【正文】 的種屬與組織嗜性及復制的共性與特性 ； 研究 登革熱病毒 在蚊 細胞系中復制的順式作用元件 ， 確定它們在病毒 RNA復制過程中的作用。 4. 闡明宿主限制性因子在流感病毒感染、致病及跨種屬感染中的作用及分子機制；闡明漢坦病毒感染后大量包涵體形成的分子機制及免疫病理意義；闡明機體中樞神經系統(tǒng)對狂犬病病毒的固有免疫機制和狂犬病病毒對中樞神經系統(tǒng)的致病機制 5. 發(fā)表論文 25 篇以上。 3. 獲得重組表達的受體蛋白；闡明病毒囊膜蛋白與受體直接的相互作用能力 。 6. 通過轉基因技術獲得流感病毒體內分布實時監(jiān)測動物模型； 通過細胞學和動物學實驗，初步闡明新型病毒嗜神經性相關毒力位點的作用機制 7. 發(fā)表研究論文 20 篇以上 研究內容 預期目標 第 四 年 1. 研究新型病毒的受體及其跨種物種感染的分子機理研究； 分析我國漢坦腎出血熱疾病主要疫區(qū)疾病流行情況與病毒遺傳變異的關系；檢測犬流感病毒的流行情況。 2. 繼續(xù)進行病毒分子流行病學的調查與研究，分析病毒的進化和變異規(guī)律；利用構建的反向遺傳操作技術平臺，研究病毒基因點變異、基因突變、基因重配等對病毒致病性和傳播性的影響，重點探討影響病毒傳播特性尤其是跨種間傳播特性的關鍵因子或因素。 追蹤宿主限制性因子與病毒核蛋白相互作用后對病毒復制、裝配及成熟釋放的影響和生物學意義 。 4． 對病毒目的基因進行定點突變，觀察病毒突變株和野生株對不同宿主細胞及不同組織來源細胞中復制能力的差別，尋找決定病毒在不同種屬宿主細胞中復制的關鍵位點。 技術路線： 詳見流程圖（圖 1）。 解析 流感病毒聚合酶基因突變 、插入、缺失等 對病毒 復制和致病性 的影響。 項目名稱： 重要病毒跨種間感染與傳播致病的分子機制研究 首席科學家： 高福 中國科學院微生物研究所 起止年限： 至 依托部門： 中國科學院 二、預期目標 總體目標 本項目根據 國家新發(fā)人類傳染病 防治上的 戰(zhàn)略需求 ，聚焦國際上病毒病研究的 前沿 ，立足于我國重要病毒性傳染病 發(fā)生與 流行 的現狀 ，選擇 新型 冠狀病毒、 乙腦病毒、登革病毒、狂犬病毒 和 流感 病毒 等 對我國具有嚴重危害或潛在危害的代表性病毒為主要 研究對象，運用病毒學、分子生物學 、細胞生物學 和結構生物學等 現代生命科學技術 手段， 揭示重要病毒尤其是新型病毒在動物宿主中的生態(tài)分布特征； 解析 病毒 基因 變異和進化規(guī)律 ，闡明 病毒跨種間感染 與致病的 分子基礎 ，在病毒跨種間傳播研究基礎理論方面有突破，進一步推動我國在該領域的研究達到國際先進水平， 為我國新發(fā)傳染病的防治提供科學支撐 。 解析重要病毒在不同宿主細胞中的復制機制 利用現代生命組學等技術解析新型 冠狀病毒 、乙型腦炎 病毒 等基因組復制、轉錄、表達以及組裝的機理，弄清病毒蛋白在 不同宿主細胞復制過程中 的作用基礎；解析 病毒在不同宿主細胞復制過程中病毒及宿主細胞 MicroRNA表達譜改變，以及 MicroRNA 表達譜對不同病毒復制轉錄的影響與結構基礎 ，探討 病毒感染的種屬與組織嗜性及復制的共性與特性 ； 鑒定 出 和登革熱病毒 的蚊子細胞蛋白因子，確定它們在病毒 RNA復制過程中的作用。 通過本項目 實施 ， 造就 一支在病毒 跨種間傳播 研究領域具有國際競爭力的優(yōu)秀團隊， 在新發(fā)傳染病發(fā)生機制研究方面取得重大突破， 為 國家 應對突發(fā)公共衛(wèi)生事件、構筑 公共安全體系、保障人民健康提供 理論依據和 技術支撐。 3． 獲得不同基因型的乙型腦炎病毒、登革病毒、流感病毒囊膜蛋白；獲得部分囊膜蛋白的晶體結構。 4. 流感病毒在不同宿主中的復制及跨種屬傳播機制；冠狀病毒在不同宿主中的復制及跨種屬傳播機制；登革病毒在不同宿主中的復制及跨種屬傳播機制；病毒在不同組織中復制的 miRNA表達譜對病毒復制的調控及分子機制； 5. 運用蛋白 蛋白互作以及病毒學方法探索宿主限制性因子在流感病毒復制過程中的調控機制 。 7. 發(fā)表研究論文 20 篇以上 研究內容 預期目標 第 三 年 1. 對檢測為陽病毒性的進行病毒分離培養(yǎng)；開展新分類病毒的細胞和動物敏感性實驗，評價病毒的宿主范圍和對實驗動物的致病能力 。 5. 深入闡明宿主限制性 因子在流感病毒及漢坦病毒復制過程中的調控機制；篩選出 12 個與狂犬病病毒相互作用的宿主限制性因子 。 2. 豐富病毒毒株庫和基因 庫；闡明新型病毒的基因和生物學特點；確定病毒非編碼區(qū)的功能位點。 3. 獲得病毒囊膜蛋白與受體復合體的晶體結構，闡明病毒與受體的相互作用機制，揭示病毒跨種間傳播機制 。并利用反向遺傳學技術包裝病毒，在細胞及動物水平評價 病毒的變異對宿主嗜性及致病力的影響，以此揭示病毒跨種間的傳播機制