【正文】 14天 )內(nèi)所發(fā)生的 毒性效應(yīng) ，包括一般行為、外觀改變、大體形態(tài)變化以及死亡效應(yīng)。 ?② 動(dòng)物易于獲得 ?③ 品系純化 ?④ 價(jià)格較低和易于飼養(yǎng)等條件 。如果在預(yù)試驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn)化學(xué)毒物 (如農(nóng)藥 )對(duì)雌、雄動(dòng)物毒效應(yīng)的敏感性有明顯差異，則應(yīng)單獨(dú)分別求出雌性與雄性動(dòng)物各自的 LD50。 LD50的計(jì)算方法常用寇氏法 、 概率單位法 、 霍思法等 。例如幾率單位法、寇氏法一般設(shè) 6～ 10個(gè)劑量組；霍恩法固定設(shè) 4個(gè)劑量組。 急性毒性作用 二、急性毒性試驗(yàn) ? （五）試驗(yàn)周期與毒效應(yīng)觀察 : ? : ?急性毒性試驗(yàn)中，對(duì)死亡的動(dòng)物均應(yīng)及時(shí)進(jìn)行大體解剖和病理組織學(xué)檢查，肉眼觀察主要臟器的大體病理變化，如臟器大小、外觀、色澤的變化，有無(wú)充血、出血、水腫或其它改變，對(duì)有改變的臟器進(jìn)行取材做組織病理學(xué)檢查。但是，當(dāng)化學(xué)毒物反復(fù)多次給動(dòng)物染毒，化學(xué)毒物進(jìn)入機(jī)體的速度 (或總量 )超過(guò)代謝轉(zhuǎn)化的速度和排泄的速度 (或總量 )時(shí)，化學(xué)毒物或其代謝產(chǎn)物就有可能在機(jī)體內(nèi)逐漸增加并貯留，這種現(xiàn)象稱為化學(xué)毒物的 蓄積作用 (accumulation)。但若接觸劑量已累積達(dá)到 5個(gè) LD50劑量，也可終止試驗(yàn)。 蓄積作用及其評(píng)價(jià) 二、蓄積毒性試驗(yàn)方法及其評(píng)價(jià) (二 )生物半減期法： 生物半減期 (biological halflife， t1/2)法是用毒物動(dòng)力學(xué)原理描述化學(xué)毒物在機(jī)體內(nèi)的蓄積作用 。 慢性毒性 (chronic toxicity)是指人或?qū)嶒?yàn) 動(dòng)物長(zhǎng)期 (甚至終生 )反復(fù)接觸低劑量的化 學(xué)毒物所產(chǎn)生的毒性效應(yīng)。 。 即使化學(xué)毒物以相等的時(shí)間間距恒速地吸收入血液 ， 該物質(zhì)在一定劑量范圍內(nèi)在機(jī)體的蓄積量也不呈直線無(wú)限地增加 ， 而是呈曲線形上升并有一定的極限 。一般來(lái)說(shuō)，在試驗(yàn)第 2l天也可結(jié)束試驗(yàn)，因?yàn)檫@之前如果動(dòng)物沒(méi)有死亡或死亡數(shù)不足一半，說(shuō)明其累積劑量已達(dá) ，即 K＞ 5。 ?蓄積毒性試驗(yàn)是研究化學(xué)毒物基礎(chǔ)毒性的重要內(nèi)容之一 ， 目的是通過(guò)試驗(yàn)求出蓄積系數(shù)K， 了解化學(xué)毒物蓄積毒性的強(qiáng)弱 ， 并為慢性毒性試驗(yàn)及其他有關(guān)毒性試驗(yàn)的劑量選擇提供參考 。根據(jù)試驗(yàn)需要可進(jìn)一步擴(kuò)大觀察項(xiàng)目．如體溫、心電圖、腦電圖或進(jìn)行某些生化指標(biāo)測(cè)定等。 1 2 3 4 5 6 ?LgLD0 LgLD0+i LgLD0+2i LgLD0+3i LgLD0+4i ??? 急性毒性作用 二、急性毒性試驗(yàn) ? （ 五）試驗(yàn)周期與毒效應(yīng)觀察 ? 急性毒性作用 二、急性毒性試驗(yàn) ? （五）試驗(yàn)周期與毒效應(yīng)觀察 : ?在觀察試驗(yàn)動(dòng)物中毒癥狀的過(guò)程中，應(yīng)同時(shí)觀察體重的變化。 急性毒性作用 二、急性毒性試驗(yàn) ? （四）染毒劑量與分組 : ?2． 預(yù)試驗(yàn) ?