【正文】 缺血及再灌注損傷，導(dǎo)致心肌細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞的凋亡增多；④神經(jīng)系統(tǒng)退化性疾病（Alzheimer病、Parkinson39。⑤暴露于電離輻射可引起多種組織細(xì)胞的凋亡。凋亡小體內(nèi)可含細(xì)胞漿、細(xì)胞器和核碎片，有的不含核碎片；④凋亡小體被具有吞噬功能的細(xì)胞如巨噬細(xì)胞、上皮細(xì)胞等吞噬、降解： ⑤凋亡發(fā)生過程中，細(xì)胞膜保持完整，細(xì)胞內(nèi)容物不釋放出來，所以不引起炎癥反應(yīng)。3．細(xì)胞凋亡的機(jī)制 細(xì)胞凋亡是一系列依賴能量的分子水平變化的終點(diǎn)，細(xì)胞凋亡過程包括以下4個(gè)階段，即：誘導(dǎo)啟動、細(xì)胞內(nèi)調(diào)控、實(shí)施和凋亡細(xì)胞的吞噬搬運(yùn)階段。另外一些跨膜作用的刺激因子通過受體與配體的結(jié)合而激活細(xì)胞凋亡程序，其中最重要的是腫瘤壞死因子受體家族。BCL2蛋白家族(BCL2 family of proteins)是調(diào)節(jié)線粒體通透性的主要成分，通過形成同源(BCL2/BCL2, Bax/Bax)和異源(BCL2/Bax)二聚體對細(xì)胞凋亡進(jìn)行調(diào)控。細(xì)胞凋亡后的梯狀DNA 足葉乙甙誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡后的梯狀DNA（3）凋亡的實(shí)施 細(xì)胞凋亡的實(shí)施是通過蛋白水解的一系列連鎖反應(yīng)實(shí)現(xiàn)的。DNA瓊脂糖凝膠電泳出現(xiàn)ladder也成為檢測凋亡發(fā)生的重要標(biāo)志。關(guān)于對自己所學(xué)專業(yè)，可能最初是興趣讓我來到這個(gè)專業(yè)，不是太清楚為什么會對這個(gè)專業(yè)有這么大的熱情，但真的很喜歡它?，F(xiàn)代生物技術(shù)綜合基因工程、分子生物學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、胚胎學(xué)、免疫學(xué)、有機(jī)化學(xué)、無機(jī)化學(xué)、物理化學(xué)、物理學(xué)、信息學(xué)及計(jì)算機(jī)科學(xué)等多學(xué)科技術(shù)，可用于研究生命活動的規(guī)律和提供產(chǎn)品為社會服務(wù)等。希望能夠在大一下就能夠進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，學(xué)一些基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)技能為以后自己做項(xiàng)目打下基礎(chǔ)。說到這里，可能真的學(xué)習(xí)這個(gè)專業(yè)我們更多的是在學(xué)習(xí)了基礎(chǔ)課程后，自己學(xué)習(xí)最新更新的知識，在老師的指導(dǎo)下自己收集資料自己進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，再完成項(xiàng)目。而對于這個(gè)“永生計(jì)劃” 我有一個(gè)想法，癌細(xì)胞是無限增殖，如果我們能夠完全弄清楚癌細(xì)胞的增殖過程及機(jī)理，并能夠運(yùn)用到人體衰老細(xì)胞中，對衰老細(xì)胞進(jìn)行基因修飾添加經(jīng)過改良的癌細(xì)胞中能夠無限增殖的基因，或許“永生”并非不可能。最后關(guān)于實(shí)驗(yàn)室，畢竟如果想要真的從事生物研究該如何合理利用現(xiàn)有資源來完成自己的項(xiàng)目。第四篇：細(xì)胞凋亡檢測方法總結(jié)磷脂酰絲氨酸外翻分析（Annexin V法）磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine, PS）正常位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)，但在細(xì)胞凋亡的早期，PS可從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面，暴露在細(xì)胞外環(huán)境中(圖3)。兩種細(xì)胞死亡方式間的差別是在凋亡的初始階段細(xì)胞膜是完好的，而細(xì)胞壞死在其早期階段細(xì)胞膜的完整性就破壞了。右上象限為獨(dú)立的核（FITC/PI+）。（還有一種說法是凋亡最后階段的細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)沒有細(xì)胞膜了說以不結(jié)合AnnexinV而只結(jié)合PI）實(shí)驗(yàn)原理JC1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想熒光探針。