雙染法檢測細胞凋亡(完整版)
【正文】 細胞應(yīng)可分成三個亞群：活細胞僅有很低的熒光強度，凋亡細胞有較強的綠色熒光，壞死細胞（包括極晚期凋亡細胞）有綠色和紅色熒光雙重染色。5. 加入10ul PI 后輕輕混勻于28176。 今天用Annexin VEGFP/PI雙染法檢測樹突狀細胞的凋亡情況，存有下面幾個問題： 正式上樣檢測時應(yīng)該從對照管開始，也就是說前面用作儀器條件調(diào)試的還要重新走樣。 在正常細胞中，磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine, PS）位于細胞膜的內(nèi)側(cè)，但在細胞凋亡的早期，PS 可從細胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細胞膜的表面，暴露在細胞外環(huán)境中。C 避光條件下孵育5分鐘。使用流式細胞儀正確分析Annexin VEGFP/PI 雙染的細胞前要求儀器的熒光補償來去除兩種染料激發(fā)光之間的疊加。2. 建立LogFL1LogFL2（最好用FL3）雙參數(shù)點圖并分析以上光散射圖中設(shè)門的細胞；保證98%的細胞處于在X、Y 軸Log 1 為邊界的左下象限中心區(qū)域。如果這個調(diào)節(jié)沒有有效地去除FL1 的陽性信號，此時要降低FL1 PMT 的電壓。將垂直的FL1 標尺設(shè)定在緊靠Annexi
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