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微生物實(shí)驗(yàn)室病原微生物評(píng)估報(bào)告(完整版)

  

【正文】 中生長(zhǎng)。葡萄球菌形成的感染易局部化與此酶有關(guān);:金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的脫氧核糖核酸酶能耐受高溫,可用來(lái)作為依據(jù)鑒定金黃色葡萄球菌;:金黃色葡萄球菌能產(chǎn)生數(shù)種引起急性胃腸炎的蛋白質(zhì)性腸毒素,分為A、B、C、D、E及F五種血清型。突然出現(xiàn)心臟雜音,膿毒性栓子和其他經(jīng)典體征便可作出可疑診斷,確診需依據(jù)超聲心動(dòng)圖和血培養(yǎng)。 金黃色葡萄球菌的流行病學(xué)一般有如下特點(diǎn):季節(jié)分布,多見(jiàn)于春夏季;中毒食品種類多,如奶、肉、蛋、魚(yú)及其制品。(10)微生物、PCR實(shí)驗(yàn)室要設(shè)置紗窗、擋鼠板。當(dāng)估計(jì)會(huì)出現(xiàn)微生物和危險(xiǎn)物濺出時(shí)要戴好眼罩或面罩。(2)工作人員要戴口罩、手套進(jìn)行操作。(6)無(wú)菌物品如棉球需每天更換,開(kāi)啟后使用不得超過(guò)24小時(shí)。(6)平衡:離心時(shí)應(yīng)保持合適的平衡,以保證離心的順利進(jìn)行。(4)破裂的玻璃器具和玻璃碎片應(yīng)丟棄在有專門(mén)標(biāo)記的、單獨(dú)的、不易刺破的容器里。具危險(xiǎn)性的液體如酸或堿性液體應(yīng)放在視平線以下。(4)垃圾處理:每天至少清理垃圾一次。未戴手套的人員如果使用該區(qū)域內(nèi)的電話、計(jì)算機(jī)終端或其它設(shè)備,應(yīng)該戴上手套,或在使用后立即徹底洗手。謹(jǐn)慎處理針頭、解剖刀、和碎玻璃等銳利物品。在有可能發(fā)生液體濺溢的工作崗位,可加套一次性防滲漏鞋套。(3)使用、處理能夠通過(guò)粘膜和皮膚感染的試劑,或有可能發(fā)生試劑濺溢的情況時(shí),必須佩帶護(hù)目鏡、面罩或面具式呼吸器。根據(jù)《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》,本檢驗(yàn)科不涉及《人間傳染的病原微生物名錄》中高致病性微生物的分離培養(yǎng)及高致病性微生物的菌、毒種的保藏,實(shí)驗(yàn)室采用一定防護(hù)措施就能控制感染或防范災(zāi)害,或者對(duì)相應(yīng)病原體存在有效的免疫方法。評(píng)估我檢驗(yàn)科生物安全防護(hù)水平按二級(jí)實(shí)驗(yàn)室(BSL2)生物安全要求。5. 實(shí)驗(yàn)中服裝和個(gè)人防護(hù)裝備的一般要求(1)應(yīng)穿著符合實(shí)驗(yàn)室工作需要的服裝,工作服應(yīng)干凈、整潔。帆布鞋可吸收化學(xué)物品和有傳染性的液體,所以最好穿皮革或其它防滲漏的合成材料的鞋。使用后的針具不要折斷、彎曲、破損、重復(fù)使用或用手重裝在針管上?!扒鍧崱焙汀胺乔鍧崱眳^(qū)都應(yīng)保持整潔。(5)裝飾:不得在電燈、燈座或儀器上進(jìn)行裝飾,更不要使用電子裝飾物、蠟燭、圣誕樹(shù)等有引起火災(zāi)危險(xiǎn)的裝飾品。較大的廢棄物容器應(yīng)靠近地面存放。(5)高熱操作玻璃器具時(shí)應(yīng)戴隔熱手套。16.采集血樣的危害評(píng)估及防護(hù)感染途徑危害評(píng)估感染途徑危害評(píng)估感染途徑危害評(píng)估皮膚極少粘膜(眼結(jié)膜)極少呼吸道可能消化道(經(jīng)手口)極少經(jīng)血(針刺傷、切割傷)可能經(jīng)血(蟲(chóng)媒介)極少盜竊可能化學(xué)腐蝕極少放射無(wú)(1)每天早晨用500mg/L的”84”消毒液擦拭抽血臺(tái)面及其它物表,并開(kāi)紫外燈消毒至少30分鐘,并做好記錄。