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微生物實(shí)驗(yàn)室病原微生物評(píng)估報(bào)告-免費(fèi)閱讀

2025-05-01 03:30 上一頁面

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【正文】 脫掉手套后,要洗手。涉及高濃度或大體積的傳染源時(shí),若選用密封轉(zhuǎn)頭或帶安全罩的離心機(jī),若轉(zhuǎn)頭或安全罩僅在生物安全柜中打開,則可在開放實(shí)驗(yàn)室內(nèi)離心。轉(zhuǎn)移到就近實(shí)驗(yàn)室消毒的物料應(yīng)置于耐用、防漏容器內(nèi),密封運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室。所有的操作過程應(yīng)盡量細(xì)心,避免產(chǎn)生和濺出氣溶膠。此外,早期用適當(dāng)?shù)目晌盏目咕幬镏委?可明顯減輕癥狀和減少志賀菌的排出:對(duì)兒童,TMPSMX中的TMP成分4mg/kg每12小時(shí)1次為首選方案;對(duì)成人,用雙倍加強(qiáng)片(TMP320mg)每12小時(shí)1次。對(duì)病人和帶菌者應(yīng)采取相應(yīng)的隔離措施(特別是對(duì)糞便的隔離)。:將受試菌 37℃1824h 制備菌液(109/ml) 接種豚鼠結(jié)膜:發(fā)生炎癥,則Senery試驗(yàn)陽性,說明受試菌有毒力,在顯微鏡觀察有無凝集現(xiàn)象。 A亞單位鏈為毒性部分能抑制蛋白質(zhì)的合成 。它們均為革蘭氏陰性桿菌,菌體短小、無芽胞無鞭毛,有菌毛,在胞質(zhì)中存在著大小兩種質(zhì)粒,與該菌的侵襲性和耐藥性有關(guān)。成人患病??勺杂狠p者4~8日,重者3~6周。恢復(fù)期和亞臨床帶菌者是重要傳染源,但真正的長期帶菌者罕見。在運(yùn)送時(shí)還應(yīng)當(dāng)遵守郵政局的危險(xiǎn)品運(yùn)送手冊(cè),如果以上的初步試驗(yàn)提示該菌株是假結(jié)核棒狀桿菌,需立即通知上級(jí)相關(guān)單位,并根據(jù)實(shí)驗(yàn)室安全手冊(cè)進(jìn)行隔離。有些菌體染色微弱或不均勻,呈珠狀。二、細(xì)菌的生物學(xué)特性 假結(jié)核棒狀桿菌屬于棒狀桿菌屬,是一種兼性厭氧,沒有芽胞、沒有莢膜,抗酸陰性的革蘭陽性桿菌。人員到非實(shí)驗(yàn)室區(qū)域時(shí),防護(hù)服必須留在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。進(jìn)行適當(dāng)?shù)尼t(yī)學(xué)評(píng)估、觀察、治療,保留書面記錄。用過的一次性針頭必須彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉,或在丟棄前進(jìn)行人工處理,要不將之小心放入不會(huì)被刺穿的、用于收集廢棄銳器的容器中。腹瀉較重者可到醫(yī)院就診。通過高溫殺菌或適當(dāng)?shù)睦洳乜梢钥刂葡灅友堪麠U菌的增殖。如果上述反應(yīng)不清晰,應(yīng)將平板再培養(yǎng)24小時(shí)后計(jì)數(shù),從MYP平板上挑取典型菌落5個(gè)或更多,移種到營養(yǎng)瓊脂斜面上供蠟樣芽胞桿菌證實(shí)試驗(yàn)用。在甘露醇、卵黃多粘菌素(MYP)平板上,呈伊紅粉色菌落。二、細(xì)菌的生物學(xué)特性 蠟樣芽胞桿菌分類為芽胞桿菌屬的第I群,該群有22個(gè)種。蠟樣芽胞桿菌食物中毒在臨床上可分為嘔吐型和腹瀉型兩類。在美國,炒米飯是引發(fā)蠟樣芽胞桿菌嘔吐型食物中毒的主要原因;在歐洲大都由甜點(diǎn)、肉餅、色拉和奶、肉類食品引起;在我國則主要與受污染的米飯或淀粉類制品有關(guān)。