【正文】 過程病毒性、致病性、數(shù)量、濃度、人群中影響程度、昆蟲媒介的存在u 登記n 生物安全辦公室n 感染機構n 約束機構n 疾控中心 – 選擇機構規(guī)程u 氣溶膠風險：超聲、離心 、混勻、混合、振動u 經(jīng)皮風險: 針頭、注射器、玻璃吸液管、解剖刀、低溫刀片/刀等u 飛濺/濺潑風險: 吸液管、接種環(huán)u 建立一套結合安全使用的標準操作規(guī)程u 遵守基本的生物安全規(guī)則u 實驗室、工作區(qū)域、 BSL2或更高傳染因子實驗室內(nèi)的設備貼上標識u 指導實驗室操作和檢查實驗設備u 用非傳染性材料做嘗試性試驗，以測試新的規(guī)程/設備人員u 人員免疫n 贅生物疾病n 感染n 免疫抑制治療n 年齡、種族、性別、妊娠n 手術 (脾、胃切除)u 免疫力u 后暴露預防u 血清庫u 對安全的態(tài)度u 安慰u 外傷、破損皮膚、濕疹、皮炎u 安全培訓u 以前從事生物危害的經(jīng)歷u 技術的熟練程度u 立即向生物安全負責人和生物安全辦公室報告所有的暴露事件、被忽視的事件以及相關疾病的癥狀u 調(diào)查/核實事件/飛濺等，以防止再次發(fā)生防護設備u 防護：l 氣溶膠可以吸入粒子直徑5181。m), 離心滲漏物、溢出物、吸液等Inhalation:Breathing in respirable sized aerosols (5181。以下是14級生物安全所要求的實驗室操作、防護設備、實驗室設施和傳染因子的概括。u 適當?shù)南驹O備。BSL2加：u 自成隔離區(qū)，進入實驗室的過道用物理方式隔開。檢查結果應與實驗室人員和管理者一起討論，對于在檢查過程中發(fā)現(xiàn)的所有不足之處，實驗室應指定專人負責采取改正措施。標貼應用帶子、線、粘膠或其它方式盡可能貼近容器以防止松動或意外弄丟。本設備將作為（在□內(nèi)打勾） 服務/維修 □ 重新安置 □ 報廢 □消毒操作人員 所使用的消毒劑 消毒日期 設備放置地點 實驗室聯(lián)系電話 設備的以下區(qū)域 仍存在污染生物危害警示的推薦樣式以下的內(nèi)容描述了實驗人員的要求。生物安全負責人的職責是確保實驗室全體人員得到適當操作和技術的培訓。如果工作人員沒有直接接觸血液或其他潛在有傳染物質(zhì)，但使用那些用于處理或貯存血液，其他潛在有傳染物質(zhì)或血液耐受致病原的儀器，那么此人也被認為是職業(yè)暴露。丁型肝炎（HDV）168。 Human TlymphotropicVirus Type I I型人類T－淋巴促激素病毒168。本中心的全部生物安全柜必須具有中心證明/服務合同以及至少每年鑒定。超凈工作臺不能提供保護人員或環(huán)境防止可傳染性或潛在可傳染性因子、過敏原、化學品或物質(zhì)?；谶@一原因，不斷地進行安全措施方面的在職培訓是非常必要的。人員培訓的內(nèi)容應包括實驗室生物安全的基本知識、基本技能、消防和應急處置預案、化學、生物危險和傳染預防、應急救護等課程。關于培訓規(guī)劃能否提高受培訓者的操作技能和個人安全水平，這可能取決于培訓所采用的方法。僅考慮培訓對象對所進行培訓的反應是一種最不有效的評估方法，因為這種反應與培訓對象對培訓內(nèi)容的實際掌握程度之間可能沒有關系，它也不應作為評估培訓效果的唯一指標。對特殊的員工醫(yī)學監(jiān)督程序可以做一些預防測定，包括免疫、定期身體檢查和采集血清樣本。有風險全體員工必須每年做PPD試驗。