【正文】 in。15．自來(lái)水洗30s。7．90%酒精I(xiàn) 1min。2．染色結(jié)果細(xì)胞核呈藍(lán)色，細(xì)胞漿、肌肉、結(jié)締組織、紅細(xì)胞和嗜伊紅顆粒呈不同程度的紅色。95%I酒精1min。1%鹽酸酒精分化20s。（二）人工操作蘇木精伊紅染色方法1．染色步驟 。病理細(xì)胞和組織學(xué)的診斷，教學(xué)和研究都是用HE染色方法觀察正常和病變組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)。打開(kāi)冷凍臺(tái)的二氧化碳開(kāi)關(guān)，二氧化碳?xì)怏w噴出，待組織出現(xiàn)冷霜時(shí)，關(guān)閉二氧化碳，即可切片。還應(yīng)注意電源正負(fù)極不能接反，用整流電源控制溫度。箱內(nèi)溫度下降后，打開(kāi)觀察窗，將組織固著器放置到速凍臺(tái)上，先放少量OCT或羧甲基纖維素，待凍結(jié)后將組織塊放上，并在其周?chē)舆m量包埋劑，將組織塊包埋。用于免疫熒光標(biāo)記、免疫酶標(biāo)記和放射自顯影。（4）切片刀和切片機(jī)切片刀放置的傾角以20－30℃為好。但組織在二甲苯內(nèi)的時(shí)間應(yīng)嚴(yán)格掌握，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)組織易碎，也無(wú)法切出好的切片。有關(guān)固定時(shí)應(yīng)注意的事項(xiàng)，可參見(jiàn)有關(guān)章節(jié)。否則，可能產(chǎn)生氣泡影響染色。（3）輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)切取組織，是由下向上切，為得到完整的切片，防止組織出現(xiàn)刀紋裂縫，應(yīng)將組織硬脆難切的部分放在上端（如皮膚組織，應(yīng)將表皮部分向上。2．切片制作過(guò)程（1）將預(yù)先修好的組織塊先在冰箱中冷卻，而后裝在切片機(jī)固定裝置上。一般切4－6μm的切片，特殊情況可切1－2μm。石蠟完全凝固后，倒出冷縮的蠟塊片，用加熱的外科刀，按組織塊位置修整蠟片待用。室溫高則選用熔點(diǎn)稍高的石蠟，反之，則選用熔點(diǎn)較低的石蠟，這樣可防止切片時(shí)石蠟太軟或易碎裂。正丁醇微溶于水，能與各種濃度酒精混合，也能直接溶解石蠟。整個(gè)浸洗時(shí)間比流水沖洗應(yīng)稍長(zhǎng)一些。固定液數(shù)量應(yīng)為病理組織塊的5到20倍。特殊病料應(yīng)根據(jù)器官的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)切取。即石蠟切片法，冰凍切片法和火棉膠切片法。五、病理科收到標(biāo)本后應(yīng)及時(shí)操作檢查。第二篇：手術(shù)室組織病理標(biāo)本管理制度手術(shù)室病理標(biāo)本管理制度手術(shù)室病理標(biāo)本管理制度為了規(guī)范病理標(biāo)本管理，避免各類(lèi)差錯(cuò)事故的發(fā)生，保證準(zhǔn)確及 時(shí)發(fā)出病理報(bào)告，根據(jù)我院實(shí)際情況特制定以下規(guī)定。該項(xiàng)目按淄博市物價(jià)收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)收費(fèi)，如科室病人有需要做快速石蠟病理檢查，請(qǐng)醫(yī)生及時(shí)將其標(biāo)本送到病理科。第一篇：病理組織工作站快速石蠟切片病理診斷我院病理科引進(jìn)的鈞鎰超聲組織處理儀（病理組織工作站），病理常規(guī)石蠟切片診斷報(bào)告一般需時(shí)3～5天，在病人病情危急或者是腫瘤病人的診斷中，臨床活檢，用常規(guī)石蠟制片法制作，病理報(bào)告如沒(méi)特殊情況，一般都需要三天才能發(fā)出。應(yīng)用超聲波快速石蠟制片機(jī)，一般可以在6小時(shí)工作時(shí)間內(nèi)發(fā)出常規(guī)病理診斷報(bào)告（上午11點(diǎn)前送檢標(biāo)本，當(dāng)天下午5點(diǎn)前發(fā)出報(bào)告；下午4點(diǎn)前送檢標(biāo)本，次日上午12點(diǎn)前發(fā)出報(bào)告）。計(jì)劃首先開(kāi)放科室：胃腸鏡活檢，耳鼻喉活檢，宮頸活檢，子宮內(nèi)膜刮出組織。凡需送冰凍檢查，臨床醫(yī)師應(yīng)提前一 天通知病理科。手術(shù)室病理標(biāo)本管理制度流程 術(shù)前填寫(xiě)病理申請(qǐng)單普通標(biāo)本 10%中性福爾馬林或 95％乙醇 冰凍病理標(biāo)本 病人家屬或委托人確認(rèn) 提前一天通知病理科 登記簽收 送檢病理科 冰凍報(bào)告 石蠟切片 細(xì)胞學(xué)檢查 按照規(guī)定發(fā)出報(bào)告第三篇：病理組織切片制作技術(shù)病理組織切片制作技術(shù)病理組織切片常用的制作方法有三種。應(yīng)選擇病變部與可疑病變部切取，切取時(shí)要由表及里，有淺入深并包括周?chē)＝M織一部分。