微生物工程第2章發(fā)酵菌種選育(完整版)
【正文】 菌素 C產(chǎn)生菌后 ， 該菌在發(fā)酵過(guò)程中氧耗明顯下降 ，且有效增加了頭孢菌素 C的產(chǎn)量 。 目前應(yīng)用基因工程方法生產(chǎn)的這類藥物已投放市場(chǎng)的有胰島素、干擾素、人生長(zhǎng)激素、白介素 促紅細(xì)胞生長(zhǎng)素、腫瘤壞死因子、人心鈉素、表皮生長(zhǎng)因子等。 阻遏 :是阻止酶的合成，又有反饋?zhàn)瓒?、分解代謝物阻遏等。 （一）、自然選育 不經(jīng)過(guò)人工處理，利用菌種的自然突變而進(jìn)行菌種篩選的過(guò)程叫做自然選育。 （五）培養(yǎng)分離 ? 盡管通過(guò)增殖培養(yǎng)效果顯著 ， 但還是處于微生物的混雜生長(zhǎng)狀態(tài) 。 這樣對(duì)下階段的純種分離就會(huì)順利得多 。 極端環(huán)境和特殊的生態(tài)環(huán)境 : 細(xì)菌 ,放線菌和酵母菌 從自然界篩選 ? 采樣季節(jié)：對(duì)細(xì)菌和放線菌以溫度適中 ， 雨量不多的秋初為好 。 ? 增殖： 人為地通過(guò)控制養(yǎng)分或培條件 ， 使所需菌種增殖培養(yǎng)后 ， 在數(shù)量上占優(yōu)勢(shì) 。 ? 有了優(yōu)良的菌種，還要有合適的工藝條件和合理先進(jìn)的設(shè)備與之配合。 富含碳水化合物的土壤和沼澤地中，酵母和霉菌較多 。 用 4ml/L的氨水處理后，再用 2mg/L的氯處理樣品，分離得到了游動(dòng)放線菌 。 反應(yīng)特性： 如分離蛋白酶，在不溶性蛋白的平板上可產(chǎn)生一清晰的透明圈，透明圈的大小可作為選擇的依據(jù)。 菌種篩選時(shí)應(yīng)考慮的一些重要指標(biāo)： 菌的營(yíng)養(yǎng)特性 菌的生長(zhǎng)溫度 菌對(duì)生產(chǎn)設(shè)備和生產(chǎn)過(guò)程的適應(yīng)性 菌種的穩(wěn)定性 容易從發(fā)酵液中提取產(chǎn)物 產(chǎn)物的得率高 （七）毒性試驗(yàn) ? 自然界的一些微生物是在一定條件下產(chǎn)毒的 ，將其作為生產(chǎn)菌種應(yīng)當(dāng)十分當(dāng)心 ， 尤其與食品工業(yè)有關(guān)的菌種 ， 更應(yīng)慎重 。 酶的調(diào)節(jié)分為： 酶合成的調(diào)節(jié) 酶活性的調(diào)節(jié) 酶合成的調(diào)節(jié)： 誘導(dǎo)： 只有在有誘導(dǎo)物存在的時(shí)候，酶才能合成，這樣的酶稱為 誘導(dǎo)酶 。 原生質(zhì)體融合 簡(jiǎn)要說(shuō)明： 金色鏈霉菌，四環(huán)素發(fā)酵單位 1400017000?g/ml 淡紅鏈霉菌（正定變種1482），柔紅霉素發(fā)酵單位 6080?g/ml 原生質(zhì)體 原生質(zhì)體 原生質(zhì)體融合 再生、篩選 得到 PF25菌株，柔紅霉素發(fā)酵單位 250300?g/ml 阿克拉霉素產(chǎn)生菌（鏈霉菌） 誘 變 突變株 A 不合成阿克拉霉素，但合成阿克拉霉素前體的類似物和 2－ hydroxyaklacinoe 突變株 B 不合成阿克拉霉素，也不合成阿克拉霉素前體的類似物，但能在 2－ hydroxyaklacinoe上 接上糖苷 原生質(zhì)體融合 融合子產(chǎn)生 2－羥基阿克拉霉素 用原生質(zhì)體技術(shù)提高發(fā)酵單位的例子 產(chǎn)物 性質(zhì) 菌種 增產(chǎn)效果 西索米星 硫鏈絲菌肽 碳青霉烯 麥迪霉素 慶大霉素 頭霉素 C 巴龍霉素 種內(nèi) 種內(nèi) 種內(nèi) 種內(nèi) 種間 屬間 種內(nèi) 種內(nèi) 種間 Micromonospora ingoensis 運(yùn)青鏈霉菌 灰色鏈霉菌 生米卡鏈霉菌 生米卡鏈霉菌 /灰色鏈霉菌 小單孢菌 /灰色鏈霉菌 小單孢菌 Nocardia lactamdurans 鏈霉菌 /弗氏鏈霉菌 10－ 15％ 2倍 10倍 40％ 5倍 58％ 52％ 15％ 5－ 6倍 原生質(zhì)體融合技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)： （ 1）、去除細(xì)胞壁的障礙，親株基因組直接融合、交換和實(shí)現(xiàn)重組，不需要有已知的遺傳操作系統(tǒng) （ 2）、原生質(zhì)體融合后，兩親株的基因組之間有機(jī)會(huì)發(fā)生多次交換，產(chǎn)生各種各樣的基因組合而得到多種類型的重組子 （ 3）、重組頻率特別高 （ 4）、可以和其它育種方法相結(jié)合 （ 5）、可以用藥物、溫度、紫外線鈍化親株的一方，然后再進(jìn)行融合，這樣可以提高篩選的效率 （ 6）、原生質(zhì)體融合并不局限于種內(nèi)，還可以進(jìn)行種間和屬間的原生質(zhì)體融合 （五）、基因工程技術(shù) 無(wú)論用什么方式獲得的 DNA分子，插入到任何載體（包括病毒、細(xì)菌的質(zhì)?；蛘呓湍福怪纬蛇z傳物質(zhì)的新組合（即重組 DNA分子），再將它們轉(zhuǎn)移到一種原來(lái)并不含有這樣新組合的宿主細(xì)胞中去，使宿主細(xì)胞獲得新的遺傳信息并穩(wěn)定遺傳下去，成為新型生物。 如克隆氨基糖苷 δ ’ 乙酰轉(zhuǎn)移酶基因 ， 再轉(zhuǎn)入卡那霉素和新霉素產(chǎn)生菌中 ， 結(jié)果使菌種自身對(duì)氨基糖苷類抗生素的抗性增加 ， 使卡那霉素和新霉素的產(chǎn)量提高了 2～ 6倍 。這是因?yàn)橐坏┎蓸咏Y(jié)束，試樣中的微生物群體就脫離了原來(lái)的生態(tài)環(huán)境，其內(nèi)部生態(tài)環(huán)境就會(huì)發(fā)生變化，微生物群體之間就會(huì)出現(xiàn)消長(zhǎng) 1．土樣采集方法 ? 森林 、 旱地 ， 草地可先掘洞 ， 由土壤下層向上層順序采集； ? 水田等浸水土
數(shù)學(xué)相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1