生物安全辦公室是懷孕婦女詢問任何問題或涉及到有關她們工作環(huán)境風險的機構，同時辦公室又扮演著懷孕員工和她們各自的部門負責人之間的聯(lián)絡員角色。實驗室應具備足夠的符合不同級別的個人防護裝備，供實驗人員選擇和使用。 戴好手套后應完全遮蓋手及腕部；168。用過的鞋套應丟棄在生物垃圾袋內(nèi)，鞋套不得穿離實驗室區(qū)域。一級病原微生物實驗室和二級病原微生物實驗室的設施設備要求。氣溶膠在生物安全柜的工作區(qū)域中產(chǎn)生被包含在生物安全柜里面。l 工作完畢后,讓柜內(nèi)的物品在移出之前運行 23 分鐘。E. 所有工作必須在工作臺面的中后部進行，并能夠通過玻璃觀察擋板看到。紫外燈的可見蘭紫色光不指示有殺菌的效應。在操作記錄簿上詳細記錄離心機和轉子使用情況以決定技術維修的需要。檢驗保護桶的“O”型密封圈和保護桶或轉子的內(nèi)部。 化學吸附真空管和過濾器化學吸附真空管和過濾器防止傳染性和非傳染性物質(zhì)吸入真空管線里。例如，在注射器上為口腔或鼻腔的注射使用鈍針或套管。l 裝滿注射器時盡量減少注射器內(nèi)泡沫和氣泡的產(chǎn)生。別折彎、別剪、別重復或以別的方式處理針。l 移液管的排出除應該與液體或瓊脂水平盡可能地近，并且，只要可能內(nèi)容物應該沿著管壁或瓶壁排出，不要從高處排出。經(jīng)適當時間的浸泡后，多余的消毒劑小心的倒入水池。在使用前推薦用消毒水、鹽或亞甲基蘭沖洗；l 如果攪拌器被用于傳染性物質(zhì)則用一條含合適的濕的消毒劑蓋在攪拌器頂部。為了避免這些，應該用一個注射器的長的套管或一個長滴管來填充玻璃小瓶。因此，在開始這一個程序之前，生物安全負責人應該與專業(yè)科室負責人磋商后制定各個儀器的程序。對儲存在冰箱或冷凍庫中的所有有傳染性的或有毒的材料進行適當分類。另外要防范的是放入塑料袋中的細頸瓶由于或沒有吸收材料。在實驗室事故中缺乏事故感知能力是一個重要因素。 疲勞作業(yè)極有可能引發(fā)事故的發(fā)生。168。168。污染物封口、耐用的、防漏的容器袋包裹，高壓消毒后送到指定銷毀點。在使用或貯存有感染性物品的設備上貼上通用的生物危害標識。必要時穿著個體保護裝置（實驗工作服，手套以及面部保護裝置）；不能將保護裝置穿到實驗室外。168。168。168?？刂评ハx和嚙齒動物的出沒。167。168。標本容器應當堅固，正確地蓋子或塞子蓋好后應無泄漏。4． 對每個標本作唯一性標識。標本的內(nèi)層容器要在生物安全柜內(nèi)打開，并準備好消毒劑。4． 不要重新給用過的注射器針頭戴護套。移液管應在消毒液中浸泡適當?shù)臅r間，然后再丟棄或滅菌清洗后重復使用。應當用鑷子拿取這些東西，妥善儲存，并經(jīng)清除污染和/或高壓滅菌后再丟棄。否則，使用明火會擾亂氣流。在吸取液體培養(yǎng)物前，為確保它成為均一的懸液，應給予振動混勻。通?？扇我馐褂玫慕臃N環(huán)是有用的。使用完全干燥的平板也能減少這種風險，但是從厭氧罐內(nèi)取出的孵育平板（進行厭氧孵育）很容易變濕。由于這些可能性，因此應在生物安全柜內(nèi)打開液體感染性培養(yǎng)物及危害物質(zhì)，同時穿戴手套、長袖實驗室工作服，這是很好的安全措施。用砂輪在安瓿的頸部劃痕，消毒的濕酒精棉球包裹住安瓿，在安瓿的頸部用力折斷，確保安瓿處于垂直狀態(tài)。為確保裝有有害的、可流動的培養(yǎng)物及有活性的、粉狀物質(zhì)的玻璃器皿便于運輸、孵育、貯存，應使用不易破碎的、防漏的外層容器應，體積足夠的大以防玻璃容器滲漏或破損時可容納所有的液體和粉末。