【正文】 ▲ a)溶解DNA：用玻璃棒挑出白色絮狀DNA轉(zhuǎn)移到另一試管中，加1ml 2 mol/L的Nacl溶液使DNA溶解以液體形式呈現(xiàn)，便于鑒定。后用硫酸水解RNA得核糖、磷酸和堿基組分，分別用定糖法、定磷法和嘌呤銀反應(yīng)鑒定。二、實驗步驟 稱取約10g煮熟雞蛋黃于研缽中，分3次加入30mL丙酮（每次10mL）充分研磨均勻，漏斗過濾，留濾渣，加入溫?zé)岬?5%乙醇30mL，邊加邊攪拌均勻，并靜置10min，冷卻后過濾得澄清透明黃色乙醇溶液。利用等電點時溶解度最低的原理，酪蛋白就沉淀出來。當(dāng)用此染料滴定含有Vc的酸性溶液時，在Vc未全部氧化前，滴下的染料立即被還原成無色；一旦溶淀中的Vc全部被氧化時，則滴下的染料立即使溶液顯示粉紅色，此時即為滴定終點，表示溶液中的Vc剛剛被氧化完全。5．漂洗：將膜條從染色液中取出，在培養(yǎng)皿的邊緣上瀝去表面多余的染色液，依次放入裝有漂洗液的培養(yǎng)皿（共有2套）中漂洗2次（未漂洗時注意蓋好培養(yǎng)皿的蓋子，以免溶劑揮發(fā)），至色帶清晰的電泳圖譜。血清中含有清蛋白、α球蛋白、β球蛋白、γ球蛋白和各種脂蛋白等，各種蛋白質(zhì)在電場中的遷移速度不同。教學(xué)重 點與難點重點：掌握醋酸纖維薄膜電泳的操作方法。Folin酚試劑中的磷鉬酸鹽磷鎢酸鹽被蛋白質(zhì)中的酪氨酸和苯丙氨酸殘基還原，產(chǎn)生深蘭色（鉬蘭和鎢蘭的混合物）。 凡是能夠降低酶的活性，使酶促反應(yīng)速度減慢，又不使酶變性的物質(zhì)稱為酶的抑制劑。教學(xué)過程中師生活動設(shè)計 還有哪些層板方法？提綱、板書設(shè)計 原理及簡要操作步驟作業(yè) 何謂Rf值？Rf值與什么因素有關(guān)？主要參考資料[1]《生物化學(xué)實驗》，董曉燕主編，化學(xué)工業(yè)出版社，2010[2]《生物化學(xué)實驗教程》，王金亭，方俊主編，華中科技大學(xué)出版社，2010總結(jié)分析 點樣是本實驗的關(guān)鍵，教師在指導(dǎo)學(xué)生操作時，強(qiáng)調(diào)點樣要輕、快，穩(wěn)、小并且點樣點要集中； 放展板時，點樣點不要浸如展層溶液中《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實驗》教案 第 6次課 2學(xué)時實驗項目 酶的特性 實驗性質(zhì)基礎(chǔ)性實驗 教學(xué)目的和要求掌握酶促反應(yīng)速度的幾個主要影響因素了解淀粉水解程度的鑒定。難點：掌握分配系數(shù)，Rf值。觀察各管顏色的變化和沉淀的生成。鹽的濃度不同，析出的蛋白質(zhì)也不同。蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)可分為兩類。觀察、記錄各管顏色。黃色 桔紅色二、實驗步驟：，按表1分別加入濃度為1mg/mL的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液、蒸餾水和DNS試劑，配成不同濃度的葡萄糖反應(yīng)液。實驗材料（1）1mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取干燥恒重的葡萄糖100mg，加少量蒸餾水溶解后，以蒸餾水定容至100mL。醛糖在同樣條件下呈色反應(yīng)慢。主要參考資料[1] 《生物化學(xué)實驗》，何幼鸞、湯文浩，華師出版社，2013[2]《生物化學(xué)實驗》，董曉燕主編，化學(xué)工業(yè)出版社，2010總結(jié)分析讓學(xué)生掌握糖顯色反應(yīng)的原理；給學(xué)生強(qiáng)調(diào)注意觀察各管顏色變化的時間《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實驗》教案第 3次課 2學(xué)時實驗項目 蛋白質(zhì)等電點和沉淀反應(yīng)實驗性質(zhì)基礎(chǔ)性實驗 教學(xué)目的和要求。二、實驗步驟：（一）酪蛋白等電點的測定（1）取同樣規(guī)格的試管4支，按下表順序分別精確地加入各試劑，然后混勻。放置片刻，傾去上清液，向沉淀中加入少量的水，沉淀是否溶解？為什么？ 某些有機(jī)酸沉淀蛋白質(zhì) 取1支試管，加入蛋白質(zhì)溶液2mL，再加入1mL5%三氯乙酸溶液，振蕩試管，觀察沉淀的生成。觀察現(xiàn)象，記錄。二、實驗步驟▲：1．點樣 選取制備好的薄板一塊， 的直線上均勻選4個點。人體內(nèi)大多數(shù)酶的最適溫度在37℃左右。激活劑和抑制劑對酶促反應(yīng)速度影響實驗加樣表管號 1 2 3 4％淀粉液（mL） 1％NaCl溶液（mL） 2 — — —1％Na2SO4溶液（mL） — 2 — —1％CUSO4溶液（mL） — — 2 —蒸餾水（mL） — — — 2稀釋唾液酶（mL） （2）混勻后，將各管置于37℃水浴8分鐘后，取1號管中混合液1滴于點滴板上，加1滴KII2溶液顯色，以檢驗淀粉的水解程度。