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細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)技術(shù)總結(jié)(更新版)

2025-11-02 06:32上一頁面

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【正文】 現(xiàn)主體作用。導(dǎo)語設(shè)計(jì)的依據(jù):一是概括了舊知識(shí),引出新知識(shí),溫故而知新,使學(xué)生能夠知道新知識(shí)和舊知識(shí)之間的聯(lián)系。 引導(dǎo)學(xué)生通過創(chuàng)設(shè)情景等活動(dòng)形式獲取知識(shí),以學(xué)生為主體,使學(xué)生的獨(dú)立探索性得到了充分的發(fā)揮,培養(yǎng)學(xué)生的自學(xué)能力、思維能力、活動(dòng)組織能力。因此,在教學(xué)過程中,不僅要使學(xué)生“知其然”,還要使學(xué)生“知其所以然”。通過對(duì)老年人“老年斑、皺紋和白頭發(fā)”的分析,共同歸納出細(xì)胞衰老的特征。對(duì)細(xì)胞衰亡知識(shí)的學(xué)習(xí),有助于培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)興趣,培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新意識(shí),而細(xì)胞的衰老及凋亡是細(xì)胞必須經(jīng)過的階段,因此,本節(jié)內(nèi)容在細(xì)胞的生命歷程中具有不容忽視的重要的地位。進(jìn)一步的研究證明,凋亡早期TFAR19的核轉(zhuǎn)位具有普遍意義,不同細(xì)胞凋亡早期均出現(xiàn)TFAR19高表達(dá)和核轉(zhuǎn)位。DAPI為半通透性,用于常規(guī)固定細(xì)胞的染色。貼壁細(xì)胞出現(xiàn)皺縮、變圓、脫落。蘇木精染液為堿性,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ;伊紅為酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。OH形成,很少能夠被染色。(1)Western blot 分析Procaspase3的活化,以及活化的Caspase3及對(duì)底物多聚ADP核糖聚合酶[poly(ADPribose)polymerase,PARP]等的裂解。DF 顯示 JC1在FL2通道熒光信號(hào)降低的細(xì)胞亞群(R2)顯著增加,證明線粒體膜電位△Ψm 下降,細(xì)胞發(fā)生凋亡??梢詸z測細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一種核酸染料,它不能透過完整的細(xì)胞膜,但在凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞,PI能夠透過細(xì)胞膜而使細(xì)胞核紅染。最后我個(gè)人的話最想獲得的是關(guān)于癌細(xì)胞無限增殖機(jī)理方面的指導(dǎo),和我不成熟構(gòu)想的可實(shí)施率。很多人對(duì)生物技術(shù)這個(gè)專業(yè)有很多的誤解,我們在完成自己研究項(xiàng)目的同時(shí)也有義務(wù)科普大眾。再我自己看來生物技術(shù)其實(shí)是一個(gè)既可以看做一個(gè)基礎(chǔ)學(xué)科也可以看做是一個(gè)很新興的,綜合性的學(xué)科。(4)凋亡細(xì)胞的吞噬搬運(yùn) 凋亡細(xì)胞碎片的表面有標(biāo)志分子(血小板反應(yīng)素、粘附糖蛋白)有利于臨近的巨噬細(xì)胞以及其他細(xì)胞的識(shí)別、吞噬和處理。BCL2同源二聚體抑制細(xì)胞凋亡,Bax同源二聚體促進(jìn)細(xì)胞凋亡。(1)誘導(dǎo)啟動(dòng) 引起凋亡的信號(hào)可以來自細(xì)胞外,通過跨膜傳導(dǎo)對(duì)細(xì)胞內(nèi)的調(diào)控分子起作用;也可以直接作用于細(xì)胞內(nèi)的靶分子。細(xì)胞凋亡過少也可引起疾病發(fā)生:在腫瘤的發(fā)生過程中,誘導(dǎo)凋亡的基因如p53等失活、突變,而抑制凋亡的基因如bCL2等過度表達(dá),都會(huì)引起細(xì)胞凋亡顯著減少,在腫瘤發(fā)病學(xué)中具有重要意義;針對(duì)自身抗原的淋巴細(xì)胞的凋亡障礙可導(dǎo)致自身免疫性疾?。荒承┎《灸芤种破涓腥炯?xì)胞的凋亡而使病毒存活。一般表現(xiàn)為單個(gè)細(xì)胞的死亡,且不伴有炎癥反應(yīng)。膜聯(lián)蛋白V 法磷脂酰絲氨酸(PS)位于正常細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè),但在細(xì)胞凋亡的早期,PS 可從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜表面。電子顯微鏡收集細(xì)胞,%戊二醛4176。貼壁細(xì)胞出現(xiàn)皺縮,變圓,脫落。Ⅱa 期細(xì)胞核的染色質(zhì)高度凝聚、邊緣化。