(7)工作人員需對(duì)銳器如采血針采取高度預(yù)防措施,用過(guò)的采血針需浸泡在含有消毒液的厚壁容器中。(3)實(shí)驗(yàn)中使用的竹簽用后要用1000mg/L“84”消毒液浸泡。(3)操作中使用的接種環(huán)、鑷子等金屬物品要在酒精燈火焰上燒灼滅菌。三、特定實(shí)驗(yàn)活動(dòng)危害評(píng)估(見(jiàn)以下章節(jié)之各種病原體的危害評(píng)估) 工作人員素質(zhì) 本實(shí)驗(yàn)室共有技術(shù)人員13名,其中申請(qǐng)進(jìn)入BSL2實(shí)驗(yàn)室13名。此外,剩飯、油煎蛋、糯米糕及涼粉等引起的中毒事件也有報(bào)道;上呼吸道感染患者鼻腔帶菌率83%,所以人畜化膿性感染部位常成為污染源。 葡萄球菌性骨髓炎主要見(jiàn)于兒童,可引起寒戰(zhàn),發(fā)熱和受累骨疼痛,繼之出現(xiàn)紅腫。腸毒素可耐受100176。可分解葡萄糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。該菌在普通肉湯中呈均勻迅速混濁生長(zhǎng);若接種于瓊脂平板上35℃過(guò)夜后可形成直徑約2~3mm的厚菌落、濕潤(rùn)有光澤、呈金黃色不透明圓形凸起。玻片法:將待試菌落乳化于玻片上的鹽水中,經(jīng)10~20S證實(shí)無(wú)自凝后,用接種環(huán)取人或兔血漿一環(huán),與乳化菌液混合,出現(xiàn)凝集者為陽(yáng)性,另設(shè)生理鹽水為陰性對(duì)照。 用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和對(duì)流免疫電泳方法可檢測(cè)金葡菌的磷壁酸抗體。已被感染的病人應(yīng)與其他易感病人隔離,患有活動(dòng)性葡萄球菌感染,即使是局部性的感染(如癤)的醫(yī)護(hù)人員,在其感染治愈前不得接觸病人或器械。很多葡萄球菌菌株對(duì)紅霉素,四環(huán)素類藥物,氨基糖苷類,桿菌肽和氯霉素也敏感,但因有更好更安全的藥可用,故很少使用氯霉素和桿菌肽??捎糜谔娲f(wàn)古霉素治療MRSA感染的藥物有:TMPSMZ,成人劑量為T(mén)MP10~15mg /()加SMZ50~75mg/(),分劑口服或腸外給藥,每次間隔8小時(shí)或12小時(shí),連續(xù)2~4周;利福平(600mg/d)口服或腸外給藥;腸外給亞胺培南西拉司丁(500mg每6小時(shí)1次)或美羅匹寧(~。二、細(xì)菌的生物安全防護(hù) 根據(jù)《病原微生物生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》中的有關(guān)規(guī)定,人間傳播的微生物名錄(待頒布)金黃色葡萄球菌屬于三類,BSL2。非一次性銳器必須放置在堅(jiān)壁容器中,轉(zhuǎn)移至處理區(qū)消毒,最好高壓殺菌。按日常程序、在有關(guān)傳染源的工作結(jié)束后、尤其是傳染源濺出或?yàn)⒊龊?、或受到其他傳染源污染后,?shí)驗(yàn)室設(shè)備和工作臺(tái)面應(yīng)當(dāng)使用有效的消毒劑消毒。防護(hù)服可以在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)處理,也可以在洗衣房中洗滌,但不能帶回家中。其傳播途徑主要包括性交傳染,還可通過(guò)非性接觸傳播,如通過(guò)接觸患者分泌物污染的用品(衣褲、床上用品、毛巾、浴盆、馬桶等)間接感染;孕婦淋病患者當(dāng)羊膜破裂,可繼發(fā)羊膜腔內(nèi)及胎兒感染;新生兒經(jīng)過(guò)患淋病的母體產(chǎn)道時(shí)??梢鹆芫匝垩祝涣硗馍锌赏ㄟ^(guò)醫(yī)護(hù)人員的手和器具引起醫(yī)源性感染。人工培養(yǎng)后形態(tài)亦常呈球形、單個(gè)、成雙或四聯(lián)排列。