168。內(nèi)務管理程序的改進應以人員和實驗完整性可能遭受的最大水平危害為基礎。168。監(jiān)督員必須從有關的潛在生物危害方面嚴格檢查每一項任務，制定出詳細的程序，并對實驗人員進行指導以減少誤解的機會。地面168。低溫冰柜 168。被推薦的內(nèi)務管理方法是對于直接的工作區(qū)域采取單獨分管的原則，對于共同使用場所區(qū)域采取合作原則，將內(nèi)務管理的任務分配給檢查組。非高致病性的病原微生物菌（毒）種和生物樣本的運送應由專人負責，專車運送，運送人員應經(jīng)過培訓取得相關資質(zhì)，不得通過公共交通工具運送，運送過程應采取相應的防護措施。保藏的菌（毒）種和生物樣本應設立專冊（卡），詳細記錄名稱、編號、來源、鑒定的日期和結果、鑒定者、所用的的培養(yǎng)基、保藏的方法、傳代次數(shù)等。當脫去個人防護用品時必須確保個人防護用品暴露面朝里，用皂液和水仔細洗手，在實驗室入口處貼上飛濺標記，實驗室排風至少1小時。生物安全辦公室將提供后暴露評估，該評估對經(jīng)歷“暴露事件”的員工是免費的。假如安全設備存在，這些設備必須由生物安全辦公室來評估?！?列出應急狀態(tài)下所需的裝備和制劑的名錄及存放地點。并維持適當?shù)慕佑|時間。l 報告實驗室生物安全負責人，如果需要幫助，請咨詢生物安全委員會。允許至少20分鐘的接觸反應時間。將所有的污染紙巾和一些污染防護衣放入生物危害袋內(nèi)進行高壓滅菌。l 將所有可處理的物品和溢出物和一些污染人員的防護裝置丟棄進一個生物危害袋中。該詞也用于去除或中和有（decontamination） 危害的化學品和放射性物質(zhì)。 實驗室材料的清潔清潔是指去除污垢、有機物和污漬。 消除局部環(huán)境的污染可以聯(lián)合使用液體和氣體消毒劑來清除實驗室空間、用具和設備的污染。熏蒸后，該區(qū)域必須徹底通風后才能允許人員進入。如果相對濕度低于70％，在使用強力膠帶（如管道膠帶）密封前部封密板前，還要在安全柜內(nèi)部放置一個開口的盛有熱水的容器?？梢圆捎脷鈶B(tài)的碳酸氫銨來中和甲醛。在清除環(huán)境污染時，含有3％過氧化氫的溶液也可以作為漂白劑的代用品。塵土、污物以及有機物是微生物的棲身之所，并可能影響除污染劑（抗菌劑、化學殺菌劑以及消毒劑）的作用。消毒劑常用于非生命物體或其表面。11．消毒和滅菌處理過程定義關于消毒和滅菌有許多不同的術語，下面是生物安全中較常用的：抗菌劑（antimicrobial） 能夠殺死微生物或抑制它們生長和繁殖的制劑。 血液溢出物血液或其他含有機體的物質(zhì)和低感染微生物的濃度溢出的處理：l 戴手套，眼罩和一件實驗外套。也可用工具收集尖銳物，如能高壓滅菌的掃帚和簸箕等。備齊處理物（消毒劑，紙巾，生物危害袋和鑷子）。l 用皂液和消毒洗手液洗手?！?其他必須明確規(guī)定的事項。實驗室應建立意外事件應急處置系統(tǒng)，制訂針對意外暴露和事故等狀況的應急預案。員工可從生物安全辦公室獲得他們醫(yī)療記錄的復印件，生物安全辦公室必須保留員工的醫(yī)療記錄，保留時間為：聘用期限加上30年。大范圍BL2污染（如離心機）或BL2+或BL3污染，必須通知生物安全辦公室，安排相關人員清潔實驗室以便再進入。9．意外暴露事件是實驗室人員在執(zhí)行本職工作時與潛在傳染性物質(zhì)的接觸（眼、嘴、其它黏膜、經(jīng)吸入方式進入呼吸道、破損皮膚、或非腸道）。 