① 設(shè)定以此預(yù)期值作為待測(cè)化學(xué)物的中間劑量組 ， 并在該劑量的上下各設(shè)計(jì) l一2個(gè)劑量組作為預(yù)試驗(yàn)劑量 。 急性毒性作用 二、急性毒性試驗(yàn) ? ： ? 大、小鼠等小動(dòng)物 每組 10只 ? 狗等大動(dòng)物 每組 6只 ? 分組原則 —— 隨機(jī)化原則 ? ： ? 經(jīng)消化道染毒時(shí)，要求試驗(yàn)前對(duì)動(dòng)物禁食 ? 大鼠、小鼠 —— 隔夜進(jìn)食；染毒后禁食 4h ? 大動(dòng)物 —— 每日上午喂食前染毒 ? 染毒后繼續(xù)禁食 2~4h，但在禁食時(shí)要保障飲水。 ?急性皮膚毒性試驗(yàn)可選用成年大鼠 、 豚鼠或家兔 ， 優(yōu)先考慮白色家兔 。 ? ② 并通過(guò)觀察動(dòng)物中毒表現(xiàn)和死亡的情況 ， 了解急性毒作用性質(zhì) 、 可能的靶器官和致死原因 ， 提供化學(xué)毒物的急性中毒資料 、 初步評(píng)價(jià)對(duì)人體產(chǎn)生損害的危險(xiǎn)性 。一些能引起代謝低下、體溫下降的毒物，在低溫條件下毒性作用增加。 化學(xué)物 A 效應(yīng) B 化學(xué)物B 效應(yīng)A 靶B 靶A ③ 協(xié)同作用 (synergistic effect) ? 多種化學(xué)物 同時(shí)存在 時(shí)的毒效應(yīng) 超過(guò) 各單個(gè)化學(xué)物 分別作用 時(shí)毒物效應(yīng)的總和。 （三）氣壓： 一、氣象條件 二、季節(jié)或晝夜節(jié)律 表 不同種屬的晝夜、季節(jié)節(jié)律 種屬 試 劑 給藥時(shí)間 毒作用表現(xiàn) 小鼠 苯巴比妥 2:00 Pm 睡眠時(shí)間最長(zhǎng) 2:00 Am 睡眠時(shí)間最短 人 水楊酸 8:00 Am 排出速度慢，體內(nèi)停留時(shí)間長(zhǎng) 8:00 Pm 排出速度快，體內(nèi)停留時(shí)間短 大鼠 苯巴比妥鈉 春 季 睡眠時(shí)間最長(zhǎng) 秋 季 睡眠時(shí)間最短 第四節(jié) 化學(xué)物的聯(lián)合作用 （ joint action ） ? 兩種以上化學(xué)物同時(shí)或先后作用于機(jī)體時(shí)產(chǎn)生的交互毒性 作用。 高等生物體內(nèi)還有一類重要蛋白質(zhì)就是受體蛋白 ， 它是毒作用的靶分子 ， 不同毒物作用于不同的受體上 。 如小鼠每克肝臟的細(xì)胞色素氧化酶活性為 141活性單位 ， 大鼠為 84， 兔為 22。一般認(rèn)為，接觸化合物吸收速度和毒性大小的順序是：靜脈注射 腹腔注射肌肉注射 ?經(jīng)口 經(jīng)皮。 相對(duì)毒性 : 將物質(zhì)的揮發(fā)度估計(jì)在內(nèi)的毒性稱為 相對(duì)毒性 。顆粒越小分散度越大，比表面積越大，生物活性也越強(qiáng) 。 分子飽和度 碳原子數(shù)相同時(shí)，不飽和鍵增加其毒性增加，如乙烷的毒性 乙烯的毒性 乙炔的毒性。毒性作用出現(xiàn)的性質(zhì)和強(qiáng)度主要受四個(gè)方面的影響： 化學(xué)物因素 毒物與機(jī)體所處的環(huán)境條件 機(jī)體因素 化學(xué)物的聯(lián)合作用 第一節(jié) 化學(xué)物因素 化 學(xué) 結(jié) 構(gòu) 理 化 特 性 不 純 物 含 量 化學(xué)物的穩(wěn)定性 毒物進(jìn)入機(jī)體的途徑 一、化學(xué)結(jié)構(gòu) 化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu) 化合物的理化性質(zhì) 化合物的化學(xué)活性 化合物的 生物活性 ? 取代基的影響 ? 異構(gòu)體和立體構(gòu)型 ? 同系物的碳原子數(shù)和結(jié)構(gòu)的影響 ? 分子飽和度 ? 與營(yíng)養(yǎng)物和內(nèi)源性物質(zhì)的相似性 一、 化學(xué)結(jié)構(gòu) H H H H H H