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正文內(nèi)容

醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)-教案(存儲(chǔ)版)

  

【正文】 in內(nèi)測(cè)其吸光值?主要參考資料[1] 《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》,何幼鸞、湯文浩,華師出版社,2013[2]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》,董曉燕主編,化學(xué)工業(yè)出版社,2010總結(jié)分析 原理講解要結(jié)合血清ALT活性測(cè)定在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用; 整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中加樣和操作過程需規(guī)范,否則數(shù)據(jù)差距較大; 幫助學(xué)生推導(dǎo)酶活性的計(jì)算公式《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》教案 第 10次課 2學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 維生素C含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)性質(zhì)基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn) 教學(xué)目的和要求學(xué)習(xí)測(cè)定VC含量的原理和方法掌握微量滴定管使用方法教學(xué)重 點(diǎn)與難點(diǎn)重點(diǎn):滴定操作難點(diǎn):計(jì)算方法實(shí)驗(yàn)材料①試劑:辣椒勻漿(樣品VC)、標(biāo)準(zhǔn)VC,2,6二氯酚靛酚溶液。教學(xué)過程中師生活動(dòng)設(shè)計(jì) VC作用及缺乏癥提綱、板書設(shè)計(jì)原理及簡(jiǎn)要操作步驟作業(yè) 本實(shí)驗(yàn)中為何用草酸稀釋VC,而不用純水?主要參考資料[1]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》,董曉燕主編,化學(xué)工業(yè)出版社,2010[2]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教程》,王金亭,方俊主編,華中科技大學(xué)出版社,2010總結(jié)分析滴定前要提醒檢查滴定管的氣密性,裝溶液后還要排氣泡,微量滴定管需正確使用;結(jié)果計(jì)算較復(fù)雜,幫助推導(dǎo)和理解《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》教案 第 11次課 2學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 血清膽固醇的測(cè)定實(shí)驗(yàn)性質(zhì)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn) 教學(xué)目的和要求教學(xué)重 點(diǎn)與難點(diǎn)重點(diǎn):血清中膽固醇測(cè)定的原理難點(diǎn):膽固醇測(cè)定方法實(shí)驗(yàn)材料儀器:離心機(jī)、離心管、試管、刻度吸量管、722型分光光度計(jì)。教學(xué)重點(diǎn)與難點(diǎn)重點(diǎn):從牛奶中制取酪蛋白的原理難點(diǎn):加乙醇和水的目的實(shí)驗(yàn)材料鮮牛奶、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、抽濾裝置。離心分離8min(8000r/min)或15min(2000r/min),棄去上清液,得到酪蛋白粗制品;(洗滌時(shí)將沉淀顆粒用干凈吸管吹開或用毛細(xì)管的封閉一端攪開,充分洗滌),離心5min(12000r/min)或10min(3000r/min),棄去上清液;%的乙醇,攪拌片刻;,烘干,得酪蛋白精制品;(g)。卵磷脂被堿水解后可分解為脂肪酸鹽、甘油、膽堿和磷酸鹽。取干凈試管一支,加入10滴上述濾液,再加入1~2滴3% 溴的四氯化碳溶液,振搖試管,觀察有何現(xiàn)象產(chǎn)生。RNA溶于堿性溶液,加熱可使蛋白質(zhì)變性,將蛋白質(zhì)和核酸分離,同時(shí)RNA解聚。,各離心管加入3mL 3mol/L硫酸,混勻,將水解液在沸水浴中加熱至少10min(使沉淀RNA充分水解)。