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正文內(nèi)容

分子生物學(上)(完整版)

2025-05-13 03:16上一頁面

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【正文】 每輪堿基數(shù) 螺旋方向ADNA 20 11 右BDNA 6 10 右ZDNA 7 12 左186。以上可用于解釋原核生物基因組雖小,但卻可以獨立完成整個生命活動的原因(從 DNA上說) 。內(nèi)容:真核生物中 C值隨生物進化而增加,高等低等。核小體:200 個左右堿基對的 DNA與四種組蛋白結(jié)合而成。Geics(遺傳學):由此延伸的分子遺傳學研究了基因結(jié)構(gòu)/復制/表達/重組/突變。2 英國科學家 Griffith證明了什么?肺炎鏈球菌感染實驗證明了 DNA是遺傳物質(zhì)3 Hershy和 Chase通過噬菌體侵染細菌實驗證明了什么?分別用 15S和 32P標記噬菌體蛋白質(zhì)外殼和核酸,感染未百哦機細菌,觀察子代是否有標記。6 Sanger和 Gilbert 發(fā)明了什么技術(shù)?DNA序列分析法(雙螺旋測序)7 誰發(fā)明了 “DNA 體外擴增技術(shù)”?PCR,美國科學家 Mullis8 分子生物學的三大支柱學科是什么?cytology(細胞學):生物體由細胞組成 所有組織的最基本單元——形狀相似,高度分化的細胞。⑤H5 富含 Lys,有種特異性,與 H1無明顯血緣關(guān)系。10 “ C值悖理”的定義及基本含義是什么?c值通常是指一種生物單倍體基因組 DNA的總量。原核生物中可存在數(shù)個多順反子及其他如操縱子()轉(zhuǎn)錄功能單位。B-DNA 中的多聚 G-C 區(qū)易形成左手螺旋 DNA,即 Z-DNA。一個復制子只含一個復制起點。引發(fā)酶:Primase,與 6種蛋白質(zhì)組成引發(fā)體,與 RNA polyase引發(fā)后滯鏈的引物RNA。復制子:一般把生物體的復制單位稱為復制子,一個復制單位只含一個復制起點。16 DNA Polymerase I, II, III性質(zhì)的比較 P47Ⅰ Ⅱ Ⅲ4 / 123’?5’外切 + + +5’?3’外切 + - -新生鏈合成 - - +生物學活性 1 15已知結(jié)構(gòu)基因 polA polB polC都需要模板指導,以 dNTP作為底物,且需要 3’-OH 的引物鏈,聚合反應方向為 5’ ?3’。(2)核苷酸切除:核苷酸發(fā)生損傷后,由 DNA切割酶在已損傷的核苷酸 3’、5’分別切開磷酸糖苷鍵,移去小片斷后由 DNA polyaseI合成新片斷,并由 DNA連接酶完成修復中的最后一道工序。轉(zhuǎn)座:一個轉(zhuǎn)座子由基因組的一個位置轉(zhuǎn)移到另一個位置的過程。 (表明 IS序列插入到某個功能基因兩端時可能產(chǎn)生復合轉(zhuǎn)座子) 。原核:-10TATA 區(qū),-35TTGACA 區(qū),啟動區(qū)范圍較小。全酶:核心酶加上一個 σ 亞基,只有 σ 存在時,轉(zhuǎn)錄起始才進行,σ 亞基為起始亞基。mRNA:編碼特定蛋白質(zhì)序列的信使 RNA。P69酶 細胞內(nèi)定位 轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 相對活性 敏感程度6 / 12DNApolyaseⅠ 核仁 rRNA 50~70% -DNApolyaseⅡ 核質(zhì) hnRNA 20~40% +DNApolyaseⅢ 核質(zhì) tRNA ≈10% 存在物種特異三種聚合酶中有兩個行對分子量超過 1105的大亞基;同種生物 3類聚合酶有“共享”小亞基的傾向。在解鏈區(qū)后面,DFNA 模板鏈與原先配對的非模板鏈重新結(jié)合成雙螺旋。GC區(qū)同上27 原核生物與真核生物 mRNA的特征主要表現(xiàn)在什么地方?單順反子:只編碼一個蛋白質(zhì)的 mRNA稱為單順反子。原核 mRNA5’端無帽子結(jié)構(gòu),3’端無poly(A)或只有較短的 poly(A)幾乎都是單順反子,通過 RNA聚合酶Ⅱ進行轉(zhuǎn)錄。研究表明,當組蛋白 H1與含 CCGG序列的甲基化或非甲基化 DNA分別形成復合體時,DNA 的構(gòu)型存在著很大的差別,甲基化達到一定程度時會發(fā)生從常規(guī)的 BDNA向 ZDNA的過渡。