細(xì)胞凋亡的酶Caspase檢測檢測Caspase活力可用免疫雜交技術(shù)分析酶原的加工和底物水解的產(chǎn)物,或用人工底物檢測酶活力,也可對(duì)活化的Caspase做親和標(biāo)記。細(xì)胞凋亡過多可引起疾病發(fā)生,如:①愛滋病的發(fā)展過程中,CD4+T細(xì)胞數(shù)目的減少;②移植排斥反應(yīng)中,細(xì)胞毒性T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞死亡;③缺血及再灌注損傷,導(dǎo)致心肌細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞的凋亡增多;④神經(jīng)系統(tǒng)退化性疾?。ˋlzheimer病、Parkinson39。凋亡小體內(nèi)可含細(xì)胞漿、細(xì)胞器和核碎片,有的不含核碎片;④凋亡小體被具有吞噬功能的細(xì)胞如巨噬細(xì)胞、上皮細(xì)胞等吞噬、降解: ⑤凋亡發(fā)生過程中,細(xì)胞膜保持完整,細(xì)胞內(nèi)容物不釋放出來,所以不引起炎癥反應(yīng)。另外一些跨膜作用的刺激因子通過受體與配體的結(jié)合而激活細(xì)胞凋亡程序,其中最重要的是腫瘤壞死因子受體家族。細(xì)胞凋亡后的梯狀DNA 足葉乙甙誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡后的梯狀DNA(3)凋亡的實(shí)施 細(xì)胞凋亡的實(shí)施是通過蛋白水解的一系列連鎖反應(yīng)實(shí)現(xiàn)的。關(guān)于對(duì)自己所學(xué)專業(yè),可能最初是興趣讓我來到這個(gè)專業(yè),不是太清楚為什么會(huì)對(duì)這個(gè)專業(yè)有這么大的熱情,但真的很喜歡它。希望能夠在大一下就能夠進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,學(xué)一些基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)技能為以后自己做項(xiàng)目打下基礎(chǔ)。而對(duì)于這個(gè)“永生計(jì)劃” 我有一個(gè)想法,癌細(xì)胞是無限增殖,如果我們能夠完全弄清楚癌細(xì)胞的增殖過程及機(jī)理,并能夠運(yùn)用到人體衰老細(xì)胞中,對(duì)衰老細(xì)胞進(jìn)行基因修飾添加經(jīng)過改良的癌細(xì)胞中能夠無限增殖的基因,或許“永生”并非不可能。第四篇:細(xì)胞凋亡檢測方法總結(jié)磷脂酰絲氨酸外翻分析(Annexin V法)磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine, PS)正常位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè),但在細(xì)胞凋亡的早期,PS可從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面,暴露在細(xì)胞外環(huán)境中(圖3)。右上象限為獨(dú)立的核(FITC/PI+)。常用紅綠熒光的相對(duì)比例來衡量線粒體去極化的比例。檢測原理正常細(xì)胞:JC1聚集在線粒體內(nèi),形成多聚體,呈鮮紅色熒光,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有綠色;即紅光++,綠光++。3是早期凋亡現(xiàn)象;5是晚期凋亡現(xiàn)象。細(xì)胞經(jīng)處理后,采用常規(guī)方法分離提純DNA,進(jìn)行瓊脂糖凝膠和溴化乙啶染色,在凋亡細(xì)胞群中可觀察到典型的DNA ladder。臺(tái)盼藍(lán)染色:如果細(xì)胞膜不完整、破裂,臺(tái)盼藍(lán)染料進(jìn)入細(xì)胞,細(xì)胞變藍(lán),即為壞死。熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡一般以細(xì)胞核染色質(zhì)的形態(tài)學(xué)改變?yōu)橹笜?biāo)來評(píng)判細(xì)胞凋亡的進(jìn)展情況。透射電子顯微鏡觀察結(jié)果評(píng)判:凋亡細(xì)胞體積變小,細(xì)胞質(zhì)濃縮。今天我要進(jìn)行說課的內(nèi)容是細(xì)胞的衰老和凋亡首先,我對(duì)本節(jié)內(nèi)容進(jìn)行分析《細(xì)胞的衰老和凋亡》是教材高中生物必修本第6單元第3節(jié)內(nèi)容。由于細(xì)胞的衰老和凋亡與人的衰老和壽命有關(guān),學(xué)生易感興趣。強(qiáng)調(diào)細(xì)胞死亡有兩種形式。培養(yǎng)學(xué)生將課堂教學(xué)和自己的行動(dòng)結(jié)合起來,充分引導(dǎo)學(xué)生全面的看待發(fā)生在身邊的現(xiàn)象,發(fā)展思辯能力,注重學(xué)生的心理狀況。比如在比較細(xì)胞凋亡與壞死的區(qū)別時(shí)可以讓學(xué)生先進(jìn)行小組討論,再進(jìn)行總結(jié),而不是單一地接受教師傳授的觀點(diǎn)。
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