【正文】
在研究原核生物蛋白質(zhì)翻譯機(jī)制時(shí), 將EFTu, EFTs, PhetRNAPhe, tRNAPhe, GTPP32等分別進(jìn)行混合后,經(jīng)硝酸纖維膜過濾,檢測被阻檔滯留在膜上的放射性計(jì)量,得到如圖示的結(jié)果。五、綜合分析題(本大題共2小題,任選其一,每題8分,共計(jì)8分)1.在利用飛船進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn)過程中,當(dāng)飛船著陸后,你的任務(wù)是確定某一細(xì)菌樣品DNA復(fù)制的方式。請?jiān)敿?xì)闡述這兩類研究成果的具體結(jié)論。步驟3:留下的間隙由DNA聚合酶填補(bǔ),然后由DNA連接酶連接。在這種代謝產(chǎn)物阻遏的過程中,葡萄糖會使細(xì)胞中cAMP的含量大幅度降低,在缺少cAMP的情況下,就不可能存在cAMPCAP復(fù)合體,轉(zhuǎn)錄也就不能被激活。4.在 DNA復(fù)制過程中,連續(xù)合成的子鏈稱(前導(dǎo)鏈),另一條非連續(xù)合成的子鏈稱為(后隨鏈)。6.負(fù)調(diào)控:阻遏蛋白結(jié)合在操作子位點(diǎn),阻止基因的表達(dá)。你提取細(xì)菌樣品的DNA并進(jìn)行CsCl梯度離心,你獲得了如下結(jié)果:根據(jù)這一結(jié)果,你認(rèn)為DNA是以半保留方式進(jìn)行復(fù)制,但你的觀點(diǎn)是不正確的,為什么?請你設(shè)計(jì)另一個(gè)實(shí)驗(yàn)方案(用同樣的樣品和相同的技術(shù)手段即CsCl梯度離心)能夠有效地將半保留復(fù)制和彌散復(fù)制這兩種復(fù)制方式區(qū)分開來。如果你有一序列為AUGUUUUUUUUUUUUU…的人工合成的mRNA片段,在無細(xì)胞蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)中能夠翻譯合成fMetPhePhePhe.... 的多肽,在你研究的新的抗生素中,有一種稱為putyermycin的抗生素能夠阻斷蛋白質(zhì)的合成,當(dāng)這種抗生素與上述人工合成的mRNA片段一同加入到無細(xì)胞蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)中時(shí),其產(chǎn)物為fMetPhe。2.描述下列遺傳區(qū)域的功能:5’ 側(cè)翼的調(diào)控區(qū)域( );3’ 非翻譯區(qū)( );編碼區(qū)( );3.在原核生物的基因表達(dá)調(diào)控中,因?yàn)闆]有核膜,( )和( )是耦聯(lián)的。 Golgi plex(C)Golgi plex。8.TFⅡH是一個(gè)具 9亞基的復(fù)合體,其中4個(gè)亞基具激酶功能域,可使 ( )的 CTD 磷酸化;另5個(gè)亞基具( )活性,在啟動子清除時(shí)使DNA解旋。請?jiān)敿?xì)闡述這兩類研究成果的具體結(jié)論。3.順式作用元件:是指DNA上對基因表達(dá)有調(diào)節(jié)活性的某些特定的調(diào)控序列(),其活性僅影響與其自身處于同一DNA分子上的基因()。10.印記基因:由于一些可遺傳的修飾作用(如甲基化)使配子(精子或卵子)中某個(gè)單一等位基因的活性在胚胎發(fā)育中具有標(biāo)記性特點(diǎn)。四、簡答題(本大題共7小題,每題6分,共計(jì)36分)1.How does lactose bring about the induction of synthesis of βgalactosidase, permease, and transacetylase? Why does this event not occur when glucose is also in the medium? 乳糖如何誘導(dǎo)β半乳糖苷酶、透過酶、轉(zhuǎn)乙?;负铣傻模繛槭裁丛谄咸烟谴嬖诘那闆r下,這一生物學(xué)事件不能發(fā)生?答:當(dāng)加入乳糖后,乳糖被代謝(異構(gòu)化)形成異乳糖,結(jié)合在阻遏蛋白上。但由于只能形成一個(gè)二肽,顯然,這種抗生素抑制了延伸過程中的轉(zhuǎn)位反應(yīng)。