真核生物中 5-mC 主要出現(xiàn)在 5’-CpG-3’序列中,5-mC 脫氨后生成的胸腺嘧啶,不易被識別和矯正。終止效率與二重對稱序列和寡聚 U的長短有關(guān)。保守序列 GUAG,AUAC次要區(qū)別:Ⅰ、Ⅱ型剪接本身具有催化功能,屬于核酸催化,Ⅰ類需游離鳥苷或鳥苷酸啟動,Ⅱ類無需,mRNA 剪接屬于蛋白催化。 在高等真核生物中,內(nèi)含子通常是有序或組成性地從 mRNA前體中被剪接,然而,在個體發(fā)育或細胞分化時可以有選擇性地越過某些外顯子或某個剪接點進行變?yōu)榧艚?,產(chǎn)生組織或發(fā)育階段特異性 mRNA,稱為內(nèi)含子的變位剪接。 除單堿基突變之外,RNA 編輯的另一種形式是尿苷酸的缺失和添加。32 何謂遺傳密碼的簡并性?總共由 64個三聯(lián)體密碼子,除三個終止密碼外(UAA,UAG,UGA) ,其余 61個密碼子編碼 20種 AA,所以許多 AA不只一個遺傳密碼,由一種以上密碼子編碼同一個 AA的現(xiàn)象稱為簡并。結(jié)構(gòu):tRNA 的二級結(jié)構(gòu)為三葉草形,由于小片段堿基互補配對,三葉草形 tRNA分子上有4條根據(jù)它們的結(jié)構(gòu)或已知功能命名的手臂:受體臂,主要由鏈兩端序列堿基配對形成的桿狀結(jié)構(gòu)和 3’端末配對的 3-4 個堿基所組成,其 3’端的最后 3個堿基序列永遠是 CCA,最后一個堿基的 3’或 2’自由羥基(-OH)可以被胺?;?。根據(jù)多余臂的特性,又可以降 tRNA分為兩大類:第一類 tRNA占所有 tRNA的 75%,只含有一條僅為3~5 個核苷酸的多余臂;第二類 tRNA含有一條較大的多余臂,包括桿狀結(jié)構(gòu)上的 5個核苷酸,套索結(jié)構(gòu)上的 3~11 個核苷酸。真核:40S 小亞基——MettRNA Met——mRNA——60S大亞基,形成 80S?mRNA?MettRNAMet復合物。原核:七種成份:①30S 小亞基②模板 mRNA③fMettRNA fMet④3 個翻譯起始因子(IFIFIF3)⑤GTP⑥50S 大亞基⑦Mg 2+翻譯的起始:30S 小亞基首先與翻譯起始因子 IF1,IF2 結(jié)合,通過 SD序列與mRNA模板相結(jié)合。肽鏈延伸由許多循環(huán)組成,每加一個氨基酸就是一個循環(huán),每個循環(huán)包括 AAtRNA與核糖體結(jié)合、肽鍵的生成和位移。二硫鍵的形成。RF3 可能與核糖體的解體有關(guān)。44 信號肽有什么特點?該序列常常位于蛋白質(zhì)的氨基末端,長度一般在 13~36 個殘基之間,有如下 3個特點:12 / 12(1)一般帶有 10~15 個疏水氨基酸;(2)在靠近該序列 N端常常有 1個或數(shù)個帶正電荷的氨基酸;(3)在其 C-末端靠近蛋白酶切割位點處常常帶有數(shù)個極性氨基酸,離切割位點阿最近的那個氨基酸往往帶有很短的側(cè)鏈(丙氨酸或甘氨酸) 。(4)并不是所有的運轉(zhuǎn)蛋白質(zhì)都有可降解的信號肽。信號肽假說: 蛋白質(zhì)合成開始于核糖體,當翻譯進行到 50~70 個氨基酸殘基后,信號肽從大亞基中露出,被粗糙內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上受體識別,并與之結(jié)合??股貙Φ鞍踪|(zhì)合成的作用可能是阻止 mRNA與核糖體結(jié)合(氯霉素) ,或阻止 AAtRNA與核糖體結(jié)合(四環(huán)素類) ,或干擾 AAtRNA與核糖體結(jié)合而產(chǎn)生錯讀(鏈霉素、新霉素、卡那霉素等) ,或作為競爭性抑制劑抑制蛋白質(zhì)合成。特定氨基酸的修飾。肽鍵的生成:AAtRNA 占 A位,fMettRNA fMet占 P位,在肽基轉(zhuǎn)移酶催化下,A 位上的 AAtRNA轉(zhuǎn)移到 P位,與 fMettRNAfMet上的氨基酸生成肽鍵,起始 tRNA在完成使命11 / 12后離開核糖體 P位點,A 位點準備接受新的 AAtRNA,開始下一輪合成反應。帶有 tRNA,mRNA,3 個翻譯起始因子的小亞基復合物與 50S大亞基結(jié)合,GTP 水解,釋放翻譯起始因子。38 為什么核糖體可以與 mRNA上的 SD序列結(jié)合?細菌 30S亞基具有專一性的識別和選擇 mRNA起始點的性質(zhì),二 IF3能協(xié)助該亞基完成這種選擇。tRNA的功
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