某公司pcr系列產(chǎn)品操作培訓(xùn)教材-文庫吧在線文庫
【正文】 于冰箱 4℃ 存放，并在一周時間內(nèi)檢測。 樣本保存 ?樣本采集后，如若不能馬上檢測，應(yīng)將樣本置于冰箱 4℃ 存放，并在一周時間內(nèi)檢測。 ?血漿樣本 用無菌注射針頭抽取患者靜脈血 2 ml，于 含有 EDTA作為抗凝劑 的無菌收集管中，室溫放置不應(yīng)超過 4 h， 1500 rpm離心 5 min，吸取血漿轉(zhuǎn)入 ml離心管中備用 樣本保存 ?樣本采集后，如若不能馬上檢測，應(yīng)將樣本置于冰箱 28℃ 存放，并在 72h內(nèi)檢測 ?20℃ 保存不超過 3個月 ?70℃ 下長期保存 ?應(yīng)避免反復(fù)凍融 DNA提取 1）取 200ul樣本于 （血清 /血漿 /陰陽質(zhì)控品 /陽性標準品 )； 2）加入 20ul蛋白酶 K； 3）加入 200ul溶液 L，混勻， 56℃ 溫浴 1015min； 4）加入 200ul無水乙醇，充分混勻； 5）將全部液體轉(zhuǎn)移至帶收集管的硅膠柱中； 6） 10000rpm離心 1min，棄廢液； 7）加入 500ul溶液 W1（確保已加入乙醇） ； 8） 10000rpm離心 1min，棄廢液； 9）加入 500ul溶液 W2（確保已加入乙醇） ； 10） 10000rpm離心 1min，棄廢液； 11）加入 500ul溶液 W2（確保已加入乙醇） ； 12） 10000rpm離心 1min，棄廢液； 13）空管離心， 12023rpm離心 3min，丟棄收集管； 14）將硅膠柱裝入新 ，開蓋 12min； 15）往硅膠柱中心加入 60200ul的 TE，靜置 35min； 16） 12023rpm離心 2min，棄柱得 DNA。 DNA提取 取 800ul樣本離心得沉淀 ↓ 加入細胞裂解液 50ul，煮沸 10min ↓ 12023離心 10min即可上機 若肉眼未見沉淀，可增加取樣量，再次離心收集沉淀； 若沉淀雜質(zhì)較多，可用細胞保存液洗滌 12次； 血液多樣本，用蒸餾水洗滌 12次； 粘液多樣本，取樣時盡量去除粘液。 應(yīng)注意防止爆蓋： 金屬浴可壓重物（冰盒、冰袋等） 水浴應(yīng)采用螺旋管蓋的離心管 確保離心管質(zhì)量合格 優(yōu)點 ：簡單、快捷、方便。 （可能會抑制 PCR反應(yīng)） ?檢查前 48小時內(nèi)不要作陰道沖洗，不要用避孕藥膏等陰道內(nèi)用 藥物 。 熒光基團 熒光淬滅基團 延伸時， Taq酶水解探針，使報告基團和淬滅基團分離而發(fā)出熒光，形成熒光信號。 ?男性尿道標本 用細小棉拭子伸入尿道約 24厘米，捻動拭子采集上皮細胞，將棉拭子置入無菌玻璃管，密閉送檢（采集標本前 2小時禁小便）。應(yīng)避免反復(fù)凍融。應(yīng)避免反復(fù)凍融。 提取前，應(yīng)
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