【正文】 紙色譜所用的顯色劑與薄層色譜法基本相同，但含硫酸的顯色劑不宜使用。 甲酰胺適合分離弱極性或中等極性的生物堿；水適合分離水溶性生物堿。 硅膠適用注意：硅膠為酸性吸附劑，易造成拖尾或復斑，影響分離效果。 如三尖杉中的抗癌生物堿三尖杉酯堿和高三尖杉酯堿的分離，兩者結構僅差一個亞甲基。 （氧化苦參堿的極性大于苦參堿，難溶于乙醚） 漢防己中漢防己甲素和漢防己乙素的分離。也可用含氨水的乙醇洗脫液直接洗脫，中和洗脫液，回收乙醇即得總生物堿。 ④ 個別沉淀試劑可用于分離純化生物堿，如雷氏銨鹽可用于沉淀分離季銨堿。 原因：生物堿在酸性條件下成鹽，易溶于水與沉淀試劑反應，所生成沉淀易于觀察。 胍（ ） 氮原子由于附近取代基的空間立體障礙或分子構象因素，而使質子難于接近氮原子，堿性減弱。 阿馬林（ ） 新士的寧（ ） 士的寧（ ） （ 2）共軛效應： 當生物堿分子中氮原子的孤電子對與 π 電子基團共軛時，一般使生物堿的堿性減弱。 電性效應（包括誘導效應和共軛效應），能影響 N原子上電子云排布，從而影響堿性的大小。 ②pKa2 ～ 7為弱堿，如芳香胺、 N六元芳雜環(huán)類生物堿。 酯的堿水解 （二）生物堿鹽 一般易溶于水，可溶于甲醇、乙醇類，難溶于親脂 性有機溶劑。 不溶或難溶于水，但溶于酸 水。 個別小分子固體及少數呈液態(tài)的 生物堿如麻黃堿、煙堿等具揮發(fā)性 ，可用水蒸氣蒸餾法提取。如吳茱萸中的吳茱萸堿。 此類生物堿可以看成由 兩個異喹啉環(huán)稠合而成 ，依據兩者結構母核中 D環(huán)氧化程度不同，又分為 小檗堿類和原小檗堿類。 （三）異喹啉類生物堿 這類生物堿 來源于苯丙氨酸和酪氨酸系 ，具有異喹啉或四氫異喹啉的基本母核，在植物中分布廣泛，數目較多，具有多方面的生物活性。 此類生物堿分子較小，結構簡單， 很多呈液態(tài) 。第二章 生物堿 考點精要： 、存在形式及重要成分 （堿性及其與結構的關系、沉淀反應） ：苦參、麻黃、黃連、川烏、洋金花、馬錢子 第一節(jié) 基本內容 一、生物堿的定義 生物堿（ Alkaloids）指來源于生物界的一類 含 氮有機化合 物 。如檳榔中的 檳榔堿、檳榔次堿 ，煙草中的 煙堿 ，胡椒中的 胡椒堿 等。根據其基本結構又分為多種類型，主要類型如下。前者多為季銨堿，如黃連、黃柏、三棵針中的小檗堿；后者多為叔胺堿，如延胡索中的延胡索乙素。 這類生物堿的結構較復雜，如蘿芙木中的 利血平 、番木鱉中的 士的寧 等。 咖啡因 等個別生物堿具有 升華性 。 （ 1） 季銨堿型生物堿： 為離子型化合物，易溶于水和酸水，可溶于甲醇、乙醇及正丁醇等極性較大的有機溶劑，難溶于親脂性有機溶劑。 無機酸鹽水溶性大于有機酸鹽； 無機酸鹽中含氧酸鹽的水溶性大于鹵代酸鹽； 小分子有機酸鹽水溶性大于大分子有機酸鹽。 ③pKa7 ～ 11為中強堿，如脂肪胺、脂雜環(huán)類生物堿。 （ 1）誘導效應 生物堿分子中的氮原子上的電子云密度可受氮原子附近供電基（如烷基）或／和吸電基（如各類含氧基團、芳環(huán)、雙鍵）誘導效應的影響。常見的有苯胺和酰胺兩種類型。如麻黃堿堿性小于去甲麻黃堿，山莨菪堿堿性介于東莨菪堿與莨菪堿之間，以及利血平堿性較弱等。 利用沉 淀反應鑒別生物堿時，應注意假陰性和假陽性反應。 ⑤ 某些生物堿沉淀反應可用于生物堿的定量，如硅鎢酸試劑反應。 二、生物堿的分離 （一）生物堿的初步分離 將總生物堿按堿性強弱、酚性有無 及是否水溶性初步分成 5個部分，一般分離流程如下： 生物堿的初步分離流程圖 圖續(xù) 1 圖續(xù) 2 （二）生物堿單體的分離 方法：酸水 堿化 萃取法 注意： ① 強堿在弱酸性條 件下能形成生物堿鹽，易溶于水；弱堿則需在較強酸性條件下形成生物堿鹽而溶于水。 （漢防己甲素的極性小于漢防己乙素，可溶于冷苯） 生物堿鹽：如麻黃中分離麻黃堿、偽麻黃堿。具體方法是以硅膠為支持劑，以 ， ，首先洗脫的是高三尖杉酯堿，中間部分是二者的混合物，最后部分是三尖杉酯堿?？稍谕夸伖枘z薄層時加稀堿（ ～ ）或緩沖溶液，制成堿性薄板；或使色譜過程在堿性條件下進行，即在展開劑中加入少量堿性試劑，如二乙胺、氨水等。 （ 2）展開劑： 分離脂溶性生物堿，應以親脂 性有機溶劑作展開劑，如三氯甲烷 苯（ 1： 1）等； 分離水溶性生物堿，則應以親水性的溶劑作展開劑，如 BAW系統(tǒng)（正丁醇 乙酸 水 =4： 1： 5，上層）。 （三）高效液相色譜 生物堿的高效液相分析可采用分配色譜法、吸附色譜法、離子交換色譜法等。 此外，具有揮發(fā)性的生物堿可用氣相色譜法檢識，如麻黃生物堿、煙堿等。 酰胺氮，孤電子對與羰基形成 pπ 共軛效應，使其堿性極弱。然后利用總堿中個成分極性的差異，采用溶劑法和色譜法進行分離。前者為順式，后者為反式。 草酸麻黃堿難溶于水，而草酸偽麻黃堿易溶于水；鹽酸麻黃堿不溶于三氯甲烷，而鹽酸偽麻黃堿可溶于三氯甲烷。 優(yōu)點：操作方便且安全，不需使用有機溶劑等。 三、黃連 （一）黃連中主要生物堿及其化學結構 主要成分： 小檗堿、巴馬丁、黃連堿、甲基黃連堿、藥根堿和木蘭堿等。 ① 游離小檗堿能緩緩溶解于水中，易溶于熱水或熱乙醇，在冷乙醇中溶解度不大，難溶于苯、氯仿、丙酮等有機溶劑。 四、川烏 （一）川烏中主要毒性生物堿 及其化學結構 烏頭所含生物堿多達 400多種，結構復雜，其中重要且含量較高的有： 烏頭堿、次烏頭堿和新烏頭堿 。 （四）川烏生物堿在臨床應用中應注意的問題 由于烏頭堿類化合物有劇毒，用之不當易致中毒，且毒性較強， ， 2～ 4mg即可致人死亡。H 20）， mp195～ 196℃ 。 堿性強弱：莨菪堿（ ）＞ 山莨菪堿 ＞ 東莨菪堿、樟柳堿（ ）。 莨菪醇 莨菪酸 （三）莨菪烷類生物堿的鑒別反應 莨菪烷類生物堿的鑒別反應 莨菪烷類生物堿具有一般生物堿的通性，能與多種生物堿沉淀試劑產生沉淀反應。其中毒機制主要為 M膽堿反應。 （ CHCl3），味極苦，有強毒性。此外還含少量的甲基麻黃堿、甲基偽麻黃堿和去甲基麻黃堿、去甲基偽麻黃堿。 2） 2%醋酸浸漬，不能溶解的生物堿是 [答疑編號 5630020310] 【正確答案】 A，秋水仙堿由于酰胺氮原子上的孤電子對與羰基形成 pπ 共軛效應，使其堿性極弱，故不溶于弱酸醋酸。馬錢子堿與濃硝酸接觸即顯深紅色，再加氯化亞錫溶液，則由紅色轉變?yōu)樽仙? 六、馬錢子 （一）馬錢子中主要生物堿的化學結構與毒性 主要生物堿： 士的寧（又稱番木鱉堿）和馬錢子堿，還含少量的 10余種其他吲哚類生物堿。 莨菪堿（或阿托品）在氯化汞的乙醇溶液中發(fā)生反應生成黃色沉淀，加熱后沉淀變?yōu)榧t色。 ② 東莨菪堿有較強的親水性，可溶于水，易溶于乙醇、丙酮、乙醚、三氯甲烷等溶劑，難溶于苯、四氯化碳等強親脂性溶劑。 ③ 山莨菪堿為無色針狀結晶，自苯中結晶含一分子苯， mp62～ 64℃ 。此外，烏頭不宜與半夏、瓜蔞、貝母、白蘞、白及等同用，臨床配伍時 應注意。 結構分類： 二萜類生物堿， 屬于四環(huán)或五環(huán)二萜類衍生物。 （三）小檗堿的鑒別反應 除了能與一般的生物堿沉淀試劑發(fā)生反應外，還具有以下特征性鑒別反應。 《中國藥典》指標 成分： 鹽酸小檗堿 。 利用生物堿鹽能夠交換到強酸型陽離子樹脂柱上，麻黃堿的堿性較偽麻黃堿弱，故不如偽麻黃堿鹽穩(wěn)定，可先從樹脂柱上洗脫下來，從而使兩者達到分離。但下列兩種特征反應可用于鑒別麻黃堿和偽麻黃堿。兩者均具有揮發(fā)性。 （五）苦參生物堿在臨床應用中應注意的問題 苦參堿可致膽堿酯酶活性下降 ，靜脈滴注苦參堿引起膽堿酯酶活性下降，產生倦怠乏力、納差等不良反應；苦參栓可致外陰過敏； 苦參注射液致過敏性休克并可致惡心、嘔吐；苦參素膠囊致乙肝加重等，臨床應用時需注意。 苦參堿既可溶于水，又能溶于三氯甲烷、乙醚、苯、二硫化碳等親脂性溶劑。 《中國藥典》指標成分： 苦參堿和氧化苦參堿 。 根據生物堿的性質和不同的色譜方法可選擇相應的固定相。 ① 有色生物堿可直接觀察斑點； ② 具有熒光的生物堿在紫外光下顯示熒光斑點； ③ 大多生物堿的薄層色譜可用改良碘化鉍鉀試劑顯色，顯橘紅色斑點。 （ 2）展開劑 展 開劑系統(tǒng)多以親脂性溶劑為主，一般以三氯甲烷為基本溶劑。 色譜柱類型：硅膠吸附色譜柱， C18反相色譜柱。如在阿片生物堿中，嗎啡具酚羥基而可待因無酚羥基，可用 5%氫氧化鈉分離。 總堿中各生物堿的堿性不同，可用 pH梯度萃取法進行分離。 常用