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微生物實驗室病原微生物評估報告(完整版)

2025-05-13 03:30上一頁面

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【正文】 中生長。葡萄球菌形成的感染易局部化與此酶有關;:金黃色葡萄球菌產生的脫氧核糖核酸酶能耐受高溫,可用來作為依據鑒定金黃色葡萄球菌;:金黃色葡萄球菌能產生數(shù)種引起急性胃腸炎的蛋白質性腸毒素,分為A、B、C、D、E及F五種血清型。突然出現(xiàn)心臟雜音,膿毒性栓子和其他經典體征便可作出可疑診斷,確診需依據超聲心動圖和血培養(yǎng)。 金黃色葡萄球菌的流行病學一般有如下特點:季節(jié)分布,多見于春夏季;中毒食品種類多,如奶、肉、蛋、魚及其制品。(10)微生物、PCR實驗室要設置紗窗、擋鼠板。當估計會出現(xiàn)微生物和危險物濺出時要戴好眼罩或面罩。(2)工作人員要戴口罩、手套進行操作。(6)無菌物品如棉球需每天更換,開啟后使用不得超過24小時。(6)平衡:離心時應保持合適的平衡,以保證離心的順利進行。(4)破裂的玻璃器具和玻璃碎片應丟棄在有專門標記的、單獨的、不易刺破的容器里。具危險性的液體如酸或堿性液體應放在視平線以下。(4)垃圾處理:每天至少清理垃圾一次。未戴手套的人員如果使用該區(qū)域內的電話、計算機終端或其它設備,應該戴上手套,或在使用后立即徹底洗手。謹慎處理針頭、解剖刀、和碎玻璃等銳利物品。在有可能發(fā)生液體濺溢的工作崗位,可加套一次性防滲漏鞋套。(3)使用、處理能夠通過粘膜和皮膚感染的試劑,或有可能發(fā)生試劑濺溢的情況時,必須佩帶護目鏡、面罩或面具式呼吸器。根據《實驗室生物安全通用要求》,本檢驗科不涉及《人間傳染的病原微生物名錄》中高致病性微生物的分離培養(yǎng)及高致病性微生物的菌、毒種的保藏,實驗室采用一定防護措施就能控制感染或防范災害,或者對相應病原體存在有效的免疫方法。評估我檢驗科生物安全防護水平按二級實驗室(BSL2)生物安全要求。5. 實驗中服裝和個人防護裝備的一般要求(1)應穿著符合實驗室工作需要的服裝,工作服應干凈、整潔。帆布鞋可吸收化學物品和有傳染性的液體,所以最好穿皮革或其它防滲漏的合成材料的鞋。使用后的針具不要折斷、彎曲、破損、重復使用或用手重裝在針管上。“清潔”和“非清潔”區(qū)都應保持整潔。(5)裝飾:不得在電燈、燈座或儀器上進行裝飾,更不要使用電子裝飾物、蠟燭、圣誕樹等有引起火災危險的裝飾品。較大的廢棄物容器應靠近地面存放。(5)高熱操作玻璃器具時應戴隔熱手套。16.采集血樣的危害評估及防護感染途徑危害評估感染途徑危害評估感染途徑危害評估皮膚極少粘膜(眼結膜)極少呼吸道可能消化道(經手口)極少經血(針刺傷、切割傷)可能經血(蟲媒介)極少盜竊可能化學腐蝕極少放射無(1)每天早晨用500mg/L的”84”消毒液擦拭抽血臺面及其它物表,并開紫外燈消毒至少30分鐘,并做好記錄。(7)工作人員需對銳器如采血針采取高度預防措施,用過的采血針需浸泡在含有消毒液的厚壁容器中。(3)實驗中使用的竹簽用后要用1000mg/L“84”消毒液浸泡。(3)操作中使用的接種環(huán)、鑷子等金屬物品要在酒精燈火焰上燒灼滅菌。三、特定實驗活動危害評估(見以下章節(jié)之各種病原體的危害評估) 工作人員素質 本實驗室共有技術人員13名,其中申請進入BSL2實驗室13名。此外,剩飯、油煎蛋、糯米糕及涼粉等引起的中毒事件也有報道;上呼吸道感染患者鼻腔帶菌率83%,所以人畜化膿性感染部位常成為污染源。 葡萄球菌性骨髓炎主要見于兒童,可引起寒戰(zhàn),發(fā)熱和受累骨疼痛,繼之出現(xiàn)紅腫。腸毒素可耐受100176??