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18全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范要點(diǎn)-文庫(kù)吧在線文庫(kù)

  

【正文】 有工作人員都有責(zé)任保護(hù)自己和他人的安全 。 ? ② 根據(jù)本 《 規(guī)范 》 制訂本實(shí)驗(yàn)室的安全工作制度或安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序 ( SSOP) , 該制度或程序應(yīng)適用于現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)條件 , 并與實(shí)驗(yàn)室其它規(guī)定相一致 。 ? HIV1P24抗原檢測(cè)的敏感性為 30?90% , 低于病毒載量測(cè)定 。 ? HIV1抗體陽(yáng)性母親所生嬰兒早期的輔助鑒別診斷 。 ) ” , 在備注中應(yīng)注明 “ 3個(gè)月后復(fù)檢 ” ,同時(shí)進(jìn)行以下處理: ? 1) 隨訪復(fù)檢:每 3個(gè)月隨訪復(fù)檢 1次 , 連續(xù) 2次 ,共 6個(gè)月 。 ? 對(duì)篩查陰性和陽(yáng)性者 , 均需做好檢測(cè)后咨詢 。 ? 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 ? ① 陰性對(duì)照 ( NC) , HIV1陽(yáng)性對(duì)照 ( PC1) ,HIV2陽(yáng)性對(duì)照 ( PC2) NC 必須< , 排除 NC≥ , 計(jì)算 NC平均值 。 以唾液為樣品測(cè)定 HIV抗體的 ELISA、 免疫印跡法 ( WB) 試劑美國(guó) FDA已批準(zhǔn) 。 區(qū)別在于不用酶標(biāo)記抗體 , 而代之以紅色的膠體金( 或膠體硒 ) A蛋白 , 用滲濾 ( 或?qū)游?) 法作為洗滌方法 。 常用的主要有以下幾種: ? ① 明膠顆粒凝集試驗(yàn) ( PA) : PA是 HIV血清抗體檢測(cè)的一種簡(jiǎn)便方法 , 是將HIV抗原致敏明膠顆粒作為載體 , 與待檢樣品作用 ,混勻后保溫 ( 一般為室溫 ) 。 ? 以監(jiān)測(cè)為目的的檢測(cè)是為了解不同人群 HIV感染率及其變化趨勢(shì)而進(jìn)行的檢測(cè) , 檢測(cè)的人群包括各類高危人群和一般人群 。 ? 如果污染過(guò)重或者認(rèn)為樣品不能被接受 ,則應(yīng)將樣品安全廢棄 。 隨樣品應(yīng)附有送檢單 , 送檢單應(yīng)與樣品分開(kāi)放置 。 ? VCT(自愿咨詢檢測(cè) )和當(dāng)前防治工作的需求 , 新增了以下內(nèi)容 : HIV抗體檢測(cè)的替代策略 , 嬰幼兒 HIV感染診斷 , HIV RNA定量測(cè)定 ( 病毒載量測(cè)定 ) , CD4+/CD8+ T淋巴細(xì)胞檢測(cè) , 職業(yè)暴露預(yù)防和補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)室意外事故緊急處理措施 。 ? ( 2)應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選用適當(dāng)?shù)目鼓齽喝鏑D4+/CD8+T淋巴細(xì)胞測(cè)定可選用 K3EDTA或肝素或枸櫞酸鈉, HIV病毒分離、核酸定性 /定量檢測(cè)可選用 K3EDTA或枸櫞酸鈉。 ? 第三層容器:放在一個(gè)運(yùn)輸用外層包裝內(nèi) , 應(yīng)易于消毒 。 可作為對(duì) HIV感染者 /AIDS病人的診斷 、 報(bào)告和處理的實(shí)驗(yàn)室依據(jù) 。 ? HIV抗體檢測(cè)的要點(diǎn): ? 篩查試驗(yàn)陽(yáng)性不能出陽(yáng)性報(bào)告 。 ? ② 斑點(diǎn) EIA( dotEIA) :以硝酸纖維膜為載體 , 將 HIV抗原滴在膜上成點(diǎn)狀 , 即為固相抗原 。 