA2，檢測(cè)人血清中的曲霉菌半乳甘露聚糖。 ? 藥敏試驗(yàn)周期長，因此檢測(cè)耐藥基因成為近年來的研究熱點(diǎn)。 40 Wenen LIU 檢測(cè)流程示意圖 41 Wenen LIU 鏡下比較 圖 2. 夾層杯法（新方法）： 菌量多，背景清晰，易于觀察 圖 1. 直接涂片法（傳統(tǒng)方法）：菌量少，背景不清晰 42 Wenen LIU 夾層杯診斷技術(shù)的優(yōu)點(diǎn) 陽性率高 背景清晰，易于觀察 易于標(biāo)準(zhǔn)化 檢測(cè)速度快 生物安全性好 夾層杯診斷 技術(shù)的優(yōu)點(diǎn) 43 Wenen LIU 結(jié)核夾層杯技術(shù) 標(biāo)本要求： （ 1） 痰液要求新鮮，留取清晨深咳出的第一口痰液，留痰時(shí)，患者以清水漱口３次，然后用力咳出氣管深處的痰 （ 2）用氫氧化鈉處理完全。 146: 2699708 在病毒感染時(shí)， 大量產(chǎn)生的 IFN?，將會(huì)抑制 PCT的激活及產(chǎn)生 .因此，病毒感染時(shí)， PCT的濃度將會(huì)保持在較低的水平 Bacterial Infection () IL6 11 Wenen LIU 細(xì)菌感染后 PCT快速升高 Kiics of procalcitonin in iatrogenic sepsis Brunkhorst et al, Intens Care Med 1998,24:888892 12 Wenen LIU PCT來源 Left Lane:正常組 , 在不存在感染的情況下，甲狀腺外 CALCI表達(dá)被抑制，而主要局限于甲狀腺和肺的神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞有一定程度的表達(dá) Right Lane: 膿毒癥組 ,在細(xì)菌感染時(shí)可誘導(dǎo)全身各種組織多種類型細(xì)胞 CALCI表達(dá)和 PCT連續(xù)性釋放 13 Wenen LIU PCT動(dòng)力學(xué) ? 23h開始增加； 68h快速升高； ? 12h48到達(dá)峰值； 23d 正常 ? 血漿濃度在＜1000ng/ml ? 半衰為 1520h左右 ,且不受腎功能影響 14 Wenen LIU PCT檢測(cè)方法 ?快速半定量法（ PCTQ） ?全自動(dòng)快速定量法（ VIDAS) 15 Wenen LIU 快速半定量法（ PCTQ） ? 樣本： 200181。 144: 557884 05。 35 Wenen LIU 結(jié)核感染現(xiàn)狀 全球范圍內(nèi)結(jié)核病疫情急劇惡化 ? 結(jié)核病與艾滋病同時(shí)流行 ? 結(jié)核菌耐藥現(xiàn)象益發(fā)嚴(yán)重 ? 人口大規(guī)模流動(dòng) 我國是世界上僅低于印度的第二結(jié)核病大國 ? 結(jié)核菌感染率 % ? 新發(fā)活動(dòng)性結(jié)核患者 130萬 /年 ? 死亡 13萬 /年 早期快速診斷與治療成為制約結(jié)核病控制的關(guān)鍵 ? 常規(guī)實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)核病方法陽性率不到60% 36 Wenen LIU 全球結(jié)核疫情 37 Wenen LIU 結(jié)核檢測(cè)方法 一、現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢測(cè)技術(shù) 細(xì)菌學(xué)診斷 ─ 涂片、培養(yǎng) 免疫學(xué)診斷 ─ 抗原、抗體膠體金 分子生物學(xué)診斷 ─ PCR 二、其它檢測(cè)技術(shù) PPD（ TST）實(shí)驗(yàn) 影像學(xué)檢查 38 Wenen LIU 結(jié)核夾層杯技術(shù) 結(jié)核感染 T細(xì)胞檢測(cè)技術(shù) 分子生物學(xué)技術(shù) 結(jié)核分枝桿菌的快速診斷 39 Wenen LIU 結(jié)核夾層杯技術(shù) ? 原理 ：通過專用消化滅活液消化組織細(xì)胞和粘蛋白等，將結(jié)核桿菌裸露出來，并結(jié)合高速震蕩，使痰標(biāo)本充分液化而有利于其中的抗酸桿菌沉淀于特制彭氏杯底部的菌膜上，在夾層杯中直接抗酸染色、干燥，并用取片針頂出內(nèi)底，經(jīng)封片等步驟后，鏡下檢測(cè)抗酸桿菌。 ? 直接重復(fù)片段及寡核苷酸多態(tài)性分型 ? 可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)序列及 MLVA分型 ? 單核苷酸多態(tài)性和 MLST分型 64 Wenen LIU 多重耐藥結(jié)核分枝桿菌檢測(cè) ? 結(jié)核桿菌產(chǎn)生耐藥性主要是由不合理用藥引起的結(jié)核桿菌內(nèi)抗