【正文】 培養(yǎng)。無生物炭組處理：培養(yǎng)等量的土壤，含有2%的有機肥培養(yǎng)，不加生物炭。按照各要求處理，將一定量土壤、所需有機肥及生物炭混勻，做好補水（即補充所加入的干燥有機肥和生物炭所需的水量），放入培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)。用粉碎機粉碎生物炭，生物炭粉碎干粉過60目篩，在塑封袋中儲存?zhèn)溆?。通過3,5二硝基水楊酸比色法計算培養(yǎng)液中葡萄糖含量，測定不同時刻土壤中蔗糖酶活性的變化情況。通過向預培養(yǎng)的不同組土壤中注入等量的H2O2溶液，采用滴定法，計算培養(yǎng)液中剩余H2O2量，測定不同時刻土壤中過氧化氫酶活性的變化情況。中國在生物炭對土壤酶活性影響的研究還有很大的空白需要去填補。大部分的國外研究成果顯示，在土壤中添加生物炭會增加土壤微生物量，土壤中的微生物群落組成結(jié)構(gòu)和土壤酶活性會有明顯的變化[15]。與此同時，土壤的性質(zhì)和組成成分也極大地影響著土壤中微生物和酶的活性。研究發(fā)現(xiàn)[9]，生物炭的添加增加了兩種農(nóng)田土壤（微酸性和堿性土壤）的微生物量碳含量。但由于受不同來源生物炭的性質(zhì)不同、同源生物炭施用量不同、不同類型土壤質(zhì)地不同、同種土壤施肥量不同等因素的影響，目前有關生物炭的施用對有機肥土壤中重要酶活性影響的研究結(jié)果并不是很明確，因此當今國內(nèi)外學者對土壤中重要酶在有機肥土壤中施用生物炭后活性的情況仍存在爭議。另外，隨著生物炭施加量的增多，土壤重要酶活性的持續(xù)時間會有一定地延長，當施加高量（5%)生物炭時，土壤酶活性在50d仍能保持峰值。因此，施加生物炭在改善土壤肥力、生態(tài)環(huán)境等方面有著積極的影響。本文在此基礎上，通過實驗不同量生物炭對施用有機肥的磚紅壤中重要酶活性的影響，研究探討施用有機肥后的磚紅壤最適生物炭施用量，選擇合適的生物炭，以期使施用有機肥土壤得到較好的改良效果，促進植物生長。研究發(fā)現(xiàn)，竹炭的添加增加了土壤微生物量碳、氮、磷的含量[10]。土壤作為適合微生物生存的微環(huán)境，具有六大特點[13]：土壤中的微生物種類多樣，微生物量巨大；存在復雜的營養(yǎng)交互作用；活微生物在土壤中占據(jù)的空間較小，僅占土壤中生物有效空間的5%以下；土壤膠體能吸附重要的生物大分子如DNA、蛋白質(zhì)等；微生物在土壤固相中居于核心地位；并存著生物調(diào)節(jié)和非生物調(diào)節(jié)的生物化學反應。同時，研究發(fā)現(xiàn)添加生物炭后，微酸性土壤和堿性土壤中的微生物量碳含量能夠得到提升[8]。 研究的目的與意義測定不同量生物炭對施用有機肥的磚紅壤中重要酶活性的變化情況，探索適量生物炭對磚紅壤中重要酶活性的積極影響。第二方面：測定在不同量生物炭下土壤脲酶活性的變化情況。整合三方面的實驗數(shù)據(jù)，通過Excel作圖，研究在不同量生物炭下施用有機肥土壤中重要酶的活性情況，探索生物炭對土壤和土壤酶產(chǎn)生積極影響的最適量。 有機肥的處理將有機肥料在6070℃條件下恒溫烘干，通過粉碎機粉碎，過60目篩，在塑封袋中儲存?zhèn)溆谩?溶液配制酶促反應試劑的配制：準確量取1ml的30%H2O2溶液，放入100ml的容量瓶中，稀釋至100ml，并定溶。稱取5g土壤，置于150ml三角瓶中，%過氧化氫。高生物炭組處理：培養(yǎng)等量的土壤，含有2%的有機肥和5%的生物炭。h)。按照各要求處理，將一定量土壤、所需有機肥及生物炭混勻，做好補水（即補充所加入的干燥有機肥和生物炭所需的水量），放入培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)。將三角瓶密封，置于38℃恒溫中培養(yǎng)。將三角瓶密封，置于38℃恒溫中培養(yǎng)。將三角瓶密封，置于38℃恒溫下培養(yǎng)。 土壤預培養(yǎng)實驗將所需土壤的含水量調(diào)整到約田間持水量的60%（一般加水量為土壤量的15%到20%之間，以不粘結(jié)但很濕潤為準），將土壤容器用塑料薄膜封蓋以免水分過快損失，將塑料薄膜用針扎一些小孔，以保持氣體流通，保證土壤重要酶的活性。在培養(yǎng)開始后的第10天、第20天、第35天、第50天測定土壤過氧化氫酶活性。稱取2g土樣，置于50ml三角瓶中，注入15ml 8%蔗糖溶液，5ml ，搖勻混合物。上述處理在37℃恒溫下培養(yǎng)24h后，做如下處理：培養(yǎng)結(jié)束后，取出并迅速過濾。：。