目前已有在國(guó)內(nèi)被 SFDA批準(zhǔn)注冊(cè)的國(guó)外進(jìn)口試劑和國(guó)內(nèi)產(chǎn)品 。 主要適用于靜脈注射毒品 ( IDUs) 人群和其它高危人群的大面積流行病學(xué)調(diào)查 、監(jiān)測(cè) 。 ? PC1NC均值 ≥ , PC2NC均值 ≥ ? ③ Cut off值 = 陰性對(duì)照均值 + ? 小于 Cut off為陰性 , 大于或等于 Cut off為陽(yáng)性 ? 4) 報(bào)告: ? 對(duì) HIV抗體篩查試驗(yàn) , 呈陰性反應(yīng)者可出具 “ HIV抗體陰性 ” 報(bào)告 ( 可用附表 1) ; ? 對(duì)初篩試驗(yàn)呈陽(yáng)性反應(yīng)者不能出陽(yáng)性報(bào)告 , 可出具 “ HIV抗體待復(fù)查 ” 報(bào)告 ( 附表 1) 。 ? 符合 HIV1抗體陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn) , 報(bào)告 “ HIV1抗體陽(yáng)性 ( +) ” , 并按規(guī)定做好檢測(cè)后咨詢 、 保密和疫情報(bào)告工作 。 ? 2) 必要時(shí)可做 HIV1 P24抗原或 HIV核酸測(cè)定 , 但檢測(cè)結(jié)果只能作為輔助診斷依據(jù) , 確認(rèn)報(bào)告要依據(jù)血清學(xué)隨訪結(jié)果 。 ? ( 2) HIV P24抗原檢測(cè)方法 ? P24抗原的檢測(cè)通常是采用 ELISA夾心法 , 已知抗體包被固相反應(yīng)板孔底 , 加入待測(cè)血清 , 若血清中含有 P24抗原則與包被抗體形成抗原 抗體復(fù)合物 , 再加入酶 ( HRP) 標(biāo)記的 HIV1抗體與抗原結(jié)合 , 加底物顯色 , 在酶標(biāo)儀上讀結(jié)果 。 嬰幼兒體內(nèi)從母親得到的 HIV抗體持續(xù)存在時(shí)間最長(zhǎng)不超過(guò) 18個(gè)月 。 建立意外事故的登記和報(bào)告制度 。 在安排工作區(qū)域時(shí) , 要根據(jù)人員的工作種類和所涉及的生物材料 , 對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境做好安全檢查 。 ? ③ 保密制度納入年度考核 , 發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及時(shí)處理并根據(jù)情況修訂保密制度 。 ( 3)廢棄物處置和消毒 ? 1) 廢棄物處置: ? ① 廢棄物處置應(yīng)符合 《 實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求 》( GB 194892023) 。 ? ④ 污染的臺(tái)面和器具: 40%甲醛水溶液 , 也可以用過(guò)氧化氫或過(guò)氧乙酸 。 使用該策略判斷結(jié)果 , 陽(yáng)性報(bào)告須由確認(rèn)中心實(shí)驗(yàn)室和確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室或以上實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可的篩查實(shí)驗(yàn)室出具 。 前兩區(qū)為擴(kuò)增前區(qū) ,后兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū) 。 ? ② 每個(gè)實(shí)驗(yàn)人員 、 實(shí)驗(yàn)組分別使用各自的試劑及耗材 。 ? ③ 擴(kuò)增區(qū):核酸擴(kuò)增設(shè)備 、 冰箱 、 離心機(jī) 、 加樣器 、 廢棄物容器 。 已獲 FDA 批準(zhǔn)。 4 小時(shí)之內(nèi)分離血漿,運(yùn)輸前在 20 ℃或 70 ℃冷凍。 這個(gè)高峰在免疫系統(tǒng)產(chǎn)生反應(yīng)后 , 尤其是在細(xì)胞免疫出現(xiàn)后開(kāi)始下降 。 