煞纸馄咸烟?、麥芽糖、乳糖、蔗糖,產酸不產氣。該菌在普通肉湯中呈均勻迅速混濁生長;若接種于瓊脂平板上35℃過夜后可形成直徑約2~3mm的厚菌落、濕潤有光澤、呈金黃色不透明圓形凸起。玻片法:將待試菌落乳化于玻片上的鹽水中,經10~20S證實無自凝后,用接種環(huán)取人或兔血漿一環(huán),與乳化菌液混合,出現(xiàn)凝集者為陽性,另設生理鹽水為陰性對照。 用酶聯(lián)免疫吸附試驗和對流免疫電泳方法可檢測金葡菌的磷壁酸抗體。已被感染的病人應與其他易感病人隔離,患有活動性葡萄球菌感染,即使是局部性的感染(如癤)的醫(yī)護人員,在其感染治愈前不得接觸病人或器械。很多葡萄球菌菌株對紅霉素,四環(huán)素類藥物,氨基糖苷類,桿菌肽和氯霉素也敏感,但因有更好更安全的藥可用,故很少使用氯霉素和桿菌肽??捎糜谔娲f古霉素治療MRSA感染的藥物有:TMPSMZ,成人劑量為TMP10~15mg /()加SMZ50~75mg/(),分劑口服或腸外給藥,每次間隔8小時或12小時,連續(xù)2~4周;利福平(600mg/d)口服或腸外給藥;腸外給亞胺培南西拉司丁(500mg每6小時1次)或美羅匹寧(~。二、細菌的生物安全防護 根據《病原微生物生物實驗室生物安全管理條例》中的有關規(guī)定,人間傳播的微生物名錄(待頒布)金黃色葡萄球菌屬于三類,BSL2。非一次性銳器必須放置在堅壁容器中,轉移至處理區(qū)消毒,最好高壓殺菌。按日常程序、在有關傳染源的工作結束后、尤其是傳染源濺出或灑出后、或受到其他傳染源污染后,實驗室設備和工作臺面應當使用有效的消毒劑消毒。防護服可以在實驗室內處理,也可以在洗衣房中洗滌,但不能帶回家中。其傳播途徑主要包括性交傳染,還可通過非性接觸傳播,如通過接觸患者分泌物污染的用品(衣褲、床上用品、毛巾、浴盆、馬桶等)間接感染;孕婦淋病患者當羊膜破裂,可繼發(fā)羊膜腔內及胎兒感染;新生兒經過患淋病的母體產道時??梢鹆芫匝垩?;另外尚可通過醫(yī)護人員的手和器具引起醫(yī)源性感染。人工培養(yǎng)后形態(tài)亦常呈球形、單個、成雙或四聯(lián)排列。淋球菌在血瓊脂培養(yǎng)基孵育24小時后,~1mm的圓形稍隆起,濕潤光滑,半透明,邊緣呈花瓣狀,有粘性的露滴狀菌。三、淋病奈瑟菌的實驗室檢查及其診斷細菌的實驗室檢查及其它檢查(1) 涂片檢查:取患者尿道分泌物或宮頸分泌物,作革蘭氏染色,在多形核白細胞內找到革蘭氏陰性雙球菌。國內采用巧克力瓊脂或血瓊脂培養(yǎng)基,均含有抗生素,可選擇地抑制許多其他細菌生長。但目前在男女二性標本的敏感不高,特異性差,加之實驗人員的判斷水平,故該實驗尚不能推薦用來診斷淋球菌感染。對于污染的銳器,必須時刻保持高度的警惕,包括針、注射器、玻片、加樣器等。離開該系統(tǒng)進行消毒的物料,在轉移前應包裝,其包裝應符合有關的法規(guī)。當必須在生物安全柜外處理標本時,需采取面部保護措施(跟鏡、口罩、面罩、或其他防濺裝置),以免傳染源或其他有害物濺或灑到面上。結核桿菌的生物危害評估報告一、結核桿菌的傳播與致病結核桿菌通常指結核分枝桿菌和牛分枝桿菌,其中結核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)是引起人類結核病的主要病原體。 感染結核桿菌后,終身都有可能發(fā)病,發(fā)病時間因人而異,一般2個月~20年才發(fā)病。若并發(fā)氣胸或大量胸腔積液,呼吸困難癥狀尤為嚴重。此外結核桿菌菌體還具有多形態(tài)特征,受不良生長條件的影響可分別表現(xiàn)為桿菌型 (基本形態(tài))、濾過型、顆粒型和球菌型(L型)4種不同的類型。培養(yǎng)法更為精確,尚可作藥物敏感試驗與菌型鑒定。③ 結核菌素試驗:是診斷結核感染的參考指標。