【正文】 5. 充分磨好硅膠，后，再邊磨邊加CMCNa溶液；鋪的時(shí)候，如果慢且多，那么有時(shí)會(huì)干了，你還要邊磨邊放點(diǎn)CMCNa溶液。研磨時(shí)最能考驗(yàn)?zāi)愕亩?，我覺(jué)得你該找女生來(lái)磨，但是那種太文弱的不行。 55. 板要絕對(duì)干凈。 48. CMCNa完全溶解后，用布氏漏斗過(guò)濾。過(guò)濾一下，抽濾最好。我的做法是離心，5000rpm離心20min。 CMCNa溶液的配制： 29. ％～％，％～％最為實(shí)用；CMCNa溶液的溶劑應(yīng)用蒸餾水，以盡量減少污染。如果鋪完不久就在較高溫度下，裂口的幾率就比較高的。 顯色： 19. 藥典：顯色裝置 噴霧顯色要求用壓縮氣體使顯色劑呈均勻細(xì)霧狀噴出；浸漬顯色可用專用的玻璃器皿或用適宜的玻璃缸代替；蒸氣熏蒸顯色可用雙槽玻璃缸或適宜大小的干燥器代替。弊端在于將各個(gè)組分從板上刮下的時(shí)候需更小心才不會(huì)使之混雜。然后從中選擇分離效果比較好的組合。 （2）細(xì)分。 展開(kāi)： 12. 藥典：展開(kāi)容器 應(yīng)使用適合薄層板大小的玻璃制薄層色譜展開(kāi)缸，并有嚴(yán)密的蓋子，底部應(yīng)平整光滑，或有雙槽。 薄層色譜法實(shí)踐技巧 目的： 1. 藥典：薄層色譜法系將供試品溶液點(diǎn)于薄層板上，在展開(kāi)容器內(nèi)用展開(kāi)劑展開(kāi)，使供試品所含成分分離，所得色譜圖與事宜的對(duì)照物按同法所得的色譜圖對(duì)比，并可用薄層掃描儀進(jìn)行掃描，用于鑒別、檢查或含量測(cè)定。當(dāng)時(shí)板子鋪得太厚，后來(lái)加長(zhǎng)研磨的時(shí)間就好了。5. 自然干燥后，放入烘干箱烘12小時(shí)以上。顛好的板，表面看上去要光滑平整，沒(méi)有氣孔。2．就是硅膠和CMCNa溶液的比例可以適當(dāng)?shù)恼{(diào)節(jié)，根據(jù)你所需要薄層板的軟硬來(lái)微調(diào)。可以一個(gè)人研磨，一個(gè)人緩慢的倒CMCNa溶液。鋪好的板，要找個(gè)干凈的地方放置晾干，這個(gè)過(guò)程也是耐心的等著它，請(qǐng)勿打擾！自然晾干后，活化一下（105攝氏度40分鐘左右），置于密封的干燥器保存。再在105~110℃活化，~1小時(shí)，冷卻后即可使用。 首先我想說(shuō)的是手工鋪制的板子，只適宜于定性分析，不宜于分離定量。 2. 如果你是做鑒別的話，薄層的系統(tǒng)適用性主要是做檢測(cè)限和分離度； 3. 如果你是做含量測(cè)定，比如說(shuō)用薄層掃描法，薄層的系統(tǒng)適用性應(yīng)該做線性范圍、同板精密度、異板精密度、回收率； 4. 手工鋪制的板子，只適宜于定性分析，不宜于分離定量； 5. 化學(xué)藥一般是作有關(guān)物質(zhì)，需要一定的載藥量，所以要適當(dāng)增加厚度； 6. 中藥一般較難分離，需要薄板，以增加分離度； 7. 手工鋪制的板子常用的有：硅膠G板和硅膠CMCNa板。上行展開(kāi)一般可用適合薄層板大小的專用平底或雙槽展開(kāi)缸，展開(kāi)時(shí)須能密閉。經(jīng)過(guò)粗分之后，我們一般對(duì)各個(gè)部分的極性都能夠做到心中有數(shù)了。 最開(kāi)始可以采用微量圓環(huán)法（將樣品點(diǎn)在中間，然后將流動(dòng)相用毛細(xì)管從原點(diǎn)向圓周擴(kuò)散）和小板實(shí)驗(yàn)法來(lái)摸索，然后再應(yīng)用于大的制備TLC。 15. 