淋球菌在血瓊脂培養(yǎng)基孵育24小時(shí)后,~1mm的圓形稍隆起,濕潤(rùn)光滑,半透明,邊緣呈花瓣?duì)?,有粘性的露滴狀菌。三、淋病奈瑟菌的?shí)驗(yàn)室檢查及其診斷細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)室檢查及其它檢查(1) 涂片檢查:取患者尿道分泌物或?qū)m頸分泌物,作革蘭氏染色,在多形核白細(xì)胞內(nèi)找到革蘭氏陰性雙球菌。國(guó)內(nèi)采用巧克力瓊脂或血瓊脂培養(yǎng)基,均含有抗生素,可選擇地抑制許多其他細(xì)菌生長(zhǎng)。但目前在男女二性標(biāo)本的敏感不高,特異性差,加之實(shí)驗(yàn)人員的判斷水平,故該實(shí)驗(yàn)尚不能推薦用來(lái)診斷淋球菌感染。對(duì)于污染的銳器,必須時(shí)刻保持高度的警惕,包括針、注射器、玻片、加樣器等。離開(kāi)該系統(tǒng)進(jìn)行消毒的物料,在轉(zhuǎn)移前應(yīng)包裝,其包裝應(yīng)符合有關(guān)的法規(guī)。當(dāng)必須在生物安全柜外處理標(biāo)本時(shí),需采取面部保護(hù)措施(跟鏡、口罩、面罩、或其他防濺裝置),以免傳染源或其他有害物濺或?yàn)⒌矫嫔稀=Y(jié)核桿菌的生物危害評(píng)估報(bào)告一、結(jié)核桿菌的傳播與致病結(jié)核桿菌通常指結(jié)核分枝桿菌和牛分枝桿菌,其中結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)是引起人類結(jié)核病的主要病原體。 感染結(jié)核桿菌后,終身都有可能發(fā)病,發(fā)病時(shí)間因人而異,一般2個(gè)月~20年才發(fā)病。若并發(fā)氣胸或大量胸腔積液,呼吸困難癥狀尤為嚴(yán)重。此外結(jié)核桿菌菌體還具有多形態(tài)特征,受不良生長(zhǎng)條件的影響可分別表現(xiàn)為桿菌型 (基本形態(tài))、濾過(guò)型、顆粒型和球菌型(L型)4種不同的類型。培養(yǎng)法更為精確,尚可作藥物敏感試驗(yàn)與菌型鑒定。③ 結(jié)核菌素試驗(yàn):是診斷結(jié)核感染的參考指標(biāo)。血沉增快常見(jiàn)于活動(dòng)性肺結(jié)核。還應(yīng)注意將結(jié)核病與肺癌、肺炎、支氣管擴(kuò)張、慢性支氣管哮喘和其它發(fā)熱性疾病如傷寒、敗血癥、白血病、縱隔淋巴瘤及結(jié)節(jié)病等進(jìn)行鑒別。對(duì)復(fù)治病例,一般可用以下幾種方案:① 2S(E)RHZ/4RH(E),督促化療,保證規(guī)律用藥。處理標(biāo)本或培養(yǎng)物時(shí)產(chǎn)生氣溶膠是實(shí)驗(yàn)室獲得性結(jié)核病的最重要危險(xiǎn)因素,也可通過(guò)損傷的皮膚接觸感染。標(biāo)本應(yīng)留取在封閉的器皿內(nèi)送檢。(2)意外事故的處理 結(jié)核桿菌的滅活方式有化學(xué)的和物理的方法。已從多種食品中分離出該菌,包括肉、乳制品、蔬菜、魚(yú)、土豆、糊、醬油、布丁、炒米飯以及各種甜點(diǎn)等。當(dāng)攝入的食品其蠟樣芽胞桿菌數(shù)量達(dá)106/克時(shí)常可導(dǎo)致食物中毒。致腹瀉的腸毒素能使小白鼠致死。偶有產(chǎn)生黃綠色色素,在血瓊脂平板上呈草綠色溶血。蠟樣芽胞桿菌菌落通常是粉紅色,隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)則更明顯。以下步驟同2。而且蠟樣芽胞桿菌在4℃、鹽濃度 18%的條件下仍能存活或生長(zhǎng)。一般不需要使用抗生素治療。注射和吸取感染材料時(shí),只能使用針頭固定注射器或一次性注射器(即注射器和針頭是一體的)。濺出或偶然事件中,明顯暴露于傳染源時(shí),要立即向?qū)嶒?yàn)室主任報(bào)告。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi),必須使用專用的防護(hù)性外衣、大褂、罩衫或制服。