【正文】 片。（2）乙醇性伊紅液的配制 伊紅Y ～1g90%酒精100ml先將伊紅溶于酒精中，用玻璃棒研碎溶解后，每100ml加冰醋酸1滴。（3）脫水切片經(jīng)過染色后，通過各級酒精脫水，首先從低濃度到高濃度，低濃度酒精對伊紅有分化作用，切片經(jīng)過低濃度時間要短，向高濃度時逐步延長脫水時間；脫水不徹底，使切片發(fā)霧，在顯微鏡下組織結(jié)構(gòu)模糊不清。第四篇：病理組織的免疫組織化學技術探討病理組織的免疫組織化學技術探討【摘要】目的：探討病理組織的免疫組織化學技術?；顧z穿刺：經(jīng)過CT掃面確認病變位置，囑咐患者在活檢穿刺前5個小時之內(nèi)禁食，在CT引導下經(jīng)皮穿刺取得病理標本進行檢驗。在加抗體的時候，應該選擇單克隆的抗體，因為所有組織標本的來源基本不同，抗原的含量不一樣，細胞分化程度也是不一樣的，所以顯色反應的時間也是不一樣的[3]。本研究結(jié)果顯示，50例患者，經(jīng)穿刺活檢，AFP、Glypican3陽性的有32例，%，經(jīng)免疫組織化學技術檢驗，47例患者的細胞組織呈現(xiàn)變異性，%，免疫組織化學技術檢驗的陽性率明顯高于穿刺活檢的陽性率，與穿刺活檢相比，免疫組織化學技術在腫瘤診斷中具有優(yōu)越性，比較差異具有統(tǒng)計學意義（P綜上所述，在病理組織診斷中運用免疫組織化學技術具有良好的效果，準確性高，在不同類型的腫瘤疾病中也可以比較準確的判斷，從而為患者的疾病治療提供有效的依據(jù)，值得臨床推廣使用。石蠟切片：組織經(jīng)石蠟包埋后制成的蠟塊，用切片機制成切片的過程稱為石蠟切片法。EnVision復合物是利用一種多聚化合物將HRP或AKP和第二抗體(抗鼠或抗兔IgG)同時標記在一個多聚化合物上，即形成酶—多聚化合物—第二抗體巨大復合物。抑制實驗：待檢標本因與未標記的特異性抗體反應而影響了與標記的特異性抗體結(jié)合，使染色結(jié)果明顯減弱或轉(zhuǎn)陰。陰性對照 negative control 用確認不含已知抗原的標本作對照，免疫組化染色結(jié)果陰性者。抗原修復(Antigen retrieval，AR)技術：是指石蠟、冰凍、火棉膠、塑料切片免疫組織化學（IHC）前用胰蛋白酶、尿素、表面活性劑、微波緩沖液和金屬鹽等，通過機械的方法斷開因福 爾馬林固定的導致的抗原表位和不相關蛋白間的交聯(lián)鍵，使被掩蓋的抗原決定簇或變性的抗原重新暴露或抗原性得到一定程度的恢復，使抗體更好的滲透，與表位結(jié) 合。Carnoy液：固定胞漿和胞核,對染色體固定佳,穿透力強,適用于外膜致密的組織脫水：某些溶劑置換組織內(nèi)水分的過程，能夠使組織脫水的化學物質(zhì)稱為脫水劑。例如，增生細胞核是否呈現(xiàn)陽性以及陽性細胞的多少都可以指示著腫瘤細胞的增長速度，為患者的預后提供依據(jù)。在免疫組織化學染色技術中，抗體是最基本也是最重要的材料，分為第一抗體和第二抗體，第一抗體是針對組織細胞中的靶細胞抗原或者目的抗原的抗體，與靶細胞中的抗原結(jié)合，而第二抗體是用來放大反應的，當?shù)谝豢贵w和抗原結(jié)合之后，再與第二抗體結(jié)合，第二抗體是可見的，方便檢驗。我院以腫瘤患者50例為研究對象，采用免疫組織化學染色技術診斷，取得了滿意的效果，現(xiàn)報道如下。標簽要附貼牢固。組織切片脫蠟應徹底，脫蠟好壞主要取決于二甲苯的溫度和時間，所有的時間都是指新的二甲苯在室溫25℃以下時，如果二甲苯是用過一段時間，切片又比較厚，室溫低應增加脫蠟時間，脫蠟不凈是影響染色不良的重要原因之一。用蒸餾水補足600ml，加入400mg碘酸鈉充分混勻，蘇木精染液呈紫紅色。14．無水乙醇II 2min。6．稀氨水30s。24．二甲苯III 2min。16．85%酒精20s。