6.The doublehelix model of DNA, as suggested by Watson and Crick , was based on data gathered on DNA by other researchers. The facts fell into the following two general categories。7.為什么m7GTP能夠抑制真核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成,但不抑制原核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成?相反人工合成的SD序列能夠抑制原核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成,但不抑制真核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成?答:m7GTP之能夠抑制真核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成是因?yàn)樗钦婧思?xì)胞mRNA的5’帽子結(jié)構(gòu)的類似物,能夠競爭性地結(jié)合真核細(xì)胞蛋白質(zhì)合成起始階段所必需的帽子結(jié)合蛋白。你從這一結(jié)果中可以得到什么結(jié)論?為什么?答:延伸因子與GTP、氨酰tRNA形成三元復(fù)合體才能結(jié)合到核糖體的A位點(diǎn)上。SD序列是存在原核細(xì)胞mRNA的5’端非編碼區(qū)的一段富含嘌呤堿基的序列,能夠與核糖體小亞基上的16S rRNA的3’端的一段序列互補(bǔ)結(jié)合,這種結(jié)合對原核細(xì)胞翻譯過程中起始密碼子的識別非常重要,將人工合成的SD序列加到翻譯體系中,必然會干擾到mRNA所固有的SD序列與16S rRNA的互補(bǔ)序列的相互作用,從而競爭性地抑制原核細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的起始。 (2) physical structure. Watson 和Crick在其他研究者成果的基礎(chǔ)上提出了DNA雙螺旋模型,這些研究成果可以劃分為兩類即DNA的化學(xué)組成與DNA的物理結(jié)構(gòu)。Transcription coupled repair 轉(zhuǎn)錄與修復(fù)的耦聯(lián)(2)The major steps and proteins involved in eukaryotic RNA PolymeraseⅡtranscription 真核生物RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄RNA的主要步驟及其酶類答:(1)核苷酸切除修復(fù)主要修復(fù)由紫外線引起且不能被特定的糖苷酶所識別的多種堿基損傷,主要包括三個(gè)步驟:步驟1:核苷酸切除修復(fù)復(fù)合體識別損傷,然后在3’端距離損傷位點(diǎn)5個(gè)核苷酸處形成一個(gè)切口;在5’端距離損傷位點(diǎn)23個(gè)核苷酸處形成另一個(gè)切口;步驟2:兩個(gè)切口之間長度為28個(gè)核苷酸的單鏈DNA片斷在DNA酶的作用下被移除;葡萄糖通過正調(diào)控機(jī)制阻止乳糖操縱元的誘導(dǎo)。2.描述下列遺傳區(qū)域的功能:5’ 側(cè)翼的調(diào)控區(qū)域(控制轉(zhuǎn)錄);3’ 非翻譯區(qū)(穩(wěn)定mRNA);編碼區(qū)(編碼蛋白質(zhì));3.在原核生物的基因表達(dá)調(diào)控中,因?yàn)闆]有核膜,(轉(zhuǎn)錄)和(翻譯)是耦聯(lián)的。5.RNAi:是由外源雙鏈RNA產(chǎn)生的21~25nt小的干涉RNA而觸發(fā)內(nèi)生同源mRNA降解的過程(),是一種轉(zhuǎn)錄后水平上的基因沉默機(jī)制()。你首先使細(xì)菌在沒有標(biāo)記的培養(yǎng)基上生長幾代,然后轉(zhuǎn)到15N標(biāo)記的培養(yǎng)基中準(zhǔn)確地繁殖一代。請問這個(gè)DNA分子的連接數(shù)(L)、螺旋數(shù)(纏繞數(shù)T)、扭曲數(shù)(W)、以及超螺旋密度是多少?3.Antibiotics have been very useful in elucidating the steps of protein synth