【正文】 由于三者堿性強(qiáng)弱為小檗堿茛菪堿東茛菪堿。與Sephadex G比較，Sephadex LH20分子中羥基總數(shù)雖無(wú)變化，但碳原子所占比例卻相對(duì)增加了。如丁二酸丁酸；間苯三酚間苯二酚苯酚。三者親脂性強(qiáng)弱為RP18RP8RP2。用橡皮塞輕輕敲擊層析柱。特殊薄層及薄層新進(jìn)展：⑴熒光薄層：在吸附劑中加入熒光性物質(zhì)，制成的薄層，用于不顯色或不能顯色的物質(zhì)分離。國(guó)內(nèi)一般都采用手工方法鋪板。按其操作方法，在柱上進(jìn)行稱為柱層析；在薄層上進(jìn)行稱為薄層層析；在紙上進(jìn)行稱為紙層析。 同理：溶質(zhì)B的分配與A相反，10%以下在上相中，90%以上在下相中。例中性皂苷和酸性皂苷的分離可用鉛鹽法，向混合皂苷的水溶液或醇溶液中先加入中性醋酸鉛則酸性皂苷形成鉛鹽沉淀，而中性皂苷則留于溶液中，據(jù)此，可將兩者分開(kāi)。二、中草藥有效成分的分離和精制結(jié)晶和重結(jié)晶　結(jié)晶法是分離和精制固體成分的重要方法之一，是利用混合物中各成分在溶劑中的溶解度不同達(dá)到分離的方法。例：①?gòu)娜冕樦刑崛⌒￠迚A；②從槐米中提取蘆丁；③從甘草中提取甘草酸等。(注意先重復(fù)該方法，得到產(chǎn)品后，再結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際，不斷改進(jìn)工藝，達(dá)到大生產(chǎn)要求)。.. . . ..天然藥物有效成分提取分離技術(shù)中草藥以植物藥為主，而植物都是由復(fù)雜的化學(xué)成分所組成。 第二、從中草藥中尋找未知有效成分或有效部位時(shí)，情況比較復(fù)雜。醇類溶劑提取法大多數(shù)中草藥成分都可用醇（EtOH,MeOH）或含水、含酸的醇來(lái)提取。一般來(lái)說(shuō)，從不是結(jié)晶狀物質(zhì)處理得到結(jié)晶狀物質(zhì)，這一步叫結(jié)晶。另外，在粗制皂苷的水溶液中加入碳酸銅溶液，攪拌，可使鞣質(zhì)、色素等雜質(zhì)沉出除去。計(jì)算方法：KB==1/10 B=1/11180。層析法按分離原理可分為⑴吸附層析（利用吸附劑對(duì)樣品吸附能力的差別進(jìn)行分離）；⑵分配層析（利用樣品組分在二種不相互溶的溶劑中分配系數(shù)的不同進(jìn)行分離）；⑶離子交換層析（利用樣品組分在離子交換樹(shù)脂上交換能力大小不同進(jìn)行分離）；⑷凝膠層析（利用分子篩分離物質(zhì)的一種方法）。鋪板注意事項(xiàng)： ⑴用蒸餾水調(diào)制吸附劑時(shí)，有時(shí)為了把氣泡趕盡，可加12滴乙醇消泡；⑵國(guó)內(nèi)產(chǎn)硅膠G 中的石膏經(jīng)常不起粘合作用，因此，常用2‰的CMCNa溶液調(diào)硅膠G制成硬板。⑵絡(luò)合薄層：硝酸銀薄層，用于分離碳原子數(shù)目相等而其中碳碳雙鍵數(shù)目不等的一系列化合物。要求在層析柱四周敲擊均勻，否則，由于層析柱兩側(cè)硅膠緊密程度不一，造成色譜帶產(chǎn)生斜面，影響分離效果。Lobar柱屬于低壓柱層析范疇(5個(gè)大氣壓)。⑵形成氫鍵的位置對(duì)吸附力有影響。不僅可在水中應(yīng)用，也可在極性有機(jī)溶劑或它們與水組成的混合溶劑中膨潤(rùn)使用。因此，先用水洗下東茛菪堿；繼用氯化銨（NH4Cl）洗下茛菪堿；最后用碳酸鈉（Na2CO3）洗下小檗堿。③堿性強(qiáng)弱不同的生物堿分離東茛菪堿；茛菪堿；小檗堿混合物水溶液通過(guò)銨（NH4+）型弱酸性樹(shù)脂。羥丙基葡聚糖凝膠(Sephadex LH20)為Sephadex G25經(jīng)羥丙基化處理后得到的產(chǎn)物。聚酰胺吸附強(qiáng)弱主要取決于各種化合物與之形成氫鍵締合的能力，要含水溶劑中大致有下列規(guī)律：⑴形成氫鍵的基團(tuán)數(shù)目越多，則吸附能力越強(qiáng)。分別命名為RP(reverse phase)RP8及RP18。使洗脫劑蓋過(guò)硅膠表面數(shù)厘米為宜。被分離物質(zhì)、吸附劑和展開(kāi)劑三者既相互聯(lián)系又相互制約，三者之間的關(guān)系可用下圖表示： 在實(shí)際工作中，應(yīng)注意前人有經(jīng)驗(yàn)，再結(jié)合自己的條件加以選擇。硬板的制備是用stahl涂布器或手工方法鋪板。層析法是一種使不同分子相互分離的過(guò)程，當(dāng)一混樣品被導(dǎo)入一固定相的支持體中，而另一流體（移動(dòng)相）通過(guò)時(shí)，由于樣品各組分與固定相和移動(dòng)相相互作用的大小不同，使用權(quán)各組分通過(guò)固定相支持體的速成率不同而得到期分離。100%=%。③金屬鹽沉淀法：常用鉛鹽（中性和堿性醋酸鉛）、鋇鹽、鈣鹽、銅鹽等。如：樟木可樟腦；茶葉中咖啡堿；大黃中游離羥基蒽醌的提取。提取方法可分為水煎、水浸和水滲鹿三種。一般先查閱有關(guān)資料，特別是工業(yè)生產(chǎn)的方法，搜集比較該種或該類成分的各種提取方法，再根據(jù)具體條件加以選用。其中主要有纖維素、葉綠素、單糖、低聚糖和淀粉、蛋白質(zhì)和酶、油脂和蠟、樹(shù)脂、樹(shù)膠、鞣質(zhì)及無(wú)機(jī)鹽等。只能根據(jù)預(yù)先確定的目標(biāo)，在臨床或藥理試驗(yàn)配合下，經(jīng)不同溶劑提取，以確定有效部位。以乙醇最為常用，由于醇類溶劑兼有親水性的醇羥基和親脂性的烷基，因此，具有溶解度范圍大，適用范圍廣的特點(diǎn)。從比較不純的結(jié)晶用結(jié)晶方法精制到較純的結(jié)晶，稱重結(jié)晶。④試劑沉淀法：分離生物堿尤其是水溶性生物堿常加入苦味酸、苦酮酸、雷氏銨鹽等生物堿沉淀試劑，生成的生物堿鹽通過(guò)復(fù)分解反應(yīng)或加入無(wú)機(jī)鹽處理又得到原來(lái)的生物堿。100%=%。(一)薄層層析：薄