材料取下后，應(yīng)迅速固定。沖洗時(shí)如不方便用流水沖洗，也可用較大容器盛裝水浸洗，每隔相當(dāng)時(shí)間換水一次。除用酒精作脫水劑外，還可以用正丁醇（N—Butyla alcohol）。通常選擇熔點(diǎn)在52～56℃之間的石蠟，并視切片時(shí)環(huán)境的氣溫而選擇。待蠟液出現(xiàn)凝固層后，即輕輕放入冷水盆中或冰箱中使其凝固。在切片前應(yīng)先切去標(biāo)本周?chē)^(guò)多的石蠟（此過(guò)程稱(chēng)為修塊）但也不能留得太少，否則易造成組織破壞，連續(xù)切片時(shí)分片困難。（2）準(zhǔn)備充足的經(jīng)過(guò)處理的清潔載玻片和恒溫烤片裝置，大中號(hào)優(yōu)質(zhì)狼毫毛筆和鉛筆（用于在載玻片的粗糙端寫(xiě)號(hào)），如用普通載玻片，可用碳素墨水和蛋白甘油按3：1體積混合后書(shū)寫(xiě)。為減少切片刀與組織塊在切片過(guò)程中產(chǎn)生的熱量，使石蠟保持合適的硬度，切片時(shí)可經(jīng)常用冰塊冷卻切片刀和組織塊，尤其在夏季高溫季節(jié)更為必要。但對(duì)腦組織待完全晾干后，才能進(jìn)行烤片。至于組織固定的時(shí)間，根據(jù)具體情況加以掌握。二甲苯透明也應(yīng)充分，否則不利于石蠟的浸透。全鋼刀或單面鎢刀也適合石蠟或火棉膠包埋的骨組織。此法可保存組織內(nèi)的可溶性物質(zhì)，防止蛋白質(zhì)變性和酶的失活，減少抗原的丟失。一般調(diào)節(jié)溫度為－25℃左右。接通循環(huán)流水后，再接通電源，而且在使用的全過(guò)程中流水不能中斷，關(guān)閉電路后，才能停水。4．二氧化碳冰凍法 將組織塊用蒸餾水洗后，放在冰凍切片機(jī)的冷凍臺(tái)上，加蒸餾水少許。在病理學(xué)實(shí)驗(yàn)室中稱(chēng)為常規(guī)染色方法。隨著科學(xué)技術(shù)快速發(fā)展和電子計(jì)算機(jī)的廣泛應(yīng)用，染色自動(dòng)儀器的出現(xiàn)，許多實(shí)驗(yàn)室已用全自動(dòng)染色機(jī)代替人工染色。自來(lái)水洗1min。90%酒精30s。中性樹(shù)膠或加拿大樹(shù)膠封片。6．95%酒精I(xiàn)I 1min。14．伊紅染色30s至5min。22．二甲苯I 2min。4．1%鹽酸酒精分化20s。12．95%酒精1min。（1）Harris蘇木精的配制 蘇木精1g 硫酸鋁鉀15g 無(wú)水乙醇10ml 蒸餾水200ml先用蒸餾水加熱溶解硫酸鋁鉀，用無(wú)水乙醇溶解蘇木精再倒入已溶解的硫酸鋁鉀蒸餾水中，煮沸1min后，稍冷卻，繼續(xù)加熱至染液變?yōu)樽霞t色，用紗布蓋瓶口，用前濾紙過(guò)濾后每100ml加冰醋酸5ml。4．鹽酸酒精分化液的配制 ～1ml75%酒精99ml此液用一段時(shí)間后需要延長(zhǎng)或更換液體，新液分化時(shí)間要短。常用切片封片膠有國(guó)產(chǎn)的中性樹(shù)膠，光學(xué)樹(shù)膠，加拿大樹(shù)膠和合成樹(shù)脂（DPX）。結(jié)果：經(jīng)穿刺活檢，50例患者中AFP、Glypican3陽(yáng)性的有32例，%，經(jīng)免疫組織化學(xué)技術(shù)檢驗(yàn)，47例患者的細(xì)胞組織呈現(xiàn)變異性，%，免疫組織化學(xué)技術(shù)檢驗(yàn)的陽(yáng)性率明顯高于穿刺活檢的陽(yáng)性率，比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P免疫組織化學(xué)染色技術(shù)是通過(guò)抗原和抗體的結(jié)合的反應(yīng)來(lái)確定被檢測(cè)的細(xì)胞中是否存在特異性的抗體，從而對(duì)疾病進(jìn)行診斷。將固定好的切片脫蠟，脫蠟后在室溫下用3%的雙氧水孵育10min，然后用蒸餾水洗滌3次，每次保持3min，之后用高壓鍋在110度環(huán)境下修復(fù)2min,用PBS洗液洗滌3次，每次5min，加入一滴一抗，在室溫下孵育2個(gè)小時(shí)，接著用PBS洗液洗滌3次，每次5min，加入U(xiǎn)ltarsensitiveTM試劑之后在室溫下孵育20分鐘，再用PBS液洗滌，洗滌之后用DAB顯色，采用蒸餾水沖洗，采用蘇木素復(fù)染1個(gè)小時(shí)，采用梯度乙醇脫水，使用二甲苯透明，用中性樹(shù)膠封固，再采用PBS作為陰性對(duì)照，染色呈現(xiàn)棕黃色為陽(yáng)性。但是不可否認(rèn)的是，這并不影響免疫組織化學(xué)技術(shù)的發(fā)展。取材：組織標(biāo)本的選擇即取材，取材的目的是正確的獲取所需要的標(biāo)本或標(biāo)本的某一部位。封固劑：使染色后的組織封固于載玻片與蓋玻片 之間而不與空氣直接接觸，避免氧化褪色；折光率與玻片的折光率相似。襯染（復(fù)染）：免疫組化染色后加用其他染料復(fù)染，襯托組織形態(tài)結(jié)構(gòu)，使形態(tài)與功能密切相關(guān)，利于結(jié)果分析。