實(shí)驗(yàn)過程中:1)如標(biāo)本或標(biāo)本的前消化處理液被打翻污染操作臺(tái)或地面,應(yīng)以吸滿75%已乙醇溶液的衛(wèi)生紙覆蓋污染區(qū),15分鐘以后衛(wèi)生紙方可移去;2)如污染物濺落到身體表面,或有割傷、刺傷、燒傷、燙傷等情況發(fā)生,應(yīng)立即停止實(shí)驗(yàn)工作進(jìn)行緊急處理:更換被污染的實(shí)驗(yàn)服裝,皮膚表面用消毒液清洗,傷口以碘酒及酒精消毒,眼睛用無菌生理鹽水沖洗;3)如果發(fā)生菌液溢出、帶菌的培養(yǎng)管破碎等,造成中、小面積污染。檢驗(yàn)人員應(yīng)穿戴防護(hù)服、口罩、手套等防護(hù)裝備,嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程,實(shí)驗(yàn)室空氣、實(shí)驗(yàn)臺(tái)面應(yīng)定時(shí)消毒。因此首先應(yīng)樹立全程防護(hù)的觀念,全面加強(qiáng)從事結(jié)核桿菌科研、檢測、試劑和疫苗生產(chǎn)機(jī)構(gòu)的生物安全管理。② 初治規(guī)則治療失敗的患者,可用2S3H3Z3E3/6H3R3E3;③ 慢性排菌者可用敏感的一線藥與二線藥聯(lián)用,應(yīng)嚴(yán)密觀察藥物不良反應(yīng),療程以6~12個(gè)月為宜。 四、結(jié)核桿菌的防治及生物安全防護(hù)細(xì)菌的防治 根據(jù)《中華人民共和國傳染病防治法》和《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》中的有關(guān)規(guī)定,結(jié)核病屬于乙類傳染病,按照乙類傳染病進(jìn)行預(yù)防控制。用ELISA法檢測患者血清中特異性抗體,可對(duì)無痰或痰菌陰性者和肺外結(jié)核的診斷提供參考。使用的變應(yīng)原有舊結(jié)核菌素(old tuberculin, OT)和結(jié)核菌素的純化蛋白衍化物(purified protein derivative, PPD),現(xiàn)臨床多用PPD。但結(jié)核菌生長緩慢,培養(yǎng)較為費(fèi)時(shí),但精確可靠,特異性高。 分枝桿菌生長緩慢,在人工培養(yǎng)基內(nèi)繁殖一代約需1520小時(shí),一般需24周或更長時(shí)間始見菌落生長,甚至有極少數(shù)生長極為緩慢者需8周以上才開始有菌落生長。(2)體征 早期病灶小或位于肺組織深部,多無異常體征。典型肺結(jié)核起病緩慢,病程較長,有低熱、倦怠、食欲不振、咳嗽及少量咯血。 結(jié)核分枝桿菌的主要傳染途徑是經(jīng)呼吸道傳播,由排菌的肺結(jié)核病人在咳嗽、噴嚏或大聲說話時(shí)隨呼吸道分泌物排出到空氣中,或排菌的肺結(jié)核病人隨地吐痰通過再生氣溶膠(塵埃),攜帶結(jié)核桿菌,飛揚(yáng)在空氣中,被健康的人吸入后發(fā)生感染和發(fā)病,因此排菌的肺結(jié)核患者(尤其是痰涂片陽性未經(jīng)治療者)是結(jié)核病的主要傳染源。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi),必須使用專用的防護(hù)性外衣、大褂、罩衫或制服。濺出或偶然事件中,明顯暴露于傳染源時(shí),要立即向?qū)嶒?yàn)室主任報(bào)告。注射和吸取感染材料時(shí),只能使用針頭固定注射器或一次性注射器(即注射器和針頭是一體的)。,不與家人、小孩(尤其女孩)同床、共浴。(4)基因診斷1.淋球菌的基因探針診斷:淋球菌的基因探針診斷,所用的探針有:質(zhì)粒DNA探針,染色體基因探針和rRNA基因探針。在36℃,70%濕度,含 5%10%CO2(燭缸)環(huán)境中培養(yǎng),2448小時(shí)觀察結(jié)果。涂片對(duì)有大量膿性分泌物的單純淋菌性前尿道炎患者,此法陽性率在90%左右,可以初步診斷。 淋球菌適于潮濕(相對(duì)溫度80%~85%)、溫暖(℃~℃)、中性偏堿(~)、含5%~10%二氧化碳的條件下生長。 