血沉增快常見于活動性肺結核。還應注意將結核病與肺癌、肺炎、支氣管擴張、慢性支氣管哮喘和其它發(fā)熱性疾病如傷寒、敗血癥、白血病、縱隔淋巴瘤及結節(jié)病等進行鑒別。對復治病例,一般可用以下幾種方案:① 2S(E)RHZ/4RH(E),督促化療,保證規(guī)律用藥。處理標本或培養(yǎng)物時產生氣溶膠是實驗室獲得性結核病的最重要危險因素,也可通過損傷的皮膚接觸感染。標本應留取在封閉的器皿內送檢。(2)意外事故的處理 結核桿菌的滅活方式有化學的和物理的方法。已從多種食品中分離出該菌,包括肉、乳制品、蔬菜、魚、土豆、糊、醬油、布丁、炒米飯以及各種甜點等。當攝入的食品其蠟樣芽胞桿菌數(shù)量達106/克時??蓪е率澄镏卸?。致腹瀉的腸毒素能使小白鼠致死。偶有產生黃綠色色素,在血瓊脂平板上呈草綠色溶血。蠟樣芽胞桿菌菌落通常是粉紅色,隨著培養(yǎng)時間的延長則更明顯。以下步驟同2。而且蠟樣芽胞桿菌在4℃、鹽濃度 18%的條件下仍能存活或生長。一般不需要使用抗生素治療。注射和吸取感染材料時,只能使用針頭固定注射器或一次性注射器(即注射器和針頭是一體的)。濺出或偶然事件中,明顯暴露于傳染源時,要立即向實驗室主任報告。在實驗室內,必須使用專用的防護性外衣、大褂、罩衫或制服。主要引起家畜(羊、馬)的慢性淋巴淋巴管炎,偶爾也會引起人的淋巴結炎、肺炎等疾病。菌體單個或成雙,時常呈“v”型。對于尿素試驗認為使用尿素斜面比使用尿素液體培養(yǎng)基安全。衛(wèi)生條件差的擁擠人群中最易發(fā)生流行,流行區(qū)的幼兒志賀菌病特別常見,而成人得病較輕。嚴重的里急后重可造成直腸脫垂和大便失禁。二、細菌的生物學特性志賀菌(Shigella)隸屬于腸桿菌科,分為A,B,C,D4個亞群——A群痢疾志賀菌、B群福氏志賀菌、C群鮑特志賀菌和D群宋內志賀菌,而各亞群又可分各種血清決定型。志賀菌的致病因素主要有:;:各群志賀菌都能形成強烈的內毒素,其作用機制包括:破壞腸粘膜上皮,造成粘膜下層炎癥,并有毛細血管血栓形成,以致壞死,脫落,形成潰瘍,出現(xiàn)粘液膿血便;使腸壁通透性增高,促進毒素吸收,引起一系列毒血癥的癥狀,如發(fā)熱,神志障礙,甚至中毒性休克;作用于腸壁植物神經,使腸蠕動失調并痙攣,尤以直腸括約肌受累明顯,因而發(fā)生腹痛,腹瀉,里急后重等癥狀;:A群志賀菌Ⅰ型和Ⅱ型能產生志賀外毒素(ST), ST能引起Vero細胞病變,故也稱Vero毒素(VT)。 急性期白細胞總數(shù)輕至中度增高,多在(10~20)109/L,中性粒細胞亦增高。,這點可鑒別細菌性和阿米巴痢疾(因阿米巴可破壞白細胞)。房屋應使用蚊帳紗和屏障?!≡跊Q定應用抗生素時,應考慮到疾病的嚴重程度,病人的年齡、衛(wèi)生狀況,進一步傳播的可能性和造成細菌耐抗生素的可能性等因素。食物應存放在工作區(qū)域以外專用櫥柜或冰箱中。所有的培養(yǎng)物、儲存物及其它規(guī)定的廢物在釋放前,均應使用可行的消毒方法進行消毒,如高壓滅菌。確定可能形成傳染性氣溶膠或濺出物的實驗過程,包括離心、研磨、勻漿、劇烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開啟裝有傳染源的容器、采集感染標本等。要備有帶滑石粉的乳膠手套。 陰溝腸桿菌的生物危害評估報告一、細菌的傳播與致病陰溝腸桿菌廣泛分布于環(huán)境中,土壤、水、污水、腐爛蔬菜和乳制品亦可發(fā)現(xiàn),在陰溝污水中含量可高達107/g。當必須在生物安全柜外處理標本時,需采取面部保護措施(跟鏡、口罩、面罩、或其他防濺裝置),以免傳染源或其他有害物濺或灑到面上。離開該系統(tǒng)進行消毒的物料,在轉移前應包裝,其包裝應符合有關的法規(guī)。