【正文】 ▲ a)溶解DNA：用玻璃棒挑出白色絮狀DNA轉(zhuǎn)移到另一試管中，加1ml 2 mol/L的Nacl溶液使DNA溶解以液體形式呈現(xiàn)，便于鑒定。后用硫酸水解RNA得核糖、磷酸和堿基組分，分別用定糖法、定磷法和嘌呤銀反應鑒定。二、實驗步驟 稱取約10g煮熟雞蛋黃于研缽中，分3次加入30mL丙酮（每次10mL）充分研磨均勻，漏斗過濾，留濾渣，加入溫熱的95%乙醇30mL，邊加邊攪拌均勻，并靜置10min，冷卻后過濾得澄清透明黃色乙醇溶液。利用等電點時溶解度最低的原理，酪蛋白就沉淀出來。當用此染料滴定含有Vc的酸性溶液時，在Vc未全部氧化前，滴下的染料立即被還原成無色；一旦溶淀中的Vc全部被氧化時，則滴下的染料立即使溶液顯示粉紅色，此時即為滴定終點，表示溶液中的Vc剛剛被氧化完全。5．漂洗：將膜條從染色液中取出，在培養(yǎng)皿的邊緣上瀝去表面多余的染色液，依次放入裝有漂洗液的培養(yǎng)皿（共有2套）中漂洗2次（未漂洗時注意蓋好培養(yǎng)皿的蓋子，以免溶劑揮發(fā)），至色帶清晰的電泳圖譜。血清中含有清蛋白、α球蛋白、β球蛋白、γ球蛋白和各種脂蛋白等，各種蛋白質(zhì)在電場中的遷移速度不同。教學重 點與難點重點：掌握醋酸纖維薄膜電泳的操作方法。Folin酚試劑中的磷鉬酸鹽磷鎢酸鹽被蛋白質(zhì)中的酪氨酸和苯丙氨酸殘基還原，產(chǎn)生深蘭色（鉬蘭和鎢蘭的混合物）。 凡是能夠降低酶的活性，使酶促反應速度減慢，又不使酶變性的物質(zhì)稱為酶的抑制劑。教學過程中師生活動設(shè)計 還有哪些層板方法？提綱、板書設(shè)計 原理及簡要操作步驟作業(yè) 何謂Rf值？Rf值與什么因素有關(guān)？主要參考資料[1]《生物化學實驗》，董曉燕主編，化學工業(yè)出版社，2010[2]《生物化學實驗教程》，王金亭，方俊主編，華中科技大學出版社，2010總結(jié)分析 點樣是本實驗的關(guān)鍵，教師在指導學生操作時，強調(diào)點樣要輕、快，穩(wěn)、小并且點樣點要集中； 放展板時，點樣點不要浸如展層溶液中《醫(yī)學生物化學實驗》教案 第 6次課 2學時實驗項目 酶的特性 實驗性質(zhì)基礎(chǔ)性實驗 教學目的和要求掌握酶促反應速度的幾個主要影響因素了解淀粉水解程度的鑒定。難點：掌握分配系數(shù)，Rf值。觀察各管顏色的變化和沉淀的生成。鹽的濃度不同，析出的蛋白質(zhì)也不同。蛋白質(zhì)的沉淀反應可分為兩類。觀察、記錄各管顏色。黃色 桔紅色二、實驗步驟：，按表1分別加入濃度為1mg/mL的葡萄糖標準液、蒸餾水和DNS試劑，配成不同濃度的葡萄糖反應液。實驗材料（1）1mg/mL葡萄糖標準溶液：準確稱取干燥恒重的葡萄糖100mg，加少量蒸餾水溶解后，以蒸餾水定容至100mL。醛糖在同樣條件下呈色反應慢。主要參考資料[1] 《生物化學實驗》，何幼鸞、湯文浩，華師出版社，2013[2]《生物化學實驗》，董曉燕主編，化學工業(yè)出版社，2010總結(jié)分析讓學生掌握糖顯色反應的原理；給學生強調(diào)注意觀察各管顏色變化的時間《醫(yī)學生物化學實驗》教案第 3次課 2學時實驗項目 蛋白質(zhì)等電點和沉淀反應實驗性質(zhì)基礎(chǔ)性實驗 教學目的和要求。二、實驗步驟：（一）酪蛋白等電點的測定（1）取同樣規(guī)格的試管4支，按下表順序分別精確地加入各試劑，然后混勻。放置片刻，傾去上清液，向沉淀中加入少量的水，沉淀是否溶解？為什么？ 某些有機酸沉淀蛋白質(zhì) 取1支試管，加入蛋白質(zhì)溶液2mL，再加入1mL5%三氯乙酸溶液，振蕩試管，觀察沉淀的生成。觀察現(xiàn)象，記錄。二、實驗步驟▲：1．點樣 選取制備好的薄板一塊， 的直線上均勻選4個點。人體內(nèi)大多數(shù)酶的最適溫度在37℃左右。激活劑和抑制劑對酶促反應速度影響實驗加樣表管號 1 2 3 4％淀粉液（mL） 1％NaCl溶液（mL） 2 — — —1％Na2SO4溶液（mL） — 2 — —1％CUSO4溶液（mL） — — 2 —蒸餾水（mL） — — — 2稀釋唾液酶（mL） （2）混勻后，將各管置于37℃水浴8分鐘后，取1號管中混合液1滴于點滴板上，加1滴KII2溶液顯色，以檢驗淀粉的水解程度。通常樣品的測定也可與標準曲線的測定放在一起，同時進行。