當(dāng)展開(kāi)劑極性差別很大時(shí)，特別是極性大的成分所占比例很小時(shí)，往往會(huì)出現(xiàn)溶劑脫混現(xiàn)象。 20. 說(shuō)關(guān)于薄層板加熱變黑的問(wèn)題，其實(shí)很容易解決：當(dāng)噴完顯色劑后不用在放烘箱里烘了，可以用電吹風(fēng)在板子背面吹吹就能顯色了。 24. 板鋪好后，自然涼干最好，一定是要從玻板后看也是干的，注意一定要放平，最好控制空氣流動(dòng)；然后再放到烘箱中活化，這樣就不會(huì)有裂開(kāi)的現(xiàn)象了； 如果直接鋪好后或者只是硅膠表面是干的，放進(jìn)烘箱都會(huì)有裂開(kāi)的。 30. 配制CMCNa溶液，%，%左右，%即可。倒出上清液，（非常清，也同時(shí)消除了過(guò)濾過(guò)程中可能發(fā)生的污染）。要放冷。 玻板： 49. 選擇合適的薄層板（如：2010 cm），清潔干凈（先用洗手液或洗衣粉清洗，再用自來(lái)水沖洗干凈，接著用蘸有乙醇的棉花擦拭干凈，最后把板吹干或烘干），放置于清潔處，備用。 總結(jié)：完整、平滑、清潔！ 研磨： 56. 硅膠和粘合劑的比例不用固定，稀點(diǎn)鋪薄板，稠點(diǎn)鋪厚板，以目的決定比例。研磨時(shí)要順著一個(gè)方向，速度不宜快，要順著研缽的邊緣，觀察仔細(xì)，一定要把氣泡趕盡殺絕。 66. 研磨時(shí)防止氣泡可以加少量的乙醇或者丙酮；加入幾滴乙醇或丁醇，可起到消泡的作用。表面應(yīng)均勻，平整，無(wú)麻點(diǎn)、無(wú)氣泡、無(wú)破損及污染。顛板（上下左右或傾斜根據(jù)板的涂布情況而定）。此過(guò)程要與前面步驟連續(xù)進(jìn)行，且不宜久顛，以保證顛好后硅膠還有一定的流動(dòng)性，放置到平臺(tái)時(shí)仍可以靠自身流動(dòng)修正顛板及移動(dòng)所產(chǎn)生的不均。干燥后再活化，否則板會(huì)開(kāi)裂。 97. 鋪制好的薄層板先讓其稍干后，即看不出有明顯的水印，放入烘箱內(nèi)用50度以下的溫度并開(kāi)鼓風(fēng)干燥30分鐘，再升溫干燥至干，注意升溫過(guò)快在使用的過(guò)程中有可能發(fā)生起層的現(xiàn)象，不利于分離，以上方法經(jīng)本人兩年多的實(shí)踐，效果較好且耗時(shí)又不太長(zhǎng)。 點(diǎn)樣： 105. 藥典：點(diǎn)樣器 一般采用微升毛細(xì)管或手動(dòng)、半自動(dòng)、全自動(dòng)點(diǎn)樣器材。你可以到藥店買1～2ml的注射器作為點(diǎn)樣器，可以滿足TLC鑒別的要求，而且很便宜哦！ 109. 點(diǎn)樣，我上學(xué)的時(shí)候，老師用比較便宜的進(jìn)樣器（大約10幾塊錢吧，10μl即可），將針尖打磨圓滑，老師好像是用銼一點(diǎn)一點(diǎn)銼的，這樣點(diǎn)樣的時(shí)候樣品溶液不容易沿針尖上行（甲醇溶液都這樣），并且針尖不會(huì)刺破已經(jīng)鋪好的薄層板。 113. 對(duì)于點(diǎn)樣我也有些心得。 117. 層析缸在展開(kāi)前最好平衡一個(gè)小時(shí)左右，讓里面的展開(kāi)劑平衡。高效液相色譜、質(zhì)譜、氣譜等屬于儀器分析。TLC法有著悠久的歷史,隨著經(jīng)濟(jì)發(fā)展,對(duì)外交流增多,很多實(shí)驗(yàn)室已采用商品化的薄層板,如滌綸片基硅膠板。以上是TLC的長(zhǎng)處,但應(yīng)當(dāng)指出,TLC在自動(dòng)化程度及分離效果上比氣相色譜和高效液相色譜稍差,分析特別復(fù)雜的樣品有時(shí)有困難,也不適于揮發(fā)性樣品的分析。