1-微生物保藏及基本操作技術(shù)(完整版)
【正文】 護劑至冷凍管） 保藏（ 80℃ ， 2～ 5年） 醫(yī)療器械無菌檢驗員操作實務(wù)與潔凈室管理，北京， 2023 80℃ 冰箱凍結(jié)法 ? 使用方便； ? 保藏時間較長； ? 對設(shè)備要求高 (80℃ 冰箱 )； ? 運輸不方便。 醫(yī)療器械無菌檢驗員操作實務(wù)與潔凈室管理，北京， 2023 ? 原位低溫保藏技術(shù) 有些菌種不可培養(yǎng)，也無法采用標準的冷凍干燥技術(shù)保藏，如一些致病菌、無法培養(yǎng)的菌種或者與其他微生物共生的菌種（如菌根真菌）等。 對于 1微米直徑的純凈水滴，只有當冷卻速率高達 107℃/ 秒時才能實現(xiàn) “ 玻璃化 ” 。 31 2023版中國藥典 《 藥品微生物實驗室規(guī)范指導(dǎo)原則 》 醫(yī)療器械無菌檢驗員操作實務(wù)與潔凈室管理，北京， 2023 國內(nèi)認可的菌種收藏機構(gòu) ? 1979年 7月，全國第一屆菌種保藏管理會議正式成立中國菌種保藏管理委員會（ CCCCM），委員會下設(shè) 7個全國性菌種保藏管理中心及機構(gòu)所在地： ? 普通微生物菌種保藏管理中心（ CCGMC） , 中國科學(xué)院微生物研究所 ? 農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心（ ACCC） ,中國農(nóng)科院區(qū)劃所 ? 工業(yè)微生物菌種保藏管理中心（ CICC），中國食品發(fā)酵工業(yè)研究院 ? 醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理中心（ CMCC），中國藥品生物制品鑒定所 ? 抗菌素菌種保藏管理中心（ CACC），中國醫(yī)科院醫(yī)用生物技術(shù)研究所 ? 獸醫(yī)微生物菌種保藏管理中心（ CVCC），農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)藥品監(jiān)察所 ? 林業(yè)微生物菌種保藏管理中心（ CFCC），中國林業(yè)科學(xué)院 醫(yī)療器械無菌檢驗員操作實務(wù)與潔凈室管理，北京， 2023 國認外可的菌種收藏機構(gòu) ? 世界菌種保藏聯(lián)合會 WFCC (World Federation Of Culture Collection)全球注冊的菌種保藏機構(gòu) 583家 ? ATCC ? NRRL ? DSMZ ? NCTC ? CMI ? CBS ? NBRC(IFO) ? JCM 醫(yī)療器械無菌檢驗員操作實務(wù)與潔凈室管理，北京， 2023 菌株代數(shù) 美國藥典（ USP）中規(guī)定： “ 將微生物接種至一新鮮培養(yǎng)基上 /內(nèi)，每萌發(fā)一次即稱為一代， ” 并規(guī)定 “ 菌種的傳代次數(shù)（自原始菌種凍干粉起）不得超過 5代 ” 。 Teliospores : Puccinia spp。 醫(yī)療器械無菌檢驗員操作實務(wù)與潔凈室管理，北京， 2023 操作步驟 ? 冷凍管準備 ? 保護劑制備 ? 保藏培養(yǎng)物準備 ? 預(yù)凍 — 將程序降溫系統(tǒng)預(yù)冷到 4℃ ，將制備好的冷凍管放入其中，以 1℃ /min降溫速率降至 35℃ ； — 使用程序降溫盒。 醫(yī)療器械無菌檢驗員操作實務(wù)與潔凈室管理，北京， 2023 真空干燥 ? 在開動真空泵后應(yīng)使真空度在 15min內(nèi)達到 ， 隨后逐漸達到 ～ ， 在此條件下 ， 樣品將保持凍結(jié)狀態(tài) ， 其中水分則不斷升華 ， 干燥才能順利地進行
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