本病最初多侵犯尿道、宮頸內(nèi)膜,繼而可波及前列腺、精囊、副睪、子宮內(nèi)膜及輸卵管??赡芙佑|潛在傳染源、被污染的表面或設(shè)備時(shí),要戴手套。污染的設(shè)備在送去修理、維護(hù)前,要按照相關(guān)的規(guī)定消毒;在離開設(shè)施轉(zhuǎn)移前,要按照相關(guān)的規(guī)定打包運(yùn)輸。打碎的器皿不能直接用手處理,必須用其它工具處理,如刷子和簸箕、夾子或鑷子。相關(guān)的防護(hù)事宜包括:(1)操作要求實(shí)驗(yàn)時(shí),未經(jīng)實(shí)驗(yàn)室主任同意,限制或禁止進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。但利福平不要單獨(dú)應(yīng)用,因?yàn)榧?xì)菌很易產(chǎn)生抗藥性。 目前耐甲氧苯青霉素金黃色葡萄球菌(MRSA)菌株日益增多,這種細(xì)菌雖可從社區(qū)獲得感染的病人中分離得到,但多數(shù)是從感染的靜脈吸毒者和重癥監(jiān)護(hù)室的病人中分離獲得。無癥狀的鼻腔帶菌者,除非所帶菌株十分危險(xiǎn)或被懷疑為暴發(fā)流行的傳染源,一般不必隔離。 包括PFGE脈沖場凝膠電泳以及酶切圖譜分析等。試管法:,置37℃培養(yǎng),每隔半小時(shí)觀察一次,連續(xù)觀察6小時(shí),出現(xiàn)凝固,即將小試管傾斜或倒置時(shí),內(nèi)容物不流動(dòng),判為陽性。若接種于血平板,菌落周圍可形成明顯的透明的β—溶血環(huán)。甲基紅反應(yīng)陽性,VP反應(yīng)弱陽性。C煮沸30分鐘而不被破壞。關(guān)節(jié)周圍感染常引起關(guān)節(jié)積液,提示為化膿性關(guān)節(jié)炎而不是骨髓炎。 一般說,金黃色葡萄球菌可通過以下途徑污染食品:食品加工人員、炊事員或銷售人員帶菌,造成食品污染;食品在加工前本身帶菌,或在加工過程中受到了污染,產(chǎn)生了腸毒素,引起食物中毒;熟食制品包裝不嚴(yán),運(yùn)輸過程受到污染;奶?;蓟撔匀橄傺谆蚯菪缶植炕摃r(shí),對(duì)肉體其他部位的污染。學(xué)士學(xué)位3名,5名曾經(jīng)從事微生物學(xué)實(shí)驗(yàn),3名曾經(jīng)從事無菌實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)經(jīng)歷,5名技術(shù)人員學(xué)習(xí)過生物安全手冊(cè)并通過定期培訓(xùn)及考核成績合格,經(jīng)體檢無現(xiàn)患嚴(yán)重疾病,健康狀態(tài)良好。(4)可能產(chǎn)生致病性微生物氣溶膠或出現(xiàn)濺出的操作如涂片、接種時(shí),應(yīng)在生物安全柜內(nèi)操作,并使用個(gè)體防護(hù)設(shè)備。(4)廢棄的標(biāo)本連同試管、蓋帽要用1000mg /L“84”消毒液浸泡,由工人統(tǒng)一清潔后進(jìn)行無害化處理。17. 標(biāo)本(血清、血漿、全血、尿)上檢驗(yàn)分析儀檢測過程的危害評(píng)估及防護(hù)感染途徑危害評(píng)估感染途徑危害評(píng)估感染途徑危害評(píng)估皮膚極少粘膜(眼結(jié)膜)可能呼吸道可能消化道(經(jīng)手口)極少經(jīng)血(針刺傷、切割傷)極少經(jīng)血(蟲媒介)極少盜竊可能化學(xué)腐蝕無放射無(1)為了避免液滴和氣溶膠和擴(kuò)散,實(shí)驗(yàn)室儀器加樣、加液,清洗等過程應(yīng)在封閉罩內(nèi)進(jìn)行的。(2)工人每天早晨更換消毒液,包括浸泡銳器、止血帶的消毒液和手消毒液。(6)在不影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量的前提下,應(yīng)盡量減少使用玻璃器具。(12)出口通路:實(shí)驗(yàn)室的出口和通道必須保持暢通無阻,不準(zhǔn)堆放物品、垃圾、裝置、或設(shè)備。