【正文】 乙醇、丙酮 三 、 用酶解法 、 發(fā)酵法和半合成法制備核苷酸 酶解法及堿水解法制備核苷酸 ? 酶解法制備脫氧核苷酸 桔青霉 產(chǎn)生 5`磷酸二脂酶 紅酵母 產(chǎn)生 3`磷酸二脂酶 ? 酶解法制備戊糖核苷酸 我國(guó)從 60年代開始使用 核酸酶 P1降解核糖核酸生產(chǎn)單核苷酸 ， 日本年產(chǎn) 呈味核苷酸 （ 肌苷酸和鳥苷酸 ）3000噸 ， 其中 60%是使用酶解法生產(chǎn)的 。 （ 3） RNA的提取實(shí)例： 啤酒酵母是提取 RNA的很好的資源 。 稀堿法： 是用 氫氧化鈉溶液 （ 1%） ， 使細(xì)胞壁變性 ， 使 核酸從細(xì)胞內(nèi)釋放出來 。 ? 核酸的含量與細(xì)胞大小無關(guān) ， 以生長(zhǎng)旺盛的組織細(xì)胞中含量較多 ， 如動(dòng)物胰臟 、 脾臟 、 胸腺 ， 植物的莖尖 、 根尖及各種分生組織等 。 前者是生物體合成原料或蛋白質(zhì)、脂肪、糖生物合成與降解以及能量代謝的輔酶，這一類藥物有助于改善機(jī)體的物質(zhì)代謝和能量平衡，加速受損組織的修復(fù)，促使缺氧組織恢復(fù)正常生理機(jī)能，臨床上已廣泛使用于放射病、血小板減少癥、白細(xì)胞減少癥、急慢性肝炎、心血管疾病、肌肉萎縮等病癥的治療，包括肌苷、輔酶 A、 GTP、 CTP、UTP、 ATP、腺苷、輔酶 I、輔酶 Ⅱ 等，多數(shù)是生物體自身能夠合成的物質(zhì)，具有一定臨床功能，毒副作用小，基本都可經(jīng)微生物發(fā)酵或從生物資源中提取。 通常在細(xì)菌中 RNA占 5％ ～ 25％ ， 在酵母中占 ％ ～ 15％ ， 在霉菌中占 %～ 28％ 。 上法的缺點(diǎn)是制得的 RNA Mr較低 ,(磷酸單脂酶 、 磷酸二脂酶降解 RNA， 90 ℃ 保持 3－ 4h破壞酶 )。 冷至 10℃ 以下 ， 6mol／ L HCl調(diào) ，置冷過夜 ， 離心得 RNA （ 純度 80％ ） 。 ?菌體自溶法生產(chǎn)核苷酸 磷酸二酯酶 在合適的條件下降解細(xì)胞內(nèi)的 RNA可產(chǎn)生 5′ 核苷酸 。 （ 2）改變細(xì)胞對(duì) GMP的透性 。 共同特點(diǎn)： （ 1）使用磷酸單酯酶活力很強(qiáng)的枯草芽孢桿菌或短小芽孢桿菌為誘變出發(fā)菌株； （ 2）具有特定標(biāo)記的有變株； （ 3）發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)需提供限量生長(zhǎng)因素。 ② 從鳥苷 （ 300mmol／ L） 與胸腺嘧啶 （ 300mmol／ L） 反應(yīng) ， 在歐文氏菌 AJZ992所產(chǎn)生的 嘌呤核苷磷酸化酶 和 嘧啶核苷磷酸化酶 的催化下生成 5′ 甲基尿苷 ， 然后經(jīng)化學(xué)法合成胸苷 。 阿糖腺苷在體內(nèi)受激酶作用生成的 阿糖腺三磷 ， 是脫氧腺三磷 （ dATP） 的拮抗物 ， 從而阻抑了以 dATP為底物的病毒DNA聚合酶的活力 。 采用前段與后段由兩個(gè)不同的酶催化 ， 即前段使用 嘧啶核苷磷酸化酶 ， 后段使用 嘌呤核苷磷酸化酶 。 ④ 成鹽 ： 2％ 鹽酸 甲醇 ? 以葡萄糖酸鈣為原料的合成路線 （ 五 ） 聚肌胞苷酸 （ 聚肌胞 ） （ Poyinosinic ，Polycytidylic Acid， Poly1： C） 結(jié)構(gòu)與性質(zhì) 1967年美國(guó)人 Field發(fā)現(xiàn) 聚肌胞 是 干擾素誘導(dǎo)物 ， 而且具有廣譜抗病毒作用 。 作用與用途 本品具有抗病毒 ， 抗腫瘤 ， 增強(qiáng)淋巴細(xì)胞免疫功能和抑制核酸代謝等作用 。 菌體培養(yǎng)基 （ g／ L） ： 葡萄糖 50； 多胨 5； 酵母膏 2； KH2PO4 2； （ NH4） 2HPO4 2； 1； ， 經(jīng) 28℃ ， 22h培養(yǎng) ， 收集菌體 ， 菌體經(jīng) ／ L磷酸緩沖液 ， 備用 。 酶合成法： 啤酒酵母泥 CMP + 磷脂酰膽堿 胞二磷膽堿 Ph8， 28℃ 粘性紅酵母發(fā)酵法： 粘性紅酵母 5‘CMPNa+磷酸膽堿 胞二磷膽堿 pH7， 30℃ 提取工藝： 離心 KOH [離子交換 ] 洗脫 反應(yīng)液 去菌體 洗脫液 Ph 甲酸 [活性炭吸附 ] [減壓、濃縮 ] [結(jié)晶 ] 洗脫液 成品 丙酮、氨水洗脫 ? OVER ? Thanks a lot 演講完畢，謝謝觀看！