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容一、實(shí)驗(yàn)原理★:,DNA含量豐富,并且材料無色,便于鑒定;,釋放出DNA;,而細(xì)胞中某些物質(zhì)溶于酒精,可以用酒精提取含雜質(zhì)較少的DNA;,和二苯胺試劑沸水浴條件下作用呈現(xiàn)藍(lán)色,因此二苯胺可作為鑒定DNA的試劑。教學(xué)過程中師生活動(dòng)設(shè)計(jì) DNA的種類及組成成分提綱、板書設(shè)計(jì)原理及簡(jiǎn)要操作步驟作業(yè)本實(shí)驗(yàn)中為何用高氯酸溶液?主要參考資料[1] 《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》,何幼鸞、湯文浩,華師出版社,2013[2]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》,董曉燕主編,化學(xué)工業(yè)出版社,2010總結(jié)分析 實(shí)驗(yàn)原理要讓學(xué)生知道每一步的作用和方法; 鑒定的過程要與RNA鑒定做對(duì)比《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》教案 第 16 次課 2學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 卵清蛋白分離及濃度測(cè)定實(shí)驗(yàn)性質(zhì)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn) 教學(xué)目的和要求能自行設(shè)計(jì)卵清蛋白分離及組分鑒定方法能較準(zhǔn)確測(cè)得蛋白質(zhì)濃度教學(xué)重點(diǎn)與難點(diǎn)重點(diǎn):分離鑒定方法,濃度測(cè)定方法難點(diǎn):實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)材料試劑:考馬斯亮藍(lán)溶液、卵清、乙醇、漂洗液。 c)二苯胺水浴鑒定▲:兩只試管中各加1ml二苯胺試劑,在沸水浴中加熱10min,觀察顏色變化。掌握根據(jù)物質(zhì)性質(zhì)設(shè)計(jì)分離方法教學(xué)重點(diǎn)與難點(diǎn)重點(diǎn):離心機(jī)的使用及DNA分離難點(diǎn):DNA的組分和鑒定方法實(shí)驗(yàn)材料試劑:新鮮菜花、95%乙醇、丙酮、5%高氯酸溶液、10%氯化鈉溶液、石英砂。,混勻。菌體容易收集,RNA也易分離?!「稍镌嚬芤恢?,加入少量提取的卵磷脂以及2~5mL 氫氧化鈉溶液,放入水浴中加熱15min,在管口放一片紅色石蕊試紙,觀察顏色有無變化,并嗅其氣味。卵磷脂和腦磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮,利用此性質(zhì)可將其與中性脂肪分離開;此外,卵磷脂能溶于乙醇而腦磷脂不溶,利用此性質(zhì)又可將卵磷脂和腦磷脂分離。觀察牛奶開始有絮狀沉淀出現(xiàn)后,保溫一定時(shí)間使沉淀完全。三、結(jié)果計(jì)算▲: 血清膽固醇含量(mg/mL)=A2/A1**2式中: A1為標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度;A2為樣品液的吸光度 mmol/L教學(xué)過程中師生活動(dòng)設(shè)計(jì)思考人體內(nèi)膽固醇的生理作用及正常含量提綱、板書設(shè)計(jì)原理及簡(jiǎn)要操作步驟作業(yè) 主要參考資料[1]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》,董曉燕主編,化學(xué)工業(yè)出版社,2010[2]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教程》,王金亭,方俊主編,華中科技大學(xué)出版社,2010總結(jié)分析重點(diǎn)講解血清膽固醇的測(cè)定原理;再次復(fù)習(xí)分光光度計(jì)使用要熟練《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》教案 第 12次課 2學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 牛奶中提取酪蛋白實(shí)驗(yàn)性質(zhì)基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn) 教學(xué)目的和要求。2.