置玻片于80℃烘箱干燥,轉(zhuǎn)入干燥器冷卻至室溫,備用。以下是配置CMCNa過(guò)程中需要注意的方面：先將稱好的CMCNa加入所需水量的8/10,讓其充分溶漲后,再加熱煮沸,然后將剩余水慢慢加入。如果有抽濾裝置你可以直接把CMCNa溶液濾過(guò)，就可以不必等它沉淀再取上清液了，這樣做還有兩個(gè)好處：一是節(jié)省CMCNa溶液，二是倒濾過(guò)的CMCNa溶液的時(shí)候不必?fù)?dān)心會(huì)把下層的不溶物倒出來(lái)。 關(guān)于薄層板的要求：(1)載板要求平滑清潔，沒(méi)有劃痕，在使用前可用洗滌液或肥皂水洗滌，再用水沖洗干凈。(2)依據(jù)薄層板使用需要，將適量研好的吸附劑倒在薄層板上，先用小錘將吸附劑蕩勻，傾斜層析板，使吸附劑流至層析板一側(cè)，待吸附劑蓄積一定量后，再反向傾斜層析板，使吸附劑回流；然后是另外兩個(gè)方向，重復(fù)上述操作，后輕顛幾下薄層板即可。(2)加甲酸是因?yàn)樵摌悠肥撬嵝缘?，加酸的量和該物質(zhì)的酸性成正比關(guān)系，加水可能是因?yàn)闃悠肥擒疹惖挠盟崴鲆幌戮彌_，目的就是讓斑點(diǎn)圓滑，不脫尾，展距良好。解決辦法：(1)在展開(kāi)劑中加幾滴甲酸或冰醋酸；(2)展開(kāi)時(shí)以氨水飽和；(3)在鋪板時(shí)用稀酸溶液（～）代替水制成酸性薄層，在鋪板時(shí)用稀堿溶液（～）代替水制成堿性薄層。注意要少量地慢慢混合，因?yàn)殄i的七氧化物有爆炸性。 關(guān)于裂板：(1)板子會(huì)裂口，一則可能是因?yàn)楣枘z的比例太大，二則可能是板在常溫下沒(méi)有完全晾干，從表面看是干了，但是最中間的沒(méi)有干，所以在烘箱中活化導(dǎo)致裂口。 因此希望能找到一種粘合劑，在配置時(shí)具有有機(jī)和無(wú)機(jī)粘合劑的優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)勻漿不易凝固，且能用濃硫酸顯色。染料合成屬于有機(jī)反應(yīng),每步反應(yīng)通常在1小時(shí)～5小時(shí),不同品種的不同步驟差別很懸殊。因?yàn)樵邳c(diǎn)樣的瞬間,既要使溶液點(diǎn)到板上,又不能把板層上的硅膠扎破,是一項(xiàng)難度較大的操作,扎破硅膠容易導(dǎo)致展開(kāi)的斑點(diǎn)拖尾而影響判斷。用過(guò)的玻璃棒經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單清洗可立即再次使用,環(huán)保和經(jīng)濟(jì)性能強(qiáng)于毛細(xì)管。有文獻(xiàn)建議完全密封,放入有藍(lán)色硅膠的干燥器中,但是結(jié)合實(shí)際考慮,在合成中應(yīng)用不是很方便,也確實(shí)沒(méi)有必要。 CMCNa的處理也可進(jìn)行離心，5000rpm離心20min。鋪制薄層板要求玻璃板干凈、整潔、不掛水珠的。尤其是載板的四個(gè)角，容易高出玻璃板其他部位，所以要格外注意。這樣水分是慢慢由內(nèi)而外散發(fā)，而不是由外向內(nèi)散發(fā)，避免了表面成膜，里面還在散發(fā)水氣，豈有不裂、不爆的道理！關(guān)于展開(kāi)劑：分離的樣品酸性比較大，一般在展開(kāi)劑中加酸?；蛘呤褂貌煌墓潭ㄏ?。b、展開(kāi)劑選擇不當(dāng)附：1. 吸附層析的基本原理是什么？吸附層析是將吸附劑涂布于玻璃板或金屬板上成為一薄層（～1mm），待分離的試液點(diǎn)在薄層的一端，離邊緣一定距離處，然后在層析缸中用適宜的展開(kāi)劑展開(kāi)。