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重亞硫酸鹽測序技術(shù)介紹(專業(yè)版)

2025-09-27 00:12上一頁面

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【正文】 酶切法同亞硫酸氫鹽聯(lián)合法 ? 聯(lián)合亞硫酸氫鹽限制分析 (bined bisul— rite restriction analysis, C0BRA) 亞硫酸氫鈉可以使DNA未甲基化的 C經(jīng)脫氨基作用轉(zhuǎn)化為 u,通過隨后的 PcR, u將轉(zhuǎn)化為 T,但亞硫酸氫鈉對已發(fā)生甲基化的 C無上述轉(zhuǎn)化作用。這些區(qū)域包含濃度相對較高的CpG對,與此段區(qū)域?qū)?yīng)的染色體區(qū)段一起被稱作 CpG島。 ? DNA甲基化主要形成 5-甲基胞嘧啶( 5mC)和少量的 N6甲基嘌呤( N6mA)及 7-甲基鳥嘌呤( 7mG) 啟動子的 CpG島 ? CpG島主要位于基因的啟動子和第一外顯子區(qū)域,約有 60%以上基因的啟動子含有 CpG島。該 DNA片段若存在甲基化,將會有擴(kuò)增產(chǎn)物出現(xiàn);若 無甲基化,則不會有任何片段擴(kuò)增出現(xiàn)。 COBRA集使用方便,定量準(zhǔn)確和與石蠟切片良好的兼容性三 種特色
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