通常樣品的測定也可與標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定放在一起，同時進(jìn)行。由于血清中各蛋白組分等電點不同而致表面凈電荷量不等，加之分子大小和形狀各異，因而電泳遷移率不同，彼此得以分離。將蓋玻片在膜條一端2~3cm處輕輕地垂直落下并隨即提起，這樣即在膜條上點上了細(xì)條狀的血清樣品，每張膜點一個樣。通過測定其在520nm波長處的光吸收來了解丙酮酸的生成量，借此測定血清ALT的活力，故該類方法又稱比色測定法。二、實驗步驟：（1）， mL，搖勻，10 min后離心（3000r/min 5 min），取上清備用。，鞏固對卵磷脂組成結(jié)構(gòu)的認(rèn)識。水分適宜時可復(fù)活。注意事項：離心一定要平衡對稱放入離心機(jī)中，離心機(jī)達(dá)到設(shè)置轉(zhuǎn)速時才能離開。實驗內(nèi)容一、實驗原理：利用沉淀法分離蛋白質(zhì)▲利用電泳法鑒定其組分▲利用考馬斯亮藍(lán)法測定蛋白質(zhì)濃度▲二、實驗步驟：自行設(shè)計教學(xué)過程中師生活動設(shè)計 實驗完畢后各小組結(jié)果比較提綱、板書設(shè)計每個小組寫出簡要實驗方案作業(yè) 比較各組實驗設(shè)計分析自己的實驗設(shè)計優(yōu)缺點主要參考資料[1] 《生物化學(xué)實驗》，何幼鸞、湯文浩，華師出版社，2013[2]《生物化學(xué)實驗》，董曉燕主編，化學(xué)工業(yè)出版社，2010總結(jié)分析 讓學(xué)生了解不同分離測定方法； 考察學(xué)生設(shè)計實驗和操作能力 ?！?，（大約4滴），混勻，用試管夾夾好后放到沸水浴中5~10min，注意觀察溶液是否變成綠色，說明核糖的存在?！「蓛粼嚬芤恢В?硫酸氫鉀，用試管夾夾住并先在小火上略微加熱，使卵磷脂和硫酸氫鉀混熔，然后再集中加熱，待有水蒸氣放出時，嗅有何氣味產(chǎn)生。教學(xué)過程中師生活動設(shè)計 牛奶中蛋白質(zhì)成份，牛奶的營養(yǎng)提綱、板書設(shè)計原理及簡要操作步驟作業(yè)設(shè)計另一種方法提取蛋白的方法。血清經(jīng)無水乙醇處理后，蛋白質(zhì)沉淀出來，膽固醇則溶于其中。材料：分光光度計、恒溫水浴鍋、試管、移液管、容量瓶、量筒。注意，切勿將膜條長時間放在濾紙上，以免膜條中的緩沖液過度吸出。實驗內(nèi)容一、實驗原理★：電泳是帶電顆粒在電場作用下，向著與其電性相反的電極移動的現(xiàn)象。以蛋白質(zhì)的量為橫座標(biāo)，吸光度值為縱座標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線。觀察各管顏色并解釋結(jié)果▲。在某一溫度時反應(yīng)速度達(dá)到最大值，此溫度稱酶作用的最適溫度。薄層層析與其他方法比有明顯的優(yōu)點：層析時間短、樣品用量范圍大()、觀察結(jié)果方便、可以分離多種化合物等，其靈敏度比紙層析高10100倍，顯色方法甚至可以用腐蝕性顯色劑。實驗材料試劑：%醋酸鉛1mL、10%NaOH、1%CuSO4器具：水浴鍋、溫度計、200mL錐形瓶、100mL容量瓶、吸管、試管及試管架 實驗內(nèi)容一、實驗原理★：(biuret reaction) 蛋白質(zhì)和多肽分子中肽鍵在稀堿溶液中與硫酸銅共熱，呈現(xiàn)紫色或紅色，此反應(yīng)稱為雙縮脲反應(yīng)，雙縮脲反應(yīng)可用來檢測蛋白質(zhì)水解程度。重金屬離子沉淀蛋白質(zhì)：重金屬離子與蛋白質(zhì)結(jié)合成不溶于水的復(fù)合物。蛋白質(zhì)變性后，有時由于維持溶液穩(wěn)定的條件仍然存在（如電荷），并不析出。提綱、板書設(shè)計原理及操作步驟作業(yè)—萘酚反應(yīng)原理。但一些非糖物質(zhì)對此反應(yīng)也呈陽性間苯二酚反應(yīng)：在酸作用下，酮糖脫水生成羥甲基醛，后者可與間苯二酚作用生成紅色物質(zhì)。教學(xué)重點與難點重點:繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法，分光光度計的使用原理和使用方法。調(diào)波長540nm，用1號管調(diào)零點，分別測出2~6號管的光密度值。 mL，混勻。如大多數(shù)蛋白質(zhì)的鹽析作用或在低溫下用乙醇（或丙酮）短時間作用于蛋白質(zhì)。由鹽析獲得的蛋白質(zhì)沉淀，當(dāng)降低其鹽類濃度時，又能再溶解，故蛋白質(zhì)的鹽析作用是可逆過程。解釋各管發(fā)生的全部現(xiàn)象。為了使所要分析的樣品各組分得到分離，必須選擇合適的吸附劑。難點：酶活性的影響因素。 在不同溫度下，淀粉被唾液淀粉酶水解的程度不同，可由水解混合物遇碘顯現(xiàn)的顏色不同來判斷：淀粉(藍(lán)色)紅色糊精(紅色)無色糊精(不顯色)麥芽糖(不顯色)葡萄糖(不顯色) 二、實驗步驟：：用蒸餾水漱口清除食物殘渣，再含