若斑點(diǎn)易擴(kuò)散，則可先點(diǎn)上少許試液，待斑點(diǎn)干后，再點(diǎn)第二次，因?yàn)辄c(diǎn)樣斑點(diǎn)大，會(huì)引起分離后的斑點(diǎn)擴(kuò)散，影響展開(kāi)后的分離度。點(diǎn)樣點(diǎn)的起始線應(yīng)在距玻璃板底邊2cm處，防止因點(diǎn)樣太低而原點(diǎn)直接浸入展開(kāi)劑中。吸附力強(qiáng)的物質(zhì)相對(duì)地移動(dòng)得慢些，吸附力較弱的物質(zhì)則相對(duì)地移動(dòng)得快些，這樣經(jīng)適當(dāng)時(shí)間后，試樣組分就彼此相互分離了。所以要以實(shí)際分離樣品需要而定。c、點(diǎn)樣量過(guò)大。但要提出樣品溶液不能太濃，濃度太大，點(diǎn)下的樣品不能被硅膠很好的吸收，不利于分離。飽和非常重要，邊緣效應(yīng)很嚴(yán)重的不妨用下端浸在展開(kāi)劑中的濾紙上，貼在展開(kāi)缸的內(nèi)壁，這樣飽和效果會(huì)好一些。薄層板鋪好后一定要放置在平的臺(tái)面上，否則難保證板面硅膠的厚度均勻。關(guān)于研磨及鋪板要求：1. 硅膠的研磨，當(dāng)然是一個(gè)方向了，可以適量的加入一定量的無(wú)水乙醇或丙酮來(lái)消泡，也可以適當(dāng)攪拌后在干凈容器內(nèi)超聲，效果都是不錯(cuò)的。）更難能可貴的是，可以收集下面沒(méi)有充分溶解的CMCNa。需注意：1）CMCNa溶液煮了以后不能再用冷水兌，否則，幾天以后就會(huì)變綠，起霉。剪好后的板盡量在3日內(nèi)使用,否則硅膠板的邊緣效應(yīng)更強(qiáng),而且吸收實(shí)驗(yàn)室空氣中的復(fù)雜成分后,會(huì)使硅膠板表面變黃,甚至在紫外燈下可以顯色。即使前期工作都順利完成,在展開(kāi)過(guò)程中仍然可能因?yàn)榘唿c(diǎn)的移動(dòng)路徑傾斜而影響判斷。如何解決這個(gè)問(wèn)題還要經(jīng)過(guò)實(shí)踐來(lái)檢驗(yàn)。因此利用薄層色譜法研究反應(yīng)情況是可行的。(1)薄層色譜適用于揮發(fā)性較小、在空氣中比較穩(wěn)定的物質(zhì),象苯胺、甲苯等易揮發(fā)物質(zhì)和重氮鹽等易分解物質(zhì)不適用此法分析,但此類物質(zhì)并不影響薄層色譜的應(yīng)用。(2)正確的方法是先用低溫大約40度左右烘30分鐘左右，或在常溫下涼幾天，然后再用105度活化。 實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題(1)在工作中研究過(guò)用硫酸乙醇顯色作定量分析的品種，但凡加了CMC的板都易烘糊，尤其是溫度高于100度時(shí)，后改用不加CMC鋪的水板來(lái)作，就不會(huì)有烘糊現(xiàn)象，故也可推論CMC易于與硫酸起糊化反應(yīng)。 關(guān)于顯色： 通用的顯色方法 分離的化合物若有顏色，很容易識(shí)別出來(lái)各個(gè)樣點(diǎn)。(4)在層析缸口涂適量凡士林，增加密封性；(5)根據(jù)展開(kāi)劑邊緣效應(yīng)的大小，確定展開(kāi)劑平衡時(shí)間的長(zhǎng)短，一般平衡時(shí)間在30分鐘即可。如有需要，可以雙手10個(gè)指頭托住玻璃板，有節(jié)奏的顛簸，使得糊狀硅膠分布勻稱。（真正洗干凈的玻璃，很快就可以晾干。關(guān)于CMCNa的后處理，過(guò)濾，或者抽濾都可以，有的實(shí)驗(yàn)者覺(jué)得可能速度很慢，而且又容易浪費(fèi)。CMCNa溶液煮了以后不能再用冷水兌，否則，幾天以后就會(huì)變綠，起霉。(3)將硅膠糊均勻涂于()cm2載玻片上,～(