(6)為便于清潔消毒,實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不應(yīng)有織物裝飾的用具或椅子。實(shí)驗(yàn)臺(tái)至少應(yīng)每天清潔、消毒一次,如有必要可以多次清洗、消毒。一次性注射器上的針頭用后不要取下。7. 實(shí)驗(yàn)中頭發(fā)和飾物的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及防護(hù)留長發(fā)的工作人員應(yīng)將頭發(fā)盤在腦后,以防止頭發(fā)接觸到被污染物和避免人體脫屑落入工作區(qū)。當(dāng)工作中有危險(xiǎn)物噴濺到身上的可能時(shí),應(yīng)使用一次性塑料圍裙或防滲外罩。二、實(shí)驗(yàn)人員和實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)的一般要求(1)實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)內(nèi)絕對(duì)禁止吸煙;(2)點(diǎn)燃的香煙是易燃液體的潛在火種;(3)香煙、雪茄或煙斗都是傳染細(xì)菌和接觸毒物的途徑。生物源危害主要是由各種檢驗(yàn)標(biāo)本中的微生物,尤其是病原微生物引起的,包括細(xì)菌、病毒、寄生蟲等,具有潛在危險(xiǎn)性,可能引起實(shí)驗(yàn)室感染;檢驗(yàn)科微生物室還進(jìn)行一定數(shù)量的各種條件致病性細(xì)菌及真菌的分離培養(yǎng)工作,工作過程存在病原微生物對(duì)實(shí)驗(yàn)人員、環(huán)境污染的風(fēng)險(xiǎn);除之以外實(shí)驗(yàn)室還存在觸電、火災(zāi)、化學(xué)品腐蝕、偷盜等危險(xiǎn)。(2)工作人員在實(shí)驗(yàn)室的危險(xiǎn)區(qū)內(nèi)不要佩戴隱形眼鏡,除非同時(shí)使用護(hù)目鏡或面罩。6. 實(shí)驗(yàn)中足部防護(hù)的一般要求在工作區(qū)內(nèi),應(yīng)穿舒適、防滑、并能保護(hù)整個(gè)腳面的鞋。所有實(shí)驗(yàn)室操作禁止用口液移,應(yīng)使用助吸器具。被指定為“非清潔”的區(qū)域,允許戴手套接觸所有物品(如電話、門柄、計(jì)算機(jī)終端和其它物品),所有這些物品的表面都認(rèn)為是不清潔的?!扒鍧崱钡暮汀胺乔鍧崱钡膫€(gè)人防護(hù)服要分開存放。(11)用后的廢棄物品:實(shí)驗(yàn)工作區(qū)內(nèi)的用后廢棄物品存量不要太大。(3)接觸過傳染性物的玻璃器具,清洗之前,應(yīng)先行消毒。(5)清洗:按照消毒隔離制度要求清洗離心機(jī)。微量采血應(yīng)做到一人一針一管一片,對(duì)每位病人操作前洗手或手消毒。18. 標(biāo)本(血清、血漿、全血、尿、糞)手工檢測過程的危害評(píng)估及防護(hù)感染途徑危害評(píng)估感染途徑危害評(píng)估感染途徑危害評(píng)估皮膚可能粘膜(眼結(jié)膜)可能呼吸道可能消化道(經(jīng)手口)可能經(jīng)血(針刺傷、切割傷)可能經(jīng)血(蟲媒介)極少盜竊可能化學(xué)腐蝕可能放射無(1)每天早晨做好實(shí)驗(yàn)室的清潔消毒工作。(2)實(shí)驗(yàn)人員要戴手套、帽子進(jìn)行操作。(9)實(shí)驗(yàn)人員離開實(shí)驗(yàn)室前要去除手套,確認(rèn)無污染或污染已排除,后方可洗手離去。金黃色葡萄球菌腸毒素是個(gè)世界性衛(wèi)生問題,在美國由金黃色葡萄球菌腸毒素引起的食物中毒占整個(gè)細(xì)菌性食物中毒的33%,加拿大則更多,占45%,我國每年發(fā)生的此類中毒事件也非常多。 葡萄球菌性心內(nèi)膜炎特別好發(fā)于靜脈注射給藥者和裝有人工心臟瓣膜的病人。 