核酸與核苷類藥物概述及合成工藝-展示頁
2025-01-13 00:41本頁面
【正文】 搗碎 1分鐘 ， 勻漿于 2500r／ pm離心 30分鐘 ， 沉淀用同樣體積的生理鹽水洗滌 3次 ， 每次洗后離心 ， 將沉淀懸浮于 20倍重量的冷生理鹽水中 ， 再搗碎 3分鐘 ， 加入 2倍量 5％ 的 （ 用 45%乙醇作溶劑 ） 十二烷基磺酸鈉 ， 并攪拌 2～ 3小時 ， 在 0℃ 2500r／pm離心 ， 在上層液中加入等體積的 冷 95％ 乙醇 ， 離心即可得到纖維狀 DNA， 再用冷乙醇和丙酮洗滌 ， 減壓低溫干燥得粗品 DNA。 RNA提取實例： [提取 ] [中和 ] HCl [酸化、沉淀 ]HCl 酵母 提取液 上清液 RNA NaOH、水 pH 離心 pH 、離心 二 、 DNA的提取與制備 ? 工業(yè)用 DNA的提取 取新鮮冷凍魚精 20kg， 用絞肉機粉碎 2次成漿狀 ， 加入等體積水 ， 攪拌均勻 ， 傾入反應(yīng)鍋內(nèi) ， 緩慢攪拌 ， 升溫至 100℃ ，保溫 15分鐘 ， 迅速冷卻至 20～ 25℃ ， 離心除去魚精蛋白等沉淀物 ， 獲得 35L含熱變性 DNA的溶液 ， 經(jīng)精確測定 DNA含量后直接可用于 酶法降解 生產(chǎn)脫氧核苷酸 。 用 6mol／ L HCl調(diào)至 pH7， 攪拌 15分鐘 ，離心得清液 255m1。 （ 3） RNA的提取實例： 啤酒酵母是提取 RNA的很好的資源 。 用苯酚處理生物材料 ， 使蛋白質(zhì)變性 ， 然后離心 ， 上層水溶液內(nèi)含有 全部RNA， 可用 乙醇沉淀 出來 。 濃鹽法： 是用 高濃度鹽溶液 （ 6%－ 8%） 處理 ， 同時 加熱 ，以 改變細胞壁的通透性 ， 使 核酸從細胞內(nèi)釋放出來 。 然后 除去菌體 ， 將 pH調(diào)至 RNA的 等電點 （ ） ， 使 RNA沉淀 出來 。 稀堿法： 是用 氫氧化鈉溶液 （ 1%） ， 使細胞壁變性 ， 使 核酸從細胞內(nèi)釋放出來 。 很顯然在許多酵母中 ， 早期細胞中的 RNA含量高 ， 其確切數(shù)值取決于 碳 、 氮比例 和培養(yǎng)基組成等 。 在菌體內(nèi) RNA含量的變化受培養(yǎng)基組成影響 ， 其中關(guān)鍵是銨離子濃度和磷酸鹽濃度 。 一些最常見的菌體含有豐富的核酸資源 ， 如酵母 、 白地霉 、 多種抗菌素的菌絲體 —— 青霉素 ， 制霉菌素等菌體 。 ? 核酸的含量與細胞大小無關(guān) ， 以生長旺盛的組織細胞中含量較多 ， 如動物胰臟 、 脾臟 、 胸腺 ， 植物的莖尖 、 根尖及各種分生組織等 。 二、核酸與核苷的一般理化性質(zhì) 核糖 （ 核糖 脫氧核糖 ） 核苷 嘌呤 （ 腺嘌呤 、 鳥嘌呤 ） 堿基 核酸 核苷酸 嘧啶 （ 胞 、 尿 、 胸腺嘧啶 ） （ DNA、 RNA） 磷酸 ? DNA和 RNA是存在于細胞中的正常成分 。 ? 后一類藥物是治療病毒感染性疾病、腫瘤的重要手段，也是產(chǎn)生干擾素、免疫抑制的臨床藥物。核酸與核苷類藥物概述及其合成工藝 第一節(jié)：概述 第二節(jié)：一些藥物的制備工藝 及原理 第三節(jié)：核酸與核苷類藥物制備舉例 第一節(jié) 概述 一、核酸與核苷類藥物 ? 核酸與核苷類藥物是指具有藥用價值的核酸、核苷酸、核苷或者堿基 ? 天然的、類似物、衍生物及其聚合物 ? 作用： ?影響生物的蛋白質(zhì)合成和脂肪、糖類的代謝 ?恢復正常代謝或干擾某些異常代謝 用途：放射病、血小板減少癥、白細胞減少癥、急慢性肝炎、心血管疾病和肌肉萎縮、腫瘤、病毒病 ? 核酸類物質(zhì)藥物一般可分為兩大類： ? 一類具天然結(jié)構(gòu)的核酸類物質(zhì)， ? 另一類是自然結(jié)構(gòu)堿基、核苷、核苷酸的結(jié)構(gòu)類似物或聚合物。 前者是生物體合成原料或蛋白質(zhì)、脂肪、糖生物合成與降解以及能量代謝的輔酶，這一類藥物有助于改善機體的物質(zhì)代謝和能量平衡，加速受損組織的修復，促使缺氧組織恢復正常生理機能，臨床上已廣泛使用于放射病、血小板減少癥、白細胞減少癥、急慢性肝炎、心血管疾病、肌肉萎縮等病癥的治療，包括肌苷、輔酶 A、 GTP、 CTP、UTP、 ATP、腺苷、輔酶 I、輔酶 Ⅱ 等，多數(shù)是生物體自身能夠合成的物質(zhì)，具有一定臨床功能，毒副作用小，基本都可經(jīng)微生物發(fā)酵或從生物資源中提取。 ? 正式用于臨床的抗病毒核苷類藥物有三氮唑核苷、疊氮胸苷、阿糖腺苷等。 ? DNA主要存在于細胞核中 ， 少量 （ 2%） 存在于線粒體和葉綠體中； ? RNA主要存在于細胞質(zhì)中 ， 少量 （ 10%） 存在于核仁 、 核漿和染色體中 。 第二節(jié) 一些藥物的制備工藝及原理 一 、 RNA的提取與制備 ? 工業(yè)用 RNA的提取 （ 1） RNA及其工業(yè)來源： 從微生物中提取 RNA是工業(yè)上最實際和有效的方法 。 通常在細菌中 RNA占 5％ ～ 25％ ， 在酵母中占 ％ ～ 15％ ， 在霉菌中占 %～ 28％ 。 培養(yǎng)酵母菌體收率高 ，
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