這不單是經(jīng)濟(jì)上的原因 , 更重要的是由于抗病毒藥物的副作用和療效原因 。30, 000c/ml時(shí)則為 80%。 ? ② 流式細(xì)胞儀檢測(cè)區(qū):流式細(xì)胞儀 ? 3) 功能分區(qū) ? 實(shí)驗(yàn)室原則上應(yīng)分為樣品處理區(qū)和流式細(xì)胞儀檢測(cè)區(qū) ,各區(qū)的功能是: ? ① 樣品處理區(qū)應(yīng)達(dá)到生物安全 Ⅱ 級(jí) ( BSL2)實(shí)驗(yàn)室要求 , 用于樣品處理 、 流式檢測(cè)樣品制備 。 ①當(dāng)收集兒童樣品時(shí),采用兒童用注射器、小試管。這種方法有助樣品的保存。 ?②不可檢測(cè)溶血或結(jié)冰的樣品。 ④ 如果樣品的采集時(shí)間已超出 48h, 不可檢測(cè) 。 同樣地 , CD8+ T細(xì)胞是 Tsuppressor/cytotoxic細(xì)胞 , 為 CD3+ 和 CD8+ 雙陽(yáng)性的細(xì)胞 。 表 3 BD公司應(yīng)用單平臺(tái)一步法建立的正常參考值范圍表 項(xiàng) 目 單 位 參考正常值范圍 CD3+/ CD45+ % 56%?85% CD3+絕對(duì)數(shù) 個(gè) /μ l 1027?2086 CD3++ CD8+/ CD45+ % 15%?34% CD3++ CD8+絕對(duì)數(shù) 個(gè) /μ l 323?836 CD3++ CD4+/ CD45+ % 30%?54% CD3++ CD4+絕對(duì)數(shù) 個(gè) /μ l 706?1125 CD4+/ CD8+比值 1?2* ? ( 6) 檢測(cè) CD4+、 CD8+ T淋巴細(xì)胞的意義 ? T淋巴細(xì)胞是機(jī)體免疫系統(tǒng)內(nèi)功能最重要的一群細(xì)胞 。如判斷 HIV感染者的臨床合并癥(當(dāng) CD4+ T淋巴細(xì)胞細(xì)胞< 200/?l時(shí),很容易發(fā)生卡氏肺孢子蟲(chóng)肺炎;當(dāng) CD4+ T淋巴細(xì)胞 50時(shí),易發(fā)生 CMV感染=。具體操作可按說(shuō)明書(shū)執(zhí)行。 ? ②肥皂和清水沖洗傷口或沾污的皮膚。 ( 2 )強(qiáng)化用藥程序:基本用藥程序加一種蛋白酶抑制劑,茚地那韋( 8 00mg , tid ,飯前 1h 及飯后 2h 服用),均使用常規(guī)治療劑量。 ③在患者可耐受的前提下,給予 4周的 PEP。 ③監(jiān)測(cè)暴露源:如果暴露源沒(méi)有陽(yáng)性或陰性的血清學(xué)化驗(yàn)結(jié)果應(yīng)立即檢測(cè),最好做快速試驗(yàn),因其結(jié)果可在幾十分鐘內(nèi)得到。不采取暴露后預(yù)防用藥者,也要定期檢測(cè) HIV抗體,檢測(cè)時(shí)間同前。 ④職業(yè)暴露安全藥品由國(guó)家免費(fèi)抗病毒治療藥品庫(kù)統(tǒng)一調(diào)配。 :00:5619:00:56March 7, 2023 ? 1他鄉(xiāng)生白發(fā),舊國(guó)見(jiàn)青山。 :00:5619:00Mar237Mar23 ? 1世間成事,不求其絕對(duì)圓滿,留一份不足,可得無(wú)限完美。 , March 7, 2023 ? 閱讀一切好書(shū)如同和過(guò)去最杰出的人談話。 2023年 3月 7日星期二 7時(shí) 0分 56秒 19:00:567 March 2023 ? 1一個(gè)人即使已登上頂峰,也仍要自強(qiáng)不息。勝人者有力,自勝者強(qiáng)。 。 2023年 3月 7日星期二 7時(shí) 0分 56秒 19:00:567 March 2023 ? 1做前,能夠環(huán)視四周;做時(shí),你只能或者最好沿著以腳為起點(diǎn)的射線向前。 , March 7, 2023 ? 雨中黃葉樹(shù),燈下白頭人。每年 1月 10日和 7月 10日前,省疾控中心匯總本省職業(yè)暴露情況,填寫(xiě)“艾滋病防治工作人員職業(yè)暴露事故匯總表”(附表 8),匯總后報(bào)至本?。