土壤的脲酶活性與土壤的微生物數(shù)量、有機質(zhì)含量、全氮和速效氮含量呈正相關。 操作步驟標準曲線：取6支50ml容量瓶，分別加入NH3N標準溶液0、10ml，定容后，NH3N的含量分別為0、1120mg/L。 試劑配制3,5二硝基水楊酸溶液：，溶于20ml 2mol/L氫氧化鈉和50ml水中，用蒸餾水定溶至100ml。應用Excel軟件以實驗中標準曲線的吸光度（y軸）對濃度（x軸）作圖，擬合其方程，得出吸光度B和濃度的關系，并計算各處理樣品的濃度[20]。 生物炭對土壤主要酶活性的整體影響由圖4可知，在施用有機肥的土壤中加入生物炭，土壤中重要酶的活性都有增加。但其促進效果差別巨大，土壤重要酶活性增強幅度從5%到150%不等。(3)在土壤生境中， 過氧化氫酶能反應出土壤腐殖化強度及有機質(zhì)積累程度，脲酶活性反應出土壤氮素供應強度， 蔗糖酶在糖類物質(zhì)的水解和土壤碳素循環(huán)的過程中起著積極的作用[18]。未來，將在此基礎上進一步開展對生物炭的研究。在此之前，有亞馬遜流域成功利用生物炭的顯現(xiàn)；在未來，隨著對生物炭的研究，其將會在一定的農(nóng)業(yè)范圍內(nèi)進行開發(fā)使用。實驗證明生物炭能夠在不同程度上增加土壤重要酶活性，并延長土壤重要酶活性持續(xù)時間，在改善土壤的生境，增加土壤的肥力，促進作物的生長方面有著積極影響。(g土壤中生物炭對不同酶影響情況差別很大，酶活性增強幅度從10%到200%，其中對脲酶活性影響最大，過氧化氫酶影響最小。從整體的數(shù)據(jù)來看：在施用有機肥的磚紅壤中加入生物炭后，過氧化氫酶活性程度和持續(xù)時間都有了一定的提高，而且隨著生物炭量的增多其效果越明顯，雖在其活性在第10d后仍開始下降，但不同于未加入生物炭的有機肥土壤，其活性在第35d又開始回升，到50d時其活性已接近之前的峰值。 操作步驟標準曲線做法：取0、定容到50ml，其濃度分別為含有葡萄糖0、10mg/L。顯色30min后，定容。通常可以通過測定生成的氨的數(shù)目以表示土壤脲酶的活性。H2O2的提?。悍Q取5g土壤，置于150ml三角瓶中，%過氧化氫。蔗糖酶活性以單位時間（1h）、單位土壤（1g）生成的葡萄糖的質(zhì)量（mg）表示，即mg/(g中生物炭組處理：培養(yǎng)等量的土壤，含有2%的有機肥和2%的生物炭。稱取2g土樣，置于50ml三角瓶中，注入15ml 8%蔗糖溶液，5ml ，搖勻混合物。按照各要求處理，將一定量土壤、所需有機肥及生物炭混勻，做好補水（即補充所加入的干燥有機肥和生物炭所需的水量），放入培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)。用NH3N標準溶液做標準曲線，取濾液加入顯色劑待其顯色后，測定各處理NH3N生成量脲酶活性采用單位時間（h），單位質(zhì)量土壤（1g）所催化生成的NH3N的量（mg）表示，即mg/（g稱取5g土壤，置于150ml三角瓶中，均勻加入2ml甲苯，處理15min。稱取5g土壤，置于150ml三角瓶中，均勻加入2ml甲苯，處理15min。 溶液配制10%尿素：準確稱量10g尿素溶解并定容為100ml1mol/L氫氧化鈉：準確稱取4g氫氧化鈉溶解并定容為100ml檸檬酸鈉緩沖液：；；將兩溶液混勻，用1mol/，定容為200ml。實驗不能及時測定的土壤樣品在4℃保存，可認為土壤酶活性和微生物學性質(zhì)不會發(fā)生較大變化，但不宜長期儲存。破碎大顆粒后，密封處理，室溫下振蕩培養(yǎng)。低生物炭組處理：培養(yǎng)等量的土壤，含有2%%的生物炭。 處理設置及檢測在實驗開始前，測定預培養(yǎng)土壤的過氧化氫酶活性，代表土壤酶活性的初始值。 實驗方法 生物炭對土壤過氧化氫酶活性影響測定 實驗設置實驗使用一種土壤（磚紅壤），設置三個實驗組（低生物炭組：培養(yǎng)一定量的土壤，含有一定量的有機肥和少量的生物炭；中生物炭組：培養(yǎng)等量的土壤，含有等量的有機肥和中量（2%)的生物炭；高生物炭組：培養(yǎng)等量的土壤，含有等量的有機肥和高量（5%)的生物炭），一個純土壤組（添加等量土壤但不添加任何有機肥和生物炭），一個無生物炭組（添加等量土壤和有機肥但不添加任何生物炭），每組實驗重復3次，共35n個樣。因此，采集三亞常見的新鮮廢棄水稻秸稈，經(jīng)過進一步的處理制作本實驗的生物炭并做好密封保存以備后續(xù)實驗進行。在恒溫條件下培養(yǎng)5h。目前生物炭在環(huán)境、生態(tài)等領域作用機理的基礎研究方面鮮有報道，還缺少大規(guī)模試驗和統(tǒng)計數(shù)據(jù)的支持，在土壤