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。AC 為對照，細(xì)胞亞群(R1)在 FL2和FL1 通道同時(shí)顯示 JC1 的熒光信號。檢測原理正常細(xì)胞：JC1聚集在線粒體內(nèi)，形成多聚體，呈鮮紅色熒光，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有綠色；即紅光++，綠光++。但在細(xì)胞凋亡的晚期和死亡細(xì)胞，caspase3的活性明顯下降。3是早期凋亡現(xiàn)象；5是晚期凋亡現(xiàn)象。由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒有DNA的斷裂，因而沒有339。細(xì)胞經(jīng)處理后，采用常規(guī)方法分離提純DNA，進(jìn)行瓊脂糖凝膠和溴化乙啶染色，在凋亡細(xì)胞群中可觀察到典型的DNA ladder?！咎K木精 — 伊紅染色法，(hematoxylineosin staining)，簡稱HE染色法。臺盼藍(lán)染色：如果細(xì)胞膜不完整、破裂，臺盼藍(lán)染料進(jìn)入細(xì)胞，細(xì)胞變藍(lán)，即為壞死。一、細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測光學(xué)顯微鏡和倒置顯微鏡（1）未染色細(xì)胞：凋亡細(xì)胞的體積變小、變形，細(xì)胞膜完整但出現(xiàn)發(fā)泡現(xiàn)象，細(xì)胞凋亡晚期可見凋亡小體。熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡一般以細(xì)胞核染色質(zhì)的形態(tài)學(xué)改變?yōu)橹笜?biāo)來評判細(xì)胞凋亡的進(jìn)展情況。Hoechst是與DNA特異結(jié)合的活性染料，儲存液用蒸餾水配成1mg/ml的濃度，使用時(shí)用PBS稀釋成終濃度為2~5mg/ml。透射電子顯微鏡觀察結(jié)果評判：凋亡細(xì)胞體積變小，細(xì)胞質(zhì)濃縮。同時(shí)我們發(fā)現(xiàn)，凋亡早期TFAR19蛋白的核轉(zhuǎn)位早于磷脂酰絲氨酸（PS）外翻和細(xì)胞核DNA的片段化，提示TFAR19蛋白的核轉(zhuǎn)位是細(xì)胞凋亡更早期發(fā)生的事件之一。今天我要進(jìn)行說課的內(nèi)容是細(xì)胞的衰老和凋亡首先，我對本節(jié)內(nèi)容進(jìn)行分析《細(xì)胞的衰老和凋亡》是教材高中生物必修本第6單元第3節(jié)內(nèi)容。同時(shí)細(xì)胞衰亡機(jī)制的研究與生物科技的發(fā)展息息相關(guān)。由于細(xì)胞的衰老和凋亡與人的衰老和壽命有關(guān)，學(xué)生易感興趣。比如通過比較老年人和青年人的外形區(qū)別，引入到細(xì)胞衰老的特征。強(qiáng)調(diào)細(xì)胞死亡有兩種形式。 我們都知道生物是一門培養(yǎng)人的實(shí)踐能力的重要學(xué)科。培養(yǎng)學(xué)生將課堂教學(xué)和自己的行動結(jié)合起來，充分引導(dǎo)學(xué)生全面的看待發(fā)生在身邊的現(xiàn)象，發(fā)展思辯能力，注重學(xué)生的心理狀況。基于本節(jié)課內(nèi)容的特點(diǎn)，我主要采用了以下的教學(xué)方法： ：利用課本上的圖片和現(xiàn)實(shí)生活中的實(shí)例進(jìn)行直觀演示，比如在講到細(xì)胞衰老的特征時(shí)，可用圖片進(jìn)行比較，以此來激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，活躍課堂氣氛，促進(jìn)學(xué)生對知識的掌握。比如在比較細(xì)胞凋亡與壞死的區(qū)別時(shí)可以讓學(xué)生先進(jìn)行小組討論，再進(jìn)行總結(jié)，而不是單一地接受教師傳授的觀點(diǎn)。（1）課前準(zhǔn)備：對學(xué)生進(jìn)行分組，布置學(xué)生進(jìn)行預(yù)習(xí)，并對課本上的“問題探討”進(jìn)行思考及小組內(nèi)部討論（2）以小組為單位，說說小組對“問題探討”的討論結(jié)果（3）由“問題探討”引入個(gè)體衰老與細(xì)胞衰老的關(guān)系（4）總結(jié)細(xì)胞衰老的特征（5）運(yùn)用講授法講解細(xì)胞凋亡和細(xì)胞壞死的含義，并引導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行比較討論，從而加深兩者間區(qū)別的理解（6）練習(xí)鞏固，并引導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行課后進(jìn)行書本中的關(guān)于社會老齡化相關(guān)問題的資料搜集和分析 ：由上節(jié)課學(xué)過的知識和教材開頭的情景設(shè)置導(dǎo)入新課。