【正文】 餾水中，用玻璃棒轉(zhuǎn)移到容量瓶中，定容至100mL，搖勻后備用。⑦ 萃取工藝成本低，綜合經(jīng)濟(jì)效益顯著。⑶ 空化效應(yīng)當(dāng)空穴閉合或微泡破裂時，會使介質(zhì)局部形成幾百到幾千K的高溫和超過數(shù)百個大氣壓的高壓環(huán)境，并產(chǎn)生很大的沖擊力，起到激烈攪拌的作用，同時生成大量的微泡，這些微泡又作為新的氣核，使該循環(huán)能夠繼續(xù)下去，這就是空化效應(yīng)。頻率范圍在15~60kHz的超聲，常被用于過程的強(qiáng)化和引發(fā)化學(xué)反應(yīng)。孫振華等[9,10]研究表明, 穿心蓮內(nèi)酯與硫酸氫鈉制備的蓮必治注射液(LBZ)在體外研究與動物實驗對胃癌、肝癌、肺癌、乳癌等有明顯的抗癌作用。為進(jìn)一步揭示穿心蓮藥理活性的物質(zhì)基礎(chǔ)，王國才等[3]對穿心蓮葉進(jìn)行較為系統(tǒng)的研究。結(jié)果表明，超聲波提取的最佳工藝條件為：在60℃下，以乙酸乙酯為溶劑，料液比為1:30，功率為140w，超聲提取60min。關(guān)鍵詞：穿心蓮內(nèi)酯。研究發(fā)現(xiàn)，穿心蓮藥材的主要化學(xué)成分是二萜內(nèi)酯類化合物，除分離得含量較高的穿心蓮內(nèi)酯、新穿心蓮內(nèi)酯、脫氧穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯外，還從中分離出6個化合物。其抗腫瘤的機(jī)制,可能與誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡、抑制細(xì)胞周期、提高淋巴細(xì)胞抗腫瘤活性等方面有關(guān)[11]。超聲波的產(chǎn)生原理是產(chǎn)生所需頻率的電震蕩，再轉(zhuǎn)換成機(jī)械振蕩?？栈?yīng)產(chǎn)生的極大壓力造成被粉碎物細(xì)胞壁及整個生物體的破碎，且整個破碎過程瞬間完成，提高了破碎速度，縮短了破碎時間，使提取效率顯著提高。 超聲波提取設(shè)備主要由提取槽、超聲波發(fā)生器和電源等部分組成。⑶ 60%的乙醇溶液：取實驗室的無水乙醇60mL，放入100 mL容量瓶中，向容量瓶中加水至刻度線，搖勻后備用。正交試驗法的原理，我們以23型全面試驗為例進(jìn)行說明。穿心蓮內(nèi)酯為不吸收可見光的無色物質(zhì)，與3,5二硝基苯甲酸的堿性實際發(fā)生顯色反應(yīng)，反應(yīng)液呈紫紅色，故可用分光光度計來測量穿心蓮內(nèi)酯含量。 實驗步驟 含量測定方法⑴ 對穿心蓮內(nèi)酯對照品溶液()進(jìn)行最大吸收波長掃描，后得出穿心蓮內(nèi)酯的最大吸收波長在226nm處，與參考文獻(xiàn)比較后結(jié)果相近，所以選擇此波長為穿心蓮內(nèi)酯的測試波長。曲線以穿心蓮內(nèi)酯濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)。震蕩結(jié)束后依次抽濾，再加入活性碳30℃水浴10min脫色，抽濾，取濾液標(biāo)號，將所有濾液用75%乙醇定容至250mL。以反應(yīng)溫度45℃時，對超聲震蕩時間、超聲功率、料液比、提取溶劑這4個因素進(jìn)行3水平4因素L9(34)正交試驗，所得濾液用75%乙醇定容至250mL，在最大吸收波長226nm處測吸光度，找出穿心蓮內(nèi)酯提取的最佳工藝條件。穿心蓮內(nèi)酯與吸光度的回歸方程為Y=，R2=。表47 正交試驗方案與結(jié)果試驗號A(min)B(w)CD吸光度111112122231333421235223162312731328321393321K1K2K3k1k2k3R主次D B AC優(yōu)組合A2B3C3D2 驗證實驗結(jié)果 按照穿心蓮內(nèi)酯的最佳提取工藝做了三組平行試驗，得出如下數(shù)據(jù)。