ㄖ陛犑?、自治區(qū))衛(wèi)生廳(局),抄報(bào)中國(guó)疾控中心性艾中心。暴露后 1年內(nèi)要定期監(jiān)測(cè) HIV抗體,即分別在暴露后 4周、 8周、12周、 6個(gè)月監(jiān)測(cè)。 6) 登記、監(jiān)測(cè)、報(bào)告與保密 1 建立職業(yè)暴露登記和監(jiān)測(cè)制度 ①職業(yè)暴露登記制度:職業(yè)暴露事故的事故發(fā)生單位應(yīng)建立“艾滋病職業(yè)暴露人員個(gè)案登記表”(附表 7),對(duì)職業(yè)暴露情況進(jìn)行登記、保存和上報(bào)。由于服用 4周 AZT才有一定保護(hù)作用,如果無(wú)很大的副作用,預(yù)防性治療用藥時(shí)間應(yīng)持續(xù) 4周。 ? ⑤可介紹已發(fā)生職業(yè)暴露的人員到艾滋病防治機(jī)構(gòu)進(jìn)一步咨詢和處理。 ? ( 2)艾滋病的職業(yè)暴露后預(yù)防: ? 艾滋病的職業(yè)暴露:是指醫(yī)務(wù)工作者、實(shí)驗(yàn)室工作人員及有關(guān)監(jiān)管人員在從事 HIV/AIDS診斷、治療、護(hù)理、預(yù)防、檢驗(yàn)、管理工作過(guò)程中,暴露于含有 HIV的血液、體液和實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)液,即暴露于含有 HIV的液體等引起的危害。 ? 5.艾滋病實(shí)驗(yàn)室的安全防護(hù)和職業(yè)暴露預(yù)防 ? ( 1)由于甲醛有致癌作用,不宜用于生物安全柜和實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)空氣消毒。 AIDS是由 HIV引起的一組綜合征 , HIV主要侵犯人 CD4+ T淋巴細(xì)胞 , 導(dǎo)致其數(shù)量上的減少和功能缺陷 ,使機(jī)體免疫平衡被打破造成免疫功能低下 , 最終導(dǎo)致各種機(jī)會(huì)感染和腫瘤 。 ? 4) 為檢測(cè)免疫亞群而取血的同時(shí) , 用該血樣作自動(dòng)測(cè)定全血細(xì)胞 ( CBC) 計(jì)數(shù)白細(xì)胞 ( WBC) 及分類測(cè)定 ,報(bào)告淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)數(shù)值 。 ( 3)方法 ? ( 5) 結(jié)果報(bào)告 ? 1) 按照實(shí)驗(yàn)結(jié)果填寫(xiě) CD4+ 和 CD8+ T淋巴細(xì)胞檢測(cè)報(bào)告單 , 檢測(cè)人員簽字 。 如有以下現(xiàn)象發(fā)生 , 采取正確的方法處理: ① 如果樣品較熱或較冷 , 但沒(méi)有明顯的溶血或結(jié)冰 ,可以處理樣品 , 但要在工作表的報(bào)告上注明溫度條件 。 ?④應(yīng)選擇特定的方案,并且安排合適的時(shí)間收集和運(yùn)輸樣品。 ?對(duì)所有樣品編號(hào),并寫(xiě)明日期和收集時(shí)間。 ) 。> 100,000c/ml為 %。 病毒載量與 6年發(fā)病率的關(guān)系為:500c/ml時(shí) %。 ? 3) 病程監(jiān)控 ? 根據(jù) HIV感染發(fā)生后病毒載量具有一定的變化規(guī)律 , 并且這種變化與疾病的進(jìn)程有著密切的相關(guān)性 。 ? 另外 , 許多 AIDS病人 /HIV感染者在接受抗病毒治療后其病毒載量可降至非常低的水平 , 還有少數(shù) HIV感染者在感染后長(zhǎng)期處于病毒水平非常低的狀態(tài) , 進(jìn)行 RNA測(cè)定時(shí)往往測(cè)不出來(lái) 。 能夠使用組織或體液樣品,例如陰道分泌物。 ? ( 3) 方法和試劑 ? 1) 方法 ? 常用的 HIV RNA定量測(cè)定方法有 : ? 逆轉(zhuǎn)錄 PCR試驗(yàn) ( RTPCR) 。
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