主要引起家畜(羊、馬)的慢性淋巴淋巴管炎,偶爾也會(huì)引起人的淋巴結(jié)炎、肺炎等疾病。菌體單個(gè)或成雙,時(shí)常呈“v”型。對(duì)于尿素試驗(yàn)認(rèn)為使用尿素斜面比使用尿素液體培養(yǎng)基安全。衛(wèi)生條件差的擁擠人群中最易發(fā)生流行,流行區(qū)的幼兒志賀菌病特別常見(jiàn),而成人得病較輕。嚴(yán)重的里急后重可造成直腸脫垂和大便失禁。二、細(xì)菌的生物學(xué)特性志賀菌(Shigella)隸屬于腸桿菌科,分為A,B,C,D4個(gè)亞群——A群痢疾志賀菌、B群福氏志賀菌、C群鮑特志賀菌和D群宋內(nèi)志賀菌,而各亞群又可分各種血清決定型。志賀菌的致病因素主要有:;:各群志賀菌都能形成強(qiáng)烈的內(nèi)毒素,其作用機(jī)制包括:破壞腸粘膜上皮,造成粘膜下層炎癥,并有毛細(xì)血管血栓形成,以致壞死,脫落,形成潰瘍,出現(xiàn)粘液膿血便;使腸壁通透性增高,促進(jìn)毒素吸收,引起一系列毒血癥的癥狀,如發(fā)熱,神志障礙,甚至中毒性休克;作用于腸壁植物神經(jīng),使腸蠕動(dòng)失調(diào)并痙攣,尤以直腸括約肌受累明顯,因而發(fā)生腹痛,腹瀉,里急后重等癥狀;:A群志賀菌Ⅰ型和Ⅱ型能產(chǎn)生志賀外毒素(ST), ST能引起Vero細(xì)胞病變,故也稱Vero毒素(VT)?!〖毙云诎准?xì)胞總數(shù)輕至中度增高,多在(10~20)109/L,中性粒細(xì)胞亦增高。,這點(diǎn)可鑒別細(xì)菌性和阿米巴痢疾(因阿米巴可破壞白細(xì)胞)。房屋應(yīng)使用蚊帳紗和屏障?!≡跊Q定應(yīng)用抗生素時(shí),應(yīng)考慮到疾病的嚴(yán)重程度,病人的年齡、衛(wèi)生狀況,進(jìn)一步傳播的可能性和造成細(xì)菌耐抗生素的可能性等因素。食物應(yīng)存放在工作區(qū)域以外專用櫥柜或冰箱中。所有的培養(yǎng)物、儲(chǔ)存物及其它規(guī)定的廢物在釋放前,均應(yīng)使用可行的消毒方法進(jìn)行消毒,如高壓滅菌。確定可能形成傳染性氣溶膠或?yàn)R出物的實(shí)驗(yàn)過(guò)程,包括離心、研磨、勻漿、劇烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開(kāi)啟裝有傳染源的容器、采集感染標(biāo)本等。要備有帶滑石粉的乳膠手套。 陰溝腸桿菌的生物危害評(píng)估報(bào)告一、細(xì)菌的傳播與致病陰溝腸桿菌廣泛分布于環(huán)境中,土壤、水、污水、腐爛蔬菜和乳制品亦可發(fā)現(xiàn),在陰溝污水中含量可高達(dá)107/g。當(dāng)必須在生物安全柜外處理標(biāo)本時(shí),需采取面部保護(hù)措施(跟鏡、口罩、面罩、或其他防濺裝置),以免傳染源或其他有害物濺或?yàn)⒌矫嫔?。離開(kāi)該系統(tǒng)進(jìn)行消毒的物料,在轉(zhuǎn)移前應(yīng)包裝,其包裝應(yīng)符合有關(guān)的法規(guī)。對(duì)于污染的銳器,必須時(shí)刻保持高度的警惕,包括針、注射器、玻片、加樣器等。成人還可用諾氟沙星400mg口服每日2次或環(huán)丙沙星500mg口服每日2次。此外還包括加強(qiáng)水源管理及食品衛(wèi)生監(jiān)督等3 口服菌苗預(yù)防 有鏈霉素依賴 (Sd) 株及口服重組活菌苗。,培育48h后發(fā)現(xiàn)帶有熒光的菌球?yàn)殛?yáng)性。可用拭子從潰瘍處取材作涂片檢查或培養(yǎng)。ST具有細(xì)胞毒素,腸毒素和神經(jīng)毒素3種生物學(xué)活性:腸毒素性,;細(xì)胞毒性,它可以阻止小腸上皮細(xì)胞對(duì)糖和氨基酸的吸收;神經(jīng)毒性,在痢疾志賀菌引起的重癥感染者可作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng),造成昏迷或腦膜炎 ;ST在體外還可加重對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷。志賀菌為兼性厭氧菌,對(duì)理化因素的抵抗力較弱,對(duì)酸敏感,在1%的石炭酸中15~30min可被殺死,因此運(yùn)輸時(shí)必須采用含有緩沖劑的培養(yǎng)基。伴有循環(huán)虛脫的明顯脫水和電解質(zhì)喪失及死亡主要發(fā)生于<2歲的嬰兒和衰弱的成人;(2)慢性細(xì)菌性痢疾 主要是因急性菌痢治療不徹底,造成反復(fù)發(fā)作遷延不愈,病程超過(guò)兩個(gè)月以上者;若是有病史、無(wú)癥狀,結(jié)腸鏡檢或糞便培養(yǎng)陽(yáng)性者稱為隱匿型菌痢,在流行病學(xué)上亦具有重要的意義;(3)攜帶者 是指恢復(fù)期帶菌、慢性帶菌者和健康帶菌者三種類型,尤其是健康帶菌者是主要的傳染源。感染很少或不誘導(dǎo)產(chǎn)生免疫性,因此同一菌種的再感染是可能的。志賀氏菌屬的生物危害評(píng)估報(bào)告一、細(xì)菌的傳播與致病志賀菌屬是主要的腸道病原菌之一,也是引起人類細(xì)菌性痢疾的病原體。:血平板-皮膚拭子培養(yǎng):510%CO2 3537℃ 4048h;喉拭子培養(yǎng):厭氧,3537℃ 1624h;菌落周圍有微小的B溶血環(huán);Hoyle 亞碲酸鹽培養(yǎng)基: 3537℃ 1648h:灰色/黑色,非常干燥的透明菌落。細(xì)菌末端膨大呈棒狀,菌體有時(shí)成單或成雙。防護(hù)服可以在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)處理,也可以在洗衣房中洗滌,但不能帶回家中。按日常程序、在有關(guān)傳染源的工作結(jié)束后、尤其是傳染源濺出或?yàn)⒊龊?、或受到其他傳染源污染后,?shí)驗(yàn)室設(shè)備和工作臺(tái)面應(yīng)當(dāng)使用有效的消毒劑消毒。非一次性銳器必須放置在堅(jiān)壁容器中,轉(zhuǎn)移至處理區(qū)消毒,最好高壓殺菌。五、細(xì)菌的生物安全防護(hù)根據(jù)《病原微生物生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》中的有關(guān)規(guī)定,人間傳播的微生物名錄(待頒布)蠟樣芽胞桿菌屬于三類,BSL2。、噬菌體分型。無(wú)菌操作稱取樣品50g放入滅菌攪拌缸內(nèi)。能分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、水楊素等,VP實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性,可液化明膠,卵磷脂酶陽(yáng)性,但多次傳代后,其生化特性??筛淖?。根據(jù)營(yíng)養(yǎng)型菌細(xì)胞的寬度分為兩類,蠟樣芽胞桿菌、蕈狀芽胞桿菌、蘇云金芽胞桿菌、炭疽芽胞桿菌和巨大芽胞桿菌屬“大細(xì)胞菌種”。中毒癥狀以惡心、嘔吐為主,偶而有腹痙攣或腹瀉等癥狀,病程不超過(guò)24小時(shí),這種類型的癥狀類似于由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒。 1950年Hauge在對(duì)挪威奧斯陸某醫(yī)院職工和病員進(jìn)食甜食后引起的食物中毒研究中,首次明確指出蠟樣芽胞桿菌的致病作用??捎帽任廴久娣e大25%以上的紗布覆蓋污染區(qū)域,邊緣用脫脂棉圍住,向紗布傾倒5%苯酚溶液或75%的乙醇溶液,浸泡2小時(shí)以上(其間適量添加溶液防止干燥),再經(jīng)紫外燈近距離(1米內(nèi))照射2小時(shí)以上;被污染的器械、容器等立即浸泡于75%乙醇溶液中2小時(shí)以上,實(shí)驗(yàn)完成后再進(jìn)行高壓消毒處理;4)如果發(fā)生氣溶膠污染或大面積污染,應(yīng)立即停止實(shí)驗(yàn)
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