由于血清中各蛋白組分等電點不同而致表面凈電荷量不等，加之分子大小和形狀各異，因而電泳遷移率不同，彼此得以分離。將蓋玻片在膜條一端2~3cm處輕輕地垂直落下并隨即提起，這樣即在膜條上點上了細條狀的血清樣品，每張膜點一個樣。通過測定其在520nm波長處的光吸收來了解丙酮酸的生成量，借此測定血清ALT的活力，故該類方法又稱比色測定法。二、實驗步驟：（1）， mL，搖勻，10 min后離心（3000r/min 5 min），取上清備用。，鞏固對卵磷脂組成結(jié)構(gòu)的認識。水分適宜時可復活。注意事項：離心一定要平衡對稱放入離心機中，離心機達到設(shè)置轉(zhuǎn)速時才能離開。實驗內(nèi)容一、實驗原理：利用沉淀法分離蛋白質(zhì)▲利用電泳法鑒定其組分▲利用考馬斯亮藍法測定蛋白質(zhì)濃度▲二、實驗步驟：自行設(shè)計教學過程中師生活動設(shè)計 實驗完畢后各小組結(jié)果比較提綱、板書設(shè)計每個小組寫出簡要實驗方案作業(yè) 比較各組實驗設(shè)計分析自己的實驗設(shè)計優(yōu)缺點主要參考資料[1] 《生物化學實驗》，何幼鸞、湯文浩，華師出版社，2013[2]《生物化學實驗》，董曉燕主編，化學工業(yè)出版社，2010總結(jié)分析 讓學生了解不同分離測定方法； 考察學生設(shè)計實驗和操作能力 ?！?，（大約4滴），混勻，用試管夾夾好后放到沸水浴中5~10min，注意觀察溶液是否變成綠色，說明核糖的存在?！「蓛粼嚬芤恢?， 硫酸氫鉀，用試管夾夾住并先在小火上略微加熱，使卵磷脂和硫酸氫鉀混熔，然后再集中加熱，待有水蒸氣放出時，嗅有何氣味產(chǎn)生。教學過程中師生活動設(shè)計 牛奶中蛋白質(zhì)成份，牛奶的營養(yǎng)提綱、板書設(shè)計原理及簡要操作步驟作業(yè)設(shè)計另一種方法提取蛋白的方法。血清經(jīng)無水乙醇處理后，蛋白質(zhì)沉淀出來，膽固醇則溶于其中。材料：分光光度計、恒溫水浴鍋、試管、移液管、容量瓶、量筒。注意，切勿將膜條長時間放在濾紙上，以免膜條中的緩沖液過度吸出。實驗內(nèi)容一、實驗原理★：電泳是帶電顆粒在電場作用下，向著與其電性相反的電極移動的現(xiàn)象。以蛋白質(zhì)的量為橫座標，吸光度值為縱座標，繪制出標準曲線。觀察各管顏色并解釋結(jié)果▲。在某一溫度時反應速度達到最大值，此溫度稱酶作用的最適溫度。薄層層析與其他方法比有明顯的優(yōu)點：層析時間短、樣品用量范圍大()、觀察結(jié)果方便、可以分離多種化合物等，其靈敏度比紙層析高10100倍，顯色方法甚至可以用腐蝕性顯色劑。實驗材料試劑：%醋酸鉛1mL、10%NaOH、1%CuSO4器具：水浴鍋、溫度計、200mL錐形瓶、100mL容量瓶、吸管、試管及試管架 實驗內(nèi)容一、實驗原理★：(biuret reaction) 蛋白質(zhì)和多肽分子中肽鍵在稀堿溶液中與硫酸銅共熱，呈現(xiàn)紫色或紅色，此反應稱為雙縮脲反應，雙縮脲反應可用來檢測蛋白質(zhì)水解程度。重金屬離子沉淀蛋白質(zhì)：重金屬離子與蛋白質(zhì)結(jié)合成不溶于水的復合物。蛋白質(zhì)變性后，有時由于維持溶液穩(wěn)定的條件仍然存在（如電荷），并不析出。提綱、板書設(shè)計原理及操作步驟作業(yè)—萘酚反應原理。但一些非糖物質(zhì)對此反應也呈陽性間苯二酚反應：在酸作用下，酮糖脫水生成羥甲基醛，后者可與間苯二酚作用生成紅色物質(zhì)。教學重點與難點重點:繪制標準曲線的方法，分光光度計的使用原理和使用方法。調(diào)波長540nm，用1號管調(diào)零點，分別測出2~6號管的光密度值。 mL，混勻。如大多數(shù)蛋白質(zhì)的鹽析作用或在低溫下用乙醇（或丙酮）短時間作用于蛋白質(zhì)。由鹽析獲得的蛋白質(zhì)沉淀，當降低其鹽類濃度時，又能再溶解，故蛋白質(zhì)的鹽析作用是可逆過程。解釋各管發(fā)生的全部現(xiàn)象。為了使所要分析的樣品各組分得到分離，必須選擇合適的吸附劑。難點：酶活性的影響因素。 在不同溫度下，淀粉被唾液淀粉酶水解的程度不同，可由水解混合物遇碘顯現(xiàn)的顏色不同來判斷：淀粉(藍色)紅色糊精(紅色)無色糊精(不顯色)麥芽糖(不顯色)葡萄糖(不顯色) 二、實驗步驟：：用蒸餾水漱口清除食物殘渣，再含