此處通過改變75%乙醇的是使用量來確定最佳的料液比。穿心蓮內(nèi)酯是二萜內(nèi)酯類化合物，由相似相容原理可知，內(nèi)酯類易溶于有機(jī)溶劑，水是無機(jī)物，提取效果所以最差。綜上所述，根據(jù)實驗結(jié)果與分析，確定了穿心蓮內(nèi)酯提取的最佳工藝條件為A2B3C3D2，即用乙酸乙酯為提取溶劑，且料液比為1:30，在功率140w、溫度60℃時提取60min。 展望穿心蓮是一味常用中藥，在我國分布廣泛。提取分離方法多樣，有醇提法、水提法、NaOH水溶液提取法、微波和超聲波輔助提取法。隨著對其藥理作用及其機(jī)制以及結(jié)構(gòu)修飾的深入研究, 將極大地促進(jìn)穿心蓮內(nèi)酯類新藥的研究和開發(fā)。穿心蓮中化學(xué)成分眾多，各個成分又有相對治療的病癥。 5 總結(jié)與展望 總結(jié)⑴ 對穿心蓮內(nèi)酯對照品溶液進(jìn)行最大吸收波長掃描，后得出穿心蓮內(nèi)酯的最大吸收波長在226nm處，與參考文獻(xiàn)[17]比較后結(jié)果相同，所以選擇此波長為穿心蓮內(nèi)酯的測試波長。由圖表可以看出，在溫度增大的同時，吸光度值也呈增大趨勢，在55～60℃之間的斜率最大，60～65℃時已經(jīng)趨向平穩(wěn)，再增大反應(yīng)溫度對提取率的影響不顯著。我們可以看出，圖中吸光度值一直是上升趨勢，在1:30時達(dá)到最高。通過圖42和表42可以看出吸光值是先按上升后又下降，中間一段趨于平穩(wěn)狀態(tài)，且當(dāng)60min和80min時吸光度非常接近。表41 不同濃度穿心蓮內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)液所得吸光度濃度（mg/ml)吸光值(Abs)圖41 穿心蓮內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)曲線圖 以超聲震蕩時間為單因素變量表42 不同超聲振蕩時間對穿心蓮內(nèi)酯提取的影響時間（time）20min40min60min80min100min120min吸光值(Abs) 圖42 不同超聲振蕩時間對穿心蓮內(nèi)酯提取的影響 由表格和圖片可知，超聲震蕩時間在60、80min時穿心蓮內(nèi)酯提取濃度較高，在40min時達(dá)到最高。計算穿心蓮內(nèi)酯的相對含量。⑷ 以不同溶劑為單因素變量精確稱取5g穿心蓮粉4份，分別加入250mL錐形瓶，再依次加入水、75%乙醇、乙酸乙酯、石油醚各50mL，設(shè)置超聲功率100w，超聲溫度40℃，然后放置于超聲波清洗器中震蕩20min。⑴ 以超聲震蕩時間為單因素變量精確稱取5g穿心蓮粉6份，分別加入250mL錐形瓶，再各加入50mL75%乙醇，置于超聲波清洗器中，設(shè)置溫度為40℃，超聲功率100W，分別在60、80、100、120min時取出，依次用真空抽濾，再加入活性炭，30℃水浴10min脫色，抽濾，將濾液標(biāo)號并用75%乙醇定容至250mL。圖31 穿心蓮內(nèi)酯吸收光譜圖⑵ 此處采用比色法測定穿心蓮內(nèi)酯濃度。 活性炭脫色活性炭是一種黑色粉狀，粒狀或丸狀的無定形具有多孔的碳，主要成分為碳，含少量氧、氫、硫、氮、氯。正交試驗法對于全面試驗來說只實施了一部分，但對于其中任意兩個因素來說，卻是帶有等重復(fù)的全面試驗。3． 實驗方法 實驗原理 單因素試驗設(shè)計 單因素試驗設(shè)計是指試驗中只考慮單一因素的影響，雖然實際試驗中影響因素可能比較多，但我們需要先孤立其中一個因素進(jìn)行研究。超聲波發(fā)生器是超聲波提取設(shè)備的關(guān)鍵部件，其作用是將電能轉(zhuǎn)換成機(jī)械能。② 萃取效率高，超聲萃取20～40min即可獲得最佳提取效率。⑴ 超聲波熱學(xué)機(jī)理