基因重組-生物合成概念(完整版)
【正文】 要求不同,可以將狹義的基因重組分為三種類型,即同源重組、位點(diǎn)特異性重組和異常重組。高等動(dòng)植物中的基因重組通常在有性生殖過(guò)程中進(jìn)行，即在性細(xì)胞成熟時(shí)發(fā)生減數(shù)分裂時(shí)同源染色體的部分遺傳物質(zhì)可實(shí)現(xiàn)交換，導(dǎo)致基因重組。來(lái)自供體的目的基因被轉(zhuǎn)入受體細(xì)菌后,可進(jìn)行基因產(chǎn)物的表達(dá),從而獲得用一般方法難以獲得的產(chǎn)品,如胰島素、干擾素、乙型肝炎疫苗等是通過(guò)以相應(yīng)基因與大腸桿菌或酵母菌的基因重組而大量生產(chǎn)的?！ “l(fā)生在生物體內(nèi)基因的交換或重新組合?；蛑亟M也歸類為自然突變現(xiàn)象。自然界中轉(zhuǎn)導(dǎo)現(xiàn)象較普遍，可能是低等生物進(jìn)化過(guò)程中產(chǎn)生新的基因組合的一種基本方式?！ 膹V義上講,任何造成基因型變化的基因交流過(guò)程,都叫做基因重組。它的發(fā)生依賴于小范圍的DNA同源序列的聯(lián)會(huì),重組也只限于這個(gè)小范圍。減數(shù)分裂可能發(fā)生基因重組。（3）為長(zhǎng)期和短期的貯藏，進(jìn)行必要的合成。 質(zhì)粒是真核細(xì)胞細(xì)胞核外或原核生物擬核區(qū)外能夠進(jìn)行自主復(fù)制的遺傳單位，包括真核生物的細(xì)胞器（主要指線粒體和葉綠體）中和細(xì)菌細(xì)胞擬核區(qū)以外的環(huán)狀脫氧核糖核酸(DNA)分子。根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小，大致上可以把質(zhì)粒分成大小兩類：較大一類的相對(duì)分子質(zhì)量是40106以上，較小一類的相對(duì)分子質(zhì)量是10106以下(少數(shù)質(zhì)粒的相對(duì)分子質(zhì)量介于兩者之間)。 在基因工程中，常用人工構(gòu)建的質(zhì)粒作為載體。pSC101與pBR322相似，只是沒(méi)有抗氨芐青霉素基因和PstI切點(diǎn)。3種限制酶即ScaI、PvuI和PstI的識(shí)別位點(diǎn)位于氨芐青霉素抗性基因內(nèi)，在這些位點(diǎn)插入外源DNA則會(huì)導(dǎo)致ampr基因的失活。很顯然，既要指示外源DNA是否進(jìn)入了宿主細(xì)胞，又要指示載體DNA分子中是否插入了外源DNA片段，那么這種載體必須至少具有兩個(gè)標(biāo)記基因。 將水稻葉綠體的DNA，用EcoRI核酸限制性內(nèi)切酶消化之后，放入含有溴化乙錠的低熔點(diǎn)（LMP）的1%瓊脂糖凝膠中作電泳分離。由于有了lac操縱子的控制，重組基因產(chǎn)生的蛋白質(zhì)的調(diào)節(jié)就變得比較容易了。然后，將混合物轉(zhuǎn)化到大腸桿菌5346菌株，培養(yǎng)在氨芐青霉素選擇平板上，形成Ampr轉(zhuǎn)化子菌落群體?！ BR322質(zhì)粒載體的構(gòu)建 pBR322質(zhì)粒載體的構(gòu)建過(guò)程可簡(jiǎn)單地概括如下： 由于pBR322質(zhì)粒的親本之一是pMB1質(zhì)粒，故首先以pMB1為基礎(chǔ)，引入Rldrd19質(zhì)粒的Tn3易位子，； pMB3的分子量顯然使得它不適合作為載體，所以要通過(guò)在EcoRI活性條件下的消化讓它大部分的無(wú)用片段失去，留下來(lái)的小片段的DNA的黏性末端連接起來(lái)后就形成了pMB8質(zhì)粒（）； 此時(shí)，另外一種pSC101質(zhì)粒在EcoRI活性條件下消化產(chǎn)生了含有tetr抗性的DNA片斷，這個(gè)片斷和pMB8整合在一起就形成了pMB9質(zhì)粒（）。經(jīng)驗(yàn)表明，為了
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