【正文】 1故人江海別，幾度隔山川。 10:31:2810:31:2810:311/21/2023 10:31:28 AM 1成功就是日復(fù)一日那一點(diǎn)點(diǎn)小小努力的積累。 , January 21, 2023 閱讀一切好書如同和過去最杰出的人談話。 2023年 1月 21日星期六 10時(shí) 31分 28秒 10:31:2821 January 2023 1一個(gè)人即使已登上頂峰，也仍要自強(qiáng)不息。勝人者有力，自勝者強(qiáng)。 2023年 1月 21日星期六 上午 10時(shí) 31分 28秒 10:31: 1楚塞三湘接，荊門九派通。 2023年 1月 上午 10時(shí) 31分 :31January 21, 2023 1行動(dòng)出成果，工作出財(cái)富。為臨床提供快速服務(wù)。解凍標(biāo)本檢測之前要充分混勻 ? 20mg/L膽紅素，或 2g/L甘油三酯的脂血，或 165mg/L血紅蛋白的溶血標(biāo)本不影響檢測結(jié)果 71 Wenen LIU GM試驗(yàn) 臨床意義 GM檢測能區(qū)分侵襲性肺曲霉感染與白色假絲酵母菌、毛霉、肺炎鏈球菌感染和煙曲霉口咽定植。 ? 一般在曲霉感染者出現(xiàn)臨床癥狀和影像學(xué)檢查異常前數(shù)天，其體內(nèi)循環(huán)中 GM 即可呈陽性表達(dá)，其靈敏度和特異度均可達(dá)到80% 以上。 ? 國內(nèi)已經(jīng)使用微生物快速動(dòng)態(tài)檢測系統(tǒng)檢測。 ? 直接重復(fù)片段及寡核苷酸多態(tài)性分型 ? 可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)序列及 MLVA分型 ? 單核苷酸多態(tài)性和 MLST分型 64 Wenen LIU 多重耐藥結(jié)核分枝桿菌檢測 ? 結(jié)核桿菌產(chǎn)生耐藥性主要是由不合理用藥引起的結(jié)核桿菌內(nèi)抗結(jié)核藥物作用靶基因突變所致。 ? 基于 IGRA原理的檢測項(xiàng)目目前已被美國、加拿大、英國、德國、意大利、瑞士、法國、荷蘭、日本等二十余個(gè)國家寫入本國的結(jié)核診療指南中 γ 干擾素釋放實(shí)驗(yàn)（ IGRA） 51 Wenen LIU 酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)（ ELISPOT） 52 Wenen LIU 酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)（ ELISPOT） ? 近二十多年來，隨著技術(shù)改良， ELISPOT 分析技術(shù)已經(jīng)是當(dāng)世公認(rèn)的 最靈敏 的抗原特定T細(xì)胞的體外檢測技術(shù) ? 結(jié)合了細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)（即 ELISA 技術(shù)），能夠在單細(xì)胞水平檢測細(xì)胞因子的分泌情況， 靈敏度高 。 35 Wenen LIU 結(jié)核感染現(xiàn)狀 全球范圍內(nèi)結(jié)核病疫情急劇惡化 ? 結(jié)核病與艾滋病同時(shí)流行 ? 結(jié)核菌耐藥現(xiàn)象益發(fā)嚴(yán)重 ? 人口大規(guī)模流動(dòng) 我國是世界上僅低于印度的第二結(jié)核病大國 ? 結(jié)核菌感染率 % ? 新發(fā)活動(dòng)性結(jié)核患者 130萬 /年 ? 死亡 13萬 /年 早期快速診斷與治療成為制約結(jié)核病控制的關(guān)鍵 ? 