【正文】 重新校正儀器 注意： 關(guān)閉并斷開(kāi)電源 防止靜電損傷 日期時(shí)間顯示錯(cuò)誤 HPLC 常見(jiàn)故障因素（檢測(cè)器） 注意： 關(guān)閉并斷開(kāi)電源 防止靜電損傷 檢測(cè)器更換氘燈 氘燈 HPLC 常見(jiàn)故障因素（檢測(cè)器） 檢測(cè)器使用和維護(hù)的其它注意事項(xiàng) ? 不要擋住檢測(cè)器散熱風(fēng)扇和通風(fēng)孔 ? 不要隨意更改檢測(cè)器進(jìn)、出口管路 ? 長(zhǎng)時(shí)間停用檢測(cè)器時(shí)，應(yīng)在檢測(cè)池中充滿甲醇或乙腈， 必要時(shí)密封檢測(cè)器進(jìn)、出口管路 HPLC 常見(jiàn)故障因素（色譜柱連接） 優(yōu)質(zhì) 劣質(zhì) PEEK 接頭 PN: PSL 613315 √ X X 性能維護(hù)套件介紹 性能維護(hù)套件 LCP100 泵單向閥 性能維護(hù)套件介紹 流通池體積 :8μL 光程 :8mm LCUV100 紫外檢測(cè)器 流通池 性能維護(hù)套件介紹 性能維護(hù)套件 UV 檢測(cè)器氘燈 請(qǐng)使用正品部件 正品密封圈 非正品 密封圈 第二部分： 色譜柱常見(jiàn)故障診斷及維護(hù) 1. 常見(jiàn)問(wèn)題 基線噪音 可能的原因： 流動(dòng)池臟 檢測(cè)器燈有問(wèn)題 如果是周期性的，則起 源于泵的脈沖 溫度對(duì)檢測(cè)器的影響 氣泡經(jīng)過(guò)檢測(cè)器 Time (min.) 基線漂移 ? 梯度洗脫 ? 溫度不穩(wěn)定 (示差檢測(cè)器） ? 流動(dòng)相中有污染物 ? 柱中的流動(dòng)相沒(méi)有平衡 ? 體系中有污染物流出 可能的原因： 鬼 峰 鬼峰 ——即使 不進(jìn)樣也會(huì)出現(xiàn)的峰 20% 100% MeOH 沒(méi)有進(jìn)樣 60 15 30 15 0 3 7 15 17 問(wèn)題 1 流動(dòng)相臟 問(wèn)題 2 樣品過(guò)量 (也可能是回收率太差 ) 峰 型 雙 峰 柱 塌 陷 正 常 峰 雙 峰 柱中有死體積 過(guò)濾片部分堵塞 只有一個(gè)雙峰 ——組分的共洗脫 可能原因： 樣品與溶劑不匹配 峰 型 所有的峰都展寬 柱效降低 ——柱死體積 大進(jìn)樣量 / 質(zhì)量 高粘度流動(dòng)相 部分峰展寬 前次進(jìn)樣后流出的組分 大分子量樣品 ——蛋白或聚合物 峰展寬 樣品與流動(dòng)相不匹配 峰 型 拖尾峰 對(duì)稱(chēng)性 Normal Tailing Normal Tailing 原因： 部分峰拖尾 二次保留效應(yīng) ——?dú)埩艄璐蓟姆磻?yīng) 小峰緊跟在大峰的后面流出 柱頭有污染 金屬 所有峰拖尾 額外的柱效應(yīng) 柱損壞 不適當(dāng)?shù)臉悠妨?/溶劑 峰 型 正常峰 伸舌峰 前伸峰 不對(duì)稱(chēng)性 可能的原因 柱過(guò)載 在大峰前，有小峰流出 樣品溶劑不適當(dāng) 柱死體積 過(guò)濾片部分堵塞 峰 型 原因 ? 樣品的吸收比流動(dòng)相的吸收值低 ? 當(dāng)樣品組分通過(guò)色譜柱時(shí)打破了原來(lái)的平衡 ? 用示差檢測(cè)器時(shí)是正常的 寬 峰 柱外體積增加 * 在進(jìn)樣口到柱或柱到檢測(cè)器之間，使用細(xì)的短的連接管 * 保證所有的管路接頭都使用正確 * 用小體積檢測(cè)池 * 減少進(jìn)樣量 柱外體積效應(yīng)的影響 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 柱外體積 10 181。) 色譜柱需保存在有機(jī)溶劑中 (乙腈 ) 關(guān)于保留時(shí)間漂移的專(zhuān)題討論 保留時(shí)間不重現(xiàn) ? 保留時(shí)間不重現(xiàn)有兩種不同的情況： ? 保留時(shí)間漂移：保留時(shí)間僅沿單方向發(fā)生變化。溶于流動(dòng)相中的少量污染物可能慢慢富集到色譜柱上，從而造成保留時(shí)間的漂移。 保留時(shí)間不重現(xiàn)的因素與排除 三 、色譜柱污染 ? 保留時(shí)間漂移的另一個(gè)常見(jiàn)原因是色譜柱污染。可以通過(guò)使用固相提?。?SPE）等樣品前處理方法來(lái)去除樣品基質(zhì)的影響。 保留時(shí)間不重現(xiàn)的因素與排除 ? 四 、流動(dòng)相的組成 ? 流動(dòng)相組成的緩慢變化也是保留時(shí)間漂移的常