8．80%酒精1min。鈣鹽和各種微生物也可染成藍色或紫藍色。95%II酒精1min。自來水洗1min。無水乙醇洗去二甲苯1min2次。因此病理學工作者必需學習和掌握這種染色方法。組織冷凍過硬易碎，若冷凍不夠，組織塊硬度不足，切片呈粥糜狀，無法成片，應用間歇冷卻法繼續(xù)冷卻。冰凍組織周圍的水不宜過多，用手檢查組織塊的硬度，當可切成厚薄一致的切片時，即可切片。組織凍結(jié)后，將組織固著器裝到切片機上，調(diào)整組織的切面與刀刃平行并貼近刀刃，將厚度調(diào)至適當位置后，關閉觀察窗。（二）冰凍切片法冰凍切片在組織學技術中應用廣泛，對臨床快速病理診斷尤其具有重要意義。傾角過大切片上卷，不能連在一起。時間不足，則石蠟不易浸透。（2）組織脫水、透明和浸蠟組織脫水用的各級酒精，應保證相應濃度，以便組織脫水徹底。3．注意事項（1）組織的取材和固定 取材時，組織塊的大小厚薄應適當，過大、過厚的組織，固定液不易滲透，易引起固定不良。而胃腸等組織，應將漿膜面朝上）。將切片刀裝在刀架上，刀刃與蠟塊表面呈5℃夾角。要觀察病變的連續(xù)性，可制作連續(xù)切片。對于實驗動物（狗和兔等）組織，一般的脫水透明和浸蠟時間如下： 處理步驟處理時間（min）處理步驟處理時間（min）① 75%酒精長短不定二甲苯Ⅰ、Ⅱ⑥ 30 ② 85%酒精 120－300 二甲苯Ⅲ⑦ 60③ 95%酒精Ⅰ和Ⅱ 120－300 56－58℃石蠟⑧ 30 ④無水酒精Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 30 56－58℃石蠟⑨ 60－120 ⑤無水酒精Ⅲ 60－120 56－58℃石蠟⑩ 120－180注：摘自病理學技術，人民衛(wèi)生出版社，王伯，李玉松，黃高，張遠強主編。浸蠟的過程是：二甲苯石蠟混合液（1：1）1小時 二甲苯石蠟混合液（1：2）1小時石蠟（1）1小時30分 石蠟（2）1小時30分上述過程可在56℃～58℃恒溫箱中進行，含二甲苯的混合液可用磨口小瓶盛裝。故組織經(jīng)正丁醇脫水后，不須經(jīng)二甲苯透明。酒精固定的組織材料不需沖洗。由于一般把組織塊浸入固定液后數(shù)小時，固定液滲入組織液的深度只達2到3厘米。管狀，囊狀和皮膚組織應注意垂直切?。M切）。以石蠟切片法為代表，切片的基本制作過程是：組織取材→固定→沖洗→脫水→透明→浸蠟→組織包埋→組織切片→展片附貼→切片脫蠟→染色→脫水→染片透明→封固。病理報告簽發(fā)時限：冰凍報告一般在收到標本后半小時左右發(fā)出臨時冰凍報告。一、手術中取下的標本（不論組織大?。┒急仨毸妥霾±頇z查，不得隨意丟棄。開展快速石蠟切片病理診斷技術，既能使患者得到盡早診斷，從而得到及時治療，減輕痛苦，同時又能使病人縮短就診時間及住院天數(shù)，減輕醫(yī)療費用，方便了病人，實為一種優(yōu)質(zhì)、簡便、安全、快速的好方法。其程序基本是活檢當天下午取材，晚上組織脫水及浸蠟，第二天上午包埋切片及染色，當切片送達醫(yī)生手里時，已是第二天的上午，下午看閱切片，至復檢醫(yī)生手里時，已是第三天的時間了。超聲波快速石蠟制片具有操作簡便，時間短不易誤診，病理切片資料可長期保存等優(yōu)點，目前病理科經(jīng)過一段時間的前期準備及試驗工作，該項目質(zhì)量可靠，結(jié)果穩(wěn)定，制片質(zhì)量近似于常規(guī)石蠟切片技術，完全符合病理診斷的要求，大大地提高了工作效率。周六、日不做快速石蠟切片檢查。然后由手術室專職人員將冰凍標本 ﹑病理申請單一同送到病理科。七、凡違反上述規(guī)定者，按性質(zhì)﹑后果，責任到人。采取病料越新鮮越好，一般不超過死后24小時。二、固定固定的目的是迅速將組織細胞殺死，使細胞中的蛋白質(zhì)，糖，脂肪等凝固，從而保持與活