常規(guī)實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)核病方法陽性率不到60% 36 Wenen LIU 全球結(jié)核疫情 37 Wenen LIU 結(jié)核檢測方法 一、現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢測技術(shù) 細(xì)菌學(xué)診斷 ─ 涂片、培養(yǎng) 免疫學(xué)診斷 ─ 抗原、抗體膠體金 分子生物學(xué)診斷 ─ PCR 二、其它檢測技術(shù) PPD（ TST）實(shí)驗(yàn) 影像學(xué)檢查 38 Wenen LIU 結(jié)核夾層杯技術(shù) 結(jié)核感染 T細(xì)胞檢測技術(shù) 分子生物學(xué)技術(shù) 結(jié)核分枝桿菌的快速診斷 39 Wenen LIU 結(jié)核夾層杯技術(shù) ? 原理 ：通過專用消化滅活液消化組織細(xì)胞和粘蛋白等，將結(jié)核桿菌裸露出來，并結(jié)合高速震蕩，使痰標(biāo)本充分液化而有利于其中的抗酸桿菌沉淀于特制彭氏杯底部的菌膜上，在夾層杯中直接抗酸染色、干燥，并用取片針頂出內(nèi)底，經(jīng)封片等步驟后，鏡下檢測抗酸桿菌。其中前者主要包括 MOX、 CMY、 DHA、 ACC、 ACT、 FOX等亞型，后者主要包括： ADC。 144: 557884 05。感染性疾病病原體快速診斷 1 Wenen LIU 概 述 感染性疾?。河赡撤N病原體所致，通過不同方式引起人體發(fā)生感染并出現(xiàn)臨床癥狀的疾病 ,主要表現(xiàn)為發(fā)熱。 146: 2699708 在病毒感染時(shí)， 大量產(chǎn)生的 IFN?，將會抑制 PCT的激活及產(chǎn)生 .因此，病毒感染時(shí)， PCT的濃度將會保持在較低的水平 Bacterial Infection () IL6 11 Wenen LIU 細(xì)菌感染后 PCT快速升高 Kiics of procalcitonin in iatrogenic sepsis Brunkhorst et al, Intens Care Med 1998,24:888892 12 Wenen LIU PCT來源 Left Lane:正常組 , 在不存在感染的情況下，甲狀腺外 CALCI表達(dá)被抑制，而主要局限于甲狀腺和肺的神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞有一定程度的表達(dá) Right Lane: 膿毒癥組 ,在細(xì)菌感染時(shí)可誘導(dǎo)全身各種組織多種類型細(xì)胞 CALCI表達(dá)和 PCT連續(xù)性釋放 13 Wenen LIU PCT動(dòng)力學(xué) ? 23h開始增加； 68h快速升高； ? 12h48到達(dá)峰值； 23d 正常 ? 血漿濃度在＜1000ng/ml ? 半衰為 1520h左右 ,且不受腎功能影響 14 Wenen LIU PCT檢測方法 ?快速半定量法（ PCTQ） ?全自動(dòng)快速定量法（ VIDAS) 15 Wenen LIU 快速半定量法（ PCTQ） ? 樣本： 200181。 碳青霉烯酶基因： A類酶，以 KPC為代表；金屬酶，以 IMP、 VIM、NDM為代表； D類酶，以 OXA2 OXA2 OXA51和 OXA48為主。 40 Wenen LIU 檢測流程示意圖 41 Wenen LIU 鏡下比較 圖 2. 夾層杯法（新方法）： 菌量多，背景清晰，易于觀察 圖 1. 直接涂片法（傳統(tǒng)方法）：菌量少，背景不清晰 42 Wenen LIU 夾層杯診斷技術(shù)的優(yōu)點(diǎn) 陽性率高 背景清晰，易于觀察 易于標(biāo)準(zhǔn)化 檢測速度快 生物安全性好 夾層杯診斷 技術(shù)的優(yōu)點(diǎn) 43 Wenen LIU 結(jié)核夾層杯技術(shù) 標(biāo)本要求： （ 1） 痰液要求新鮮，留取清晨深咳出的第一口痰液，留痰時(shí)，患者以清水漱