標(biāo)準(zhǔn)VC的滴定 吸取標(biāo)準(zhǔn)VC(),加9mL 1℅草酸混勻,用裝有2,6二氯酚靛酚的微量滴定管滴定至淡紅色(保持5s不褪去)為終點(diǎn),記下所用體積V標(biāo)3.樣品VC的滴定 從1中取10mL,放入錐形瓶,用2,6二氯酚靛酚滴定,方法同上,作兩次平行實(shí)驗(yàn)?!镌摲ǖ膯挝欢x是:,37℃保溫條件下與底物作用30分鐘。)教學(xué)過程中師生活動(dòng)設(shè)計(jì) 蛋白質(zhì)顆粒為什么能電泳?依據(jù)什么性質(zhì)?提綱、板書設(shè)計(jì)原理及簡(jiǎn)要操作步驟作業(yè),醋酸纖維薄膜點(diǎn)樣的一端應(yīng)靠近哪一極?為什么??主要參考資料[1] 《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》,何幼鸞、湯文浩,華師出版社,2013[2]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》,董曉燕主編,化學(xué)工業(yè)出版社,2010總結(jié)分析需要強(qiáng)調(diào)點(diǎn)樣方法,避免點(diǎn)樣過多,重復(fù)點(diǎn)樣等;重點(diǎn)講解遷移速率的因素;結(jié)合血清電泳在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用,便于學(xué)生更好的理解《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》教案 第 9次課 2學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 血清ALT活性測(cè)定 實(shí)驗(yàn)性質(zhì)綜合性實(shí)驗(yàn) 教學(xué)目的和要求掌握血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性測(cè)定的基本原理、具體操作方法了解其臨床意義。用鑷子將膜條平懸于電泳槽支架的濾紙橋上,要平直。二、實(shí)驗(yàn)步驟:1)預(yù)處理;2)點(diǎn)樣:3)電泳;4)染色;5)漂洗,吸干。影響電泳遷移率的內(nèi)在因素:質(zhì)點(diǎn)所帶凈電荷的量、質(zhì)點(diǎn)的大小和形狀。試劑:1. 巴比妥緩沖液(,):,用蒸餾水定容至1000mL。如上表中的10試管。然后每支試管加入5毫升試劑甲,在旋渦混合器上迅速混合,于室溫(20~25℃)放置 10分鐘。觀察各管顏色并解釋結(jié)果▲。 (1)取試管3支,編號(hào),各管按下表依次加入各種試劑。因?yàn)槊副旧硎堑鞍踪|(zhì),pH不僅影響酶蛋白分子某些基團(tuán)的解離,也影響底物的解離程度,從而影響酶與底物的結(jié)合。實(shí)驗(yàn)材料儀器:水浴鍋、電爐、白瓷板、試管、量筒、漏斗、脫脂棉。點(diǎn)樣完畢,立即用電熱吹風(fēng)機(jī)吹干樣點(diǎn)。硅膠、氧化鋁和聚酰胺是廣泛采用的吸附劑,在吸附劑或支持劑中添加合適的粘合劑后再涂布,可使薄層緊貼在玻璃板上。雞蛋清溶液(蛋清:水=1:9)管號(hào)123456材料雞蛋清液指甲頭發(fā)%苯酚%色氨酸%酪氨酸(滴)4少許少許444濃硝酸(滴)22020444現(xiàn)象逐滴加10% NaOH后現(xiàn)象變化%醋酸鉛1mL、10%NaOH1mL、卵清蛋白1mL三樣試劑混勻加熱,觀察現(xiàn)象。教學(xué)過程中師生活動(dòng)設(shè)計(jì) 蛋白質(zhì)沉淀原理,什么是蛋白質(zhì)變性?根據(jù)性質(zhì)推測(cè)其應(yīng)用提綱、板書設(shè)計(jì) 原理及簡(jiǎn)要操作步驟作業(yè) ??主要參考資料[1] 《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》,何幼鸞、湯文浩,華師出版社,2013[2]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教程》,王金亭,方俊主編,華中科技大學(xué)出版社,2010總結(jié)分析 通過原理分析,幫助學(xué)生理解“沉淀的蛋白質(zhì)不一定表現(xiàn)為變性;變性的蛋白質(zhì)不一定表現(xiàn)為沉淀”; 重點(diǎn)區(qū)別:“可逆沉淀”與“不可逆沉淀”《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》教案 第 4 次課 2學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 蛋白質(zhì)和氨基酸顯色反應(yīng)
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