對于污染的銳器,必須時刻保持高度的警惕,包括針、注射器、玻片、加樣器等。成人還可用諾氟沙星400mg口服每日2次或環(huán)丙沙星500mg口服每日2次。此外還包括加強水源管理及食品衛(wèi)生監(jiān)督等3 口服菌苗預防 有鏈霉素依賴 (Sd) 株及口服重組活菌苗。,培育48h后發(fā)現(xiàn)帶有熒光的菌球為陽性??捎檬米訌臐兲幦〔淖魍科瑱z查或培養(yǎng)。ST具有細胞毒素,腸毒素和神經毒素3種生物學活性:腸毒素性,;細胞毒性,它可以阻止小腸上皮細胞對糖和氨基酸的吸收;神經毒性,在痢疾志賀菌引起的重癥感染者可作用于中樞神經系統(tǒng),造成昏迷或腦膜炎 ;ST在體外還可加重對血管內皮細胞的損傷。志賀菌為兼性厭氧菌,對理化因素的抵抗力較弱,對酸敏感,在1%的石炭酸中15~30min可被殺死,因此運輸時必須采用含有緩沖劑的培養(yǎng)基。伴有循環(huán)虛脫的明顯脫水和電解質喪失及死亡主要發(fā)生于<2歲的嬰兒和衰弱的成人;(2)慢性細菌性痢疾 主要是因急性菌痢治療不徹底,造成反復發(fā)作遷延不愈,病程超過兩個月以上者;若是有病史、無癥狀,結腸鏡檢或糞便培養(yǎng)陽性者稱為隱匿型菌痢,在流行病學上亦具有重要的意義;(3)攜帶者 是指恢復期帶菌、慢性帶菌者和健康帶菌者三種類型,尤其是健康帶菌者是主要的傳染源。感染很少或不誘導產生免疫性,因此同一菌種的再感染是可能的。志賀氏菌屬的生物危害評估報告一、細菌的傳播與致病志賀菌屬是主要的腸道病原菌之一,也是引起人類細菌性痢疾的病原體。:血平板-皮膚拭子培養(yǎng):510%CO2 3537℃ 4048h;喉拭子培養(yǎng):厭氧,3537℃ 1624h;菌落周圍有微小的B溶血環(huán);Hoyle 亞碲酸鹽培養(yǎng)基: 3537℃ 1648h:灰色/黑色,非常干燥的透明菌落。細菌末端膨大呈棒狀,菌體有時成單或成雙。防護服可以在實驗室內處理,也可以在洗衣房中洗滌,但不能帶回家中。按日常程序、在有關傳染源的工作結束后、尤其是傳染源濺出或灑出后、或受到其他傳染源污染后,實驗室設備和工作臺面應當使用有效的消毒劑消毒。非一次性銳器必須放置在堅壁容器中,轉移至處理區(qū)消毒,最好高壓殺菌。五、細菌的生物安全防護根據《病原微生物生物實驗室生物安全管理條例》中的有關規(guī)定,人間傳播的微生物名錄(待頒布)蠟樣芽胞桿菌屬于三類,BSL2。、噬菌體分型。無菌操作稱取樣品50g放入滅菌攪拌缸內。能分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、水楊素等,VP實驗陽性,可液化明膠,卵磷脂酶陽性,但多次傳代后,其生化特性常可改變。根據營養(yǎng)型菌細胞的寬度分為兩類,蠟樣芽胞桿菌、蕈狀芽胞桿菌、蘇云金芽胞桿菌、炭疽芽胞桿菌和巨大芽胞桿菌屬“大細胞菌種”。中毒癥狀以惡心、嘔吐為主,偶而有腹痙攣或腹瀉等癥狀,病程不超過24小時,這種類型的癥狀類似于由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒。 1950年Hauge在對挪威奧斯陸某醫(yī)院職工和病員進食甜食后引起的食物中毒研究中,首次明確指出蠟樣芽胞桿菌的致病作用??捎帽任廴久娣e大25%以上的紗布覆蓋污染區(qū)域,邊緣用脫脂棉圍住,向紗布傾倒5%苯酚溶液或75%的乙醇溶液,浸泡2小時以上(其間適量添加溶液防止干燥),再經紫外燈近距離(1米內)照射2小時以上;被污染的器械、容器等立即浸泡于75%乙醇溶液中2小時以上,實驗完成后再進行高壓消毒處理;4)如果發(fā)生氣溶膠污染或大面積污染,應立即停止實驗
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