內(nèi)部運送病原微生物菌（毒）種和生物樣本的容器或包裝材料應滿足生物安全防護的要求，應密封，防水、防破損、防外泄。管理員應制定進度表和進行檢查任務的頻率并依此執(zhí)行。廢棄物聚積 168。 生物安全柜168。無需刻意按照這些條文去完成，這只是舉一個例子，作為實驗室內(nèi)復雜的內(nèi)務管理必須觀察的詳細方式介紹如下。168。日常內(nèi)務管理程序可以預防組織廢墟的聚集物：168。168。 內(nèi)務管理設計周全的內(nèi)務管理程序和表格可降低從事與致病因子有關工作的風險度，并確保研究項目的完成。將棉球和安瓿頂端丟進消毒劑中。裝有干粉狀危害物的容器應在生物安全柜內(nèi)打開。如果平板明顯潮濕，則應在生物安全柜內(nèi)打開。在粗糙不平整的培養(yǎng)基上用接種環(huán)或針劃線接種培養(yǎng)物會導致氣溶膠的產(chǎn)生。輕微的打旋可以成為均一的懸液，但仍伴有微量的氣溶膠產(chǎn)生。氣體和電加熱的微型加熱器配有硼硅酸玻璃紅火陶瓷保護罩，從而減少接種環(huán)滅菌時感染性物質(zhì)的飛濺和散步。1． 排出物應當收集在封閉的容器內(nèi)進一步高壓滅菌和/或廢棄。6． 應備有適當?shù)南緞﹣砬逑磭姙R和溢出標本。1． 只有經(jīng)過嚴格培訓的人員才能進行這項工作。2． 必須戴手套，并建議對眼睛和黏膜進行保護（護目鏡或面罩）。檢驗申請單應當分開放置在防水袋或信封內(nèi)。容器上應當正確的粘貼標簽以便于識別。168。167。保持工作區(qū)清潔。168。168。168。卸下防護服離開實驗室前要洗手。 只允許實驗人員進入二級生物安全區(qū)域。控制昆蟲和嚙齒動物的出沒。168。168。在有組織、寬敞的實驗室里工作有助于防止事故的發(fā)生。 以反常的速率工作是一個重要的引發(fā)因素。8．實驗室操作為預防有關危害的發(fā)生，我們在這一章節(jié)里講述了一些實驗室技術和方法的資料。被污染液氮危害程度將會相當?shù)匾蕾嚤粌Υ娴奈⑸锏膫魅拘阅芰Α⒃谝旱械姆€(wěn)定性和在空氣中生存的能力。（水浴箱、冷藏箱、振蕩器）水浴箱通常用于鈍化、孵育或測試傳染性物質(zhì)，應該包含消毒劑。所有用于培養(yǎng)物、毒素或其它生物危害材料冷凍干燥的安瓿應該用耐熱玻璃制成的。 凍干樣品凍結在安瓿中被干燥在真空歧管上或在一個負壓的容器中。、混勻器、超聲波清洗和粉碎機大多數(shù)實驗室因混合、混勻、振蕩、研磨、裂解而操作攪拌機、混勻器、超聲波粉碎機或者危險的細胞裂解器所產(chǎn)生的氣溶膠是生物危害的主要來源。l 避免從移液管中偶然落下的傳染性或者有毒的材料到工作面。別將注射器扔進非專用的容器內(nèi)。l 不要為了混勻而用注射器將有傳染性物質(zhì)的液體強力地注射進開口的小瓶里。l 檢查玻璃注射器是否有裂紋和碎裂以及針頭是否有倒鉤和堵塞。讓被吸附液體完全稀釋。l 不要超過安全的轉子速度。l 在生物安全柜里面輕輕裝滿所有的離心機管和瓶。紫外燈可能損害眼睛、皮膚和實驗室設備。G. 操作者不應反復移出或伸進手臂以免干擾氣流。l 關閉熒光燈和排風機。l 用75%的乙醇或適當?shù)南緞┫舅械膬?nèi)部表面。合適地使用生物安全柜能提供一個清潔的工作環(huán)境。在從事可能出現(xiàn)飛濺的工作時應戴護目鏡，可避免實驗物品飛濺對眼睛造成的傷害。 在完成工作后應摘除手套并徹底洗手。在二級生物安全實驗室里從事病原微生物學實驗和HBV、HCV、HIV等血清學檢測工作時，應該在實驗服外面穿上隔離衣。