20xx年醫(yī)學(xué)專題—tunel染色檢測細(xì)胞凋亡-預(yù)覽頁
【正文】 0kb的大片段。 依賴的核酸內(nèi)切酶作用下，在核小體單位之間被隨機(jī)切斷，形成180～200bp核小體DNA多聚體。TUNEL或缺口翻譯法實際上是分子生物學(xué)與形態(tài)學(xué)相結(jié)合的研究方法，對完整的單個凋亡細(xì)胞核或凋亡小體進(jìn)行原位染色，能準(zhǔn)確的反響細(xì)胞凋亡最典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征，可用于石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、培養(yǎng)的細(xì)胞和從組織中別離的細(xì)胞的細(xì)胞凋亡測定，并可檢測出極少量的凋亡細(xì)胞，靈敏度遠(yuǎn)比一般的組織化學(xué)和生物化學(xué)測定法要高，因而在細(xì)胞凋亡的研究中已被廣泛采用。在所有動物組織中幾乎不存在能與抗地高辛杭體結(jié)合的配體，因而非特異性反響很低。蛋白酶K〔200μg/ml，〕：蛋白酶K ；PBS 100ml。洗滌與終止反響緩沖液：氯化鈉 17. 4g；檸檬酸鈉 ；ddH2O 1000ml％二氨基聯(lián)苯〔DAB〕溶液：DAB 5mg；PBS 10ml，, 臨用前過濾后，%。用無水乙醇洗兩次，每次3min?！?〕冰凍組織切片預(yù)處理：將冰凍組織切片置10％中性甲醛中，于室溫固定10min后，去除多余液體?！?〕培養(yǎng)的或從組織別離的細(xì)胞的預(yù)處理：將約 5 107個/ml細(xì)胞于 4％中性甲醛室溫中固定 10min。用PBS洗兩次，每次5min。 組織切片用PBS洗 3次，每次 5min后，直接在切片上滴加兩滴過氧化物酶標(biāo)記的抗地高辛抗體，于濕盒中室溫反響30min。 于室溫用甲基綠進(jìn)行復(fù)染10min。〔三〕考前須知一定要設(shè)立陽性和陰性細(xì)
環(huán)評公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1