金黃色葡萄球菌的致病力強(qiáng)弱主要取決于其產(chǎn)生的毒素和侵襲性酶::外毒素,分α、β、γ、δ四種,能損傷血小板,破壞溶酶體,引起肌體局部缺血和壞死;:可破壞人的白細(xì)胞和巨噬細(xì)胞;:當(dāng)金黃色葡萄球菌侵入人體時(shí),該酶使血液或血漿中的纖維蛋白沉積于菌體表面或凝固,阻礙吞噬細(xì)胞的吞噬作用。金黃色葡萄球菌營養(yǎng)要求不高,在普通培養(yǎng)基上生長良好,需氧或兼性厭氧,最適生長溫度35~37℃、~。即具有重要的臨床價(jià)值。而游離型血漿凝固酶則在產(chǎn)生后被分泌到菌體外,不能直接作用于纖維蛋白原,但可以激活血漿凝血酶原,使之轉(zhuǎn)化成凝血酶,后者再作用于纖維蛋白原使其轉(zhuǎn)化為纖維蛋白。其基本原理是在紙片上滴加包被有纖維蛋白原和IgG抗體的聚苯乙烯膠乳,然后用接種環(huán)挑取待鑒定菌株的新鮮培養(yǎng)物加入混勻,若出現(xiàn)凝集塊現(xiàn)象即為陽性。2)防止金黃色葡萄球菌腸毒素的生成 應(yīng)在低溫和通風(fēng)良好的條件下貯藏食物,以防腸毒素形成;在氣溫高的春夏季,食物置冷藏或通風(fēng)陰涼地方也不應(yīng)超過6小時(shí),并且食用前要徹底加熱。大多數(shù)菌株對(duì)耐青霉素酶青霉素(甲氧苯青霉素,苯甲異噁唑青霉素,乙氧萘青霉素,鄰氯青霉素,雙氯青霉素),頭孢菌素(頭孢菌素Ⅰ,頭孢唑啉,頭孢菌素Ⅳ,頭孢拉定,頭孢羥唑,頭孢西丁和第三代頭孢菌素),卡巴培南類(亞胺培南,美羅匹寧),慶大霉素,萬古霉素,替考拉寧,林可霉素和氯林可霉素,是敏感的。腎功能受損時(shí),劑量應(yīng)根據(jù)血清中藥物的濃度加以調(diào)整,療程視感染部位及病人的反應(yīng)而定,但一般為 2~4周。桿菌肽,若有的話,可試用于治療抗萬古霉素的葡萄球菌感染。注射和吸取感染材料時(shí),只能使用針頭固定注射器或一次性注射器(即注射器和針頭是一體的)。濺出或偶然事件中,明顯暴露于傳染源時(shí),要立即向?qū)嶒?yàn)室主任報(bào)告。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi),必須使用專用的防護(hù)性外衣、大褂、罩衫或制服。淋病是淋菌性尿道炎的簡稱,是由淋球菌引起的泌尿生殖系統(tǒng)化膿性炎性疾病,它是人類很古老的,也是當(dāng)前世界范圍內(nèi)流行非常廣泛的一種性傳播疾病。革蘭氏染色陰性,呈粉紅色,美藍(lán)染色呈藍(lán)色。 藉助上述生化特性亦可與腦膜炎球菌及其他奈瑟菌相鑒別。(2)培養(yǎng)檢查:淋球菌培養(yǎng)是診斷的重要佐證,培養(yǎng)法對(duì)癥狀很輕或無癥狀的男性、女性病人都是較敏感的方法,只要培養(yǎng)陽性就可確診,在基因診斷問世以前,培養(yǎng)是世界衛(wèi)生組織推薦的篩選淋病的唯一方法。(3)抗原檢測1.固相酶免疫試驗(yàn)(EIA):可用來檢測臨床標(biāo)本中的淋球菌抗原,在流行率很高的地區(qū)而又不能作培養(yǎng)或標(biāo)本需長時(shí)間遠(yuǎn)送時(shí)使用,可以在婦女人群中用來診斷淋球菌感染。,可應(yīng)用于已知與淋病患者有性接觸者。不許在工作區(qū)域飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化妝。所有的培養(yǎng)物、儲(chǔ)存物及其它規(guī)定的廢物在釋放前,均應(yīng)使用可行的消毒方法進(jìn)行消毒,如高壓滅菌。確定可能形成傳染性濺出物的實(shí)驗(yàn)過程,包括離心、研磨、勻漿、劇烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開啟裝有傳染源的容器、采集感染標(biāo)本等。要備有帶滑石粉的乳膠手套。與患者同處于空氣不流通的室內(nèi)的密切接觸者,受感染的可能性增大。大咯血時(shí)可發(fā)生失血性休克,偶因血塊阻塞大氣道引起窒息。 結(jié)核分枝桿菌正常典型的形態(tài)是直或稍彎曲、兩端鈍圓的桿菌,菌體
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