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20xx人教版高中生物選修一5-3血紅蛋白的提取和分離ppt同步課件-文庫吧在線文庫

2024-12-30 22:30上一頁面

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【正文】 不同的蛋白質(zhì)在凝膠中的移動過程的是 ( )。 答案 B [歸納整合 ]蛋白質(zhì)的提取和分離 步驟 操作 樣品處理 通過紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液等操作收集到血紅蛋白溶液 粗分離 通過透析法去除血紅蛋白溶液中的相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì) 純化 通過凝膠色譜法分離相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì) 純度鑒定 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳判斷純化的蛋白質(zhì)是否達(dá)到要求 單擊此處進(jìn)入 隨堂達(dá)標(biāo)檢測 旁欄思考題 你 能從凝膠色譜的分離原理分析為什么凝膠的裝填要緊密 、均勻嗎 ? 答案 凝膠 實際上是一些微小的多孔球體,小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道。 相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)分子不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部,只能分布在顆粒之間,通過的路程較短,移動速度較快;相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)分子容易進(jìn)入凝膠內(nèi)的通道,通過的路程較長,移動速度較慢。 3. 解析 本題考查電泳法分離蛋白質(zhì)的原理 。 5. 答案 血 紅蛋白是有色蛋白,因此在凝膠色譜分離時可以通過觀察顏色來判斷什么時候應(yīng)該收集洗脫液。 電泳技術(shù)就是在電場的作用下 , 利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)以及分子本身大小 、 形狀等性質(zhì)的差異 , 使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度 , 從而達(dá)到對樣品進(jìn)行分離 、 鑒定或提純的目的 。 緩沖溶液通常是由一或兩種化合物 (緩沖劑 )溶解于水中制得 ,調(diào)節(jié)緩沖劑的配比就可制得不同 pH范圍的緩沖液 。 練習(xí) 1. 解析 本題考查凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理 。 答案 B 特別提醒 血紅蛋白的分離方法及相關(guān)原理比較: 方法 原理 凝膠色譜法 根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì) 電泳法 根據(jù)各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身大小、形狀的不同進(jìn)行分離 【 例 2】 下 圖是用除去 DNA的濾液進(jìn)行血紅蛋白的提取和分離實驗的裝置,下列有關(guān)敘述不正確的是 ( )。鑒定的方法中 , 使用最多的是 SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳 。 (2)血紅蛋白的釋放 紅細(xì)胞在蒸餾水和甲苯的作用下破裂 , 釋放出血紅蛋白 。 洗滌次數(shù)過少 ,無法除去 ;離心速度 和時間 會使 等一同沉淀 , 達(dá)不到分離效果 。 血紅蛋白提取和分離的實驗操作與評價 樣品處理 粗分離 純化 純度鑒定 低速短時間離心 生理鹽水 除去雜質(zhì) (2)血紅蛋白的釋放 將洗滌好的紅細(xì)胞依次加入 至原血液體積 、 40%體積的 , 置于磁力攪拌器上攪拌 10 min, 使紅細(xì)胞吸水 , 血紅蛋白釋放出來 。 ③ 常用方法:瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳 。 (4)方法 常用的電泳方法有 和 。 1. 凝膠色譜法 (1)概 念 也稱做 , 是根據(jù) 分離蛋白質(zhì)的有效方法 。 (2)原理 ① 由 構(gòu)成的凝膠 , 內(nèi)部有許多貫穿的 。測定蛋白質(zhì)分子量時通常使用 。 在測